Báo cáo thực hành sản xuất thức ăn: PHÂN TÍCH MỘT SỐ THÀNH PHẦN DINH DƯỠNG TRONG MẪU THỨC ĂN T4I

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HCM KHOA CHĂN NUÔI - THÚ Y  MÔN: SẢN XUẤT THỨC ĂN BÁO CÁO THỰC HÀNH PHÂN TÍCH MỘT SỐ THÀNH PHẦN DINH DƯỠNG TRONG MẪU THỨC ĂN T4-I TP HCM, tháng 11 năm 2020 Giảng viên: PGS TS Nguyễn Quang Thiệu Hướng dẫn: Phạm Phúc Thịnh BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HCM KHOA CHĂN NUÔI - THÚ Y  MÔN: SẢN XUẤT THỨC ĂN BÁO CÁO THỰC HÀNH PHÂN TÍCH MỘT SỐ THÀNH PHẦN DINH DƯỠNG TRONG MẪU THỨC ĂN T4-I TP HCM, tháng 11 năm 2020 Nhóm T4-I DANH SÁCH THÀNH VIÊN NHÓM T4-I Lớp lý thuyết: Thứ 4_Tiết 10, 11, 12 STT Họ tên Võ Phạm Danh Bùi Trí Nguyên Tạ Anh Thư Bùi Thị Ánh Tuyết Mai Thế Xuân Nhóm T4-I MSSV 17111020 17111095 17111141 17111162 17111176 MỤC LỤC Nhóm T4-I KHÁI QUÁT VỀ CÁC THÀNH PHẦN DINH DƯỠNG CÓ TRONG THỨC ĂN Các thành phần thức ăn: Nhóm T4-I THỨC ĂN Nước Vật chất khô (1) Chất hữu Chấ Hợp chất hữu có chứa Nitơ Hợp chất hữu khơng có chứa Nitơ CP = Ntóng số × 6.25 (2) BéoProtein thô (3) Xơ thô (4) Chứa nitơ potein Nguyê NFE (dẫn xuất vô đạm) Sơ đồ cấu tạo thức ăn Các dưỡng chất phân tích (%): Nhóm T4-I (1) Vật chất khơ (VCK) (2) Protein thơ (3) Béo thơ (4) Xơ thơ (5) Khống tổng số Nhóm T4-I PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH Chuẩn bị nguyên liệu: − Mẫu thức ăn dùng để phân tích xay nhỏ bảo quản hủ nhựa có nắp đậy Và xem có chứa 88% vật chất khơ  Chọn ngun liệu phân tích: Mẫu thức ăn T4-I  Phương pháp phân tích chung: (1) Ngun tắc (2) Dụng cụ, hóa chất (3) Cách tiến hành (4) Tính kết Tóm tắt q trình phân tích: Cách tính tốn: SD= Nhóm T4-I CV% = Điều kiện: CV < 5% Nhóm T4-I PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH VẬT CHẤT KHÔ TUYỆT ĐỐI MẪU T4-I (1) Nguyên tắc: − Các mẫu thức ăn có hàm lượng chất khơ lớn 86% xác định VCK tuyệt đối, mẫu nhiều nước cần phải xác định VCK khơng − khí trước sau xác định VCK tuyệt đối Mẫu (T4-I) sấy khơ 100-1050C, lượng nước hết, phần cịn lại chất khơ hồn tồn mẫu Dụng cụ: − − − − Cân phân tích có độ xác 0.0001g Chén nhơm Bình hút ẩm Tủ sấy Các bước tiến hành: − Chén nhôm (gồm chén: ký hiệu số 15 số 58) đem sấy 100-1050C từ 30-60 phút (nhóm làm làm 35p) Lấy để nguội bình hút ẩm (10p) Trọng lượng chén nhôm : chén 15 (5.2603g), chén 58 (5.2565) Nhóm T4-I 10 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH PROTEIN TỔNG SỐ MẪU T4-I (2) Phương pháp Kjeldahl - Nguyên tắc: Khi cho mẫu thức ăn tác dụng với dung dịch acid sulfuric(H 2SO4) đậm đặc đun nóng Nitơ protein bị vơ hóa thành (NH 4)2SO4 Sau để nguội hịa lỗng với nước, mẫu kiềm hóa với NaOH NH3 bị đẩy khỏi dung dịch - giữ lại acid boric (H3BO3) Đem định phân acid HCl 0.1N, lượng acid tiêu hao để trung hịa NH3 ta tính lương NH3, từ tính Nitơ tổng số suy lượng protein - tổng số Nito tổng số x 6.25= protein tổng số Dụng cụ hóa chất Bình Kjeldahl Bình tam giác Bộ đốt, chưng cất đạm Burette 25ml Ống đơng Cân phân tích có độ xác 0.0001g Phễu thủy tinh Chất thị màu (0.1% methyl red 0.1% bromocresol green) Acid HCl chuẩn 0.1N Acid sulfuric đậm đặc Hổn hợp chất xúc tác: sulfat đồng/ sulfat kali theo tỉ lệ 1/9 Sodium hydroxyd 35% Acid Boric (H3BO3) Nhóm T4-I 14 Tiến hành Có giai đoạn:  Giai đoạn vơ hóa: Ký hiệu mẫu để phân tích đạm M1 M2 thực thao tác sau : - Cân M1 (1.0013 g) , M2 (1.0016) tờ giấy lọc, gói cẩn thận, cho vào bình kjeldahl 750 - 800 ml, cho tiếp vào bình khoảng 12g chất xúc tác 30ml H2SO4 đậm đặc Đặt bình lên bếp đốt khoảng 75-90 phút dung dịch bình có màu xanh lục hồn tồn Nhóm T4-I 15  Giai đoạn chưng cất: - Chuẩn bị 50 ml acid boric bình tam giác 300 ml Đặt bình tam giác có chứa acid boric cho lượng acid phải ngập đầu ống nhựa hệ thống làm lạnh dẫn Cho thêm vào bình kjeldahl có chứa sẵn mẫu đốt 300ml nước cất 200ml NaOH 35% Đặt bình kjeldahl lên hệ thống chưng cất, mở điện nước Màu hồng acid boric bình tam giác hứng phía chuyển sang màu xanh đạt 300ml Nhóm T4-I 16  Giai đoạn phân định: Dùng burette có chứa acid HCl 0.1N định phân đến dung dịch chuyển sang - màu hồng màu ban đầu acid boric dừng lại Ghi lại thể tích HCl 0.1N để tính kết Tính kết 100 p • • • Nito tổng số = 0.001458 x a x 0.001458 số g Nitơ tương ứng với 1ml HCl 0.1N a: số ml HCl 0.1N thực dùng để tác dụng với NH mẫu (sau trừ lượng HCl mẫu trắng) • P: trọng lượng mẫu tính gam Bảng 2: Kết phân tích Protein tổng số mẫu T4-I Nhóm T4-I 17 NAME SAMPLE M1 M2 1.0013g 1.0016g V HCL 42.2 ml 41.9 ml % CP AVERAGE CV % 38.41 38.19 38.30% 0.41%  Trung bình: % Protein thơ = 38.30%  % protein thô chất khô mẫu = x 100 = = 43.40% Nhóm T4-I 18 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH BÉO THƠ CỦA MẪU THỨC ĂN T4-I (3) Nguyên tắc: − Lipid hay chất béo hình thành hóa hợp este hóa acid béo glycerin Chất béo hịa tan dung môi: ether, phenol, acetol, Khi xác định chất mỡ người ta thường dùng ether làm dung môi hịa tan nhiệt độ sơi thấp (35°C) − Ether làm bay liên tục, làm ngưng lạnh rơi qua mẫu lôi theo chất tan ether trở lại cốc đựng ether ban đầu Khi tiến trình hồn tất ether chưng cất ngưng lại phần chứa khác, phần cịn lại khơng bay chất béo thô − Khi xác định béo thô thức ăn thường dùng dung môi ether hịa tan chất béo, sáp, số sắc tố, Có phương pháp: (1) Phương pháp trực tiếp: sau chiết béo cân trọng lượng chất béo thô sau sấy khô (2) Phương pháp gián tiếp: sau chiết béo cân vào trọng lượng giảm của Dụng cụ, hóa chất: − Bộ dụng cụ chiết béo kiểu Soxhlet, Bình hút ẩm − Tủ sấy, Giấy lọc − Ether ethylique Cách tiến hành: − Bộ trích béo kiểu Soxhlet gồm có phận chính: bình cầu cầu dùng để chứa ether duới cùng, phận đe hịa tan chất beo, cung làm lạnh Nhóm T4-I 19 − Đặt tên mẫu đem phân tích lần lược M1 M2 sau thực thao tác sau: − Cân mẫu 2.0018 g 2.0097 g gói kín tờ giấy lọc theo thứ tự M1 M2 Cho gói mẫu vào tủ sấy 105 oC Lây mẫu ra, để nguội bình hút ẩm, ta trọng lượng sau sấy mẫu M1là 2.5525 g mẫu M2 2.5724 g − Tiếp theo, đặt gói mẫu vào phận hệ thống Soxhlet, rót ether vào lưng bình cầu duới cùng, lắp hệ thống ngưng lạnh vào, cho hệ thống hoạt động − Ether bình cầu đun sơi cách thủy, ether bị bốc theo theo đưởng cong lớn vào phận đến phận làm lạnh ngưng lại thành giọt rơi xuống phận − Ether phận vượt khỏi điểm cao đường cơng nhỏ theo đường cơng nhỏ xuống lại bình cầu (ngun tắc bình thơng nhau) − Sự tuần hoàn tiếp tục diễn Thời gian kết thúc tùy theo lượng chất béo có mẫu Nhóm T4-I 20 − Khi thấy ether ống hình trụ bị màu, kiểm tra chất béo hết chưa cách lấy ether ống hình trụ nhỏ lên mặt kính chờ cho ether bay hết không để lại vết mờ kính chất béo hết ngược lại phải tiết tục chiết béo − Kết thúc công đoạn chiết béo, lấy gói mẫu khỏi Soxhlet cho vào tủ sấy giờ.Sau đó, lấy mẫu để nguội bỉnh hút ẩm cân trọng lượng Ghi nhận số liệu Tính tốn kết quả: Sử dụng phương pháp gián tiếp để tính kết quả: Bảng 3: Kết phân tích Béo thơ mẫu T4-I NAME SAMPLE BEFORE EE AFTER EE % FAT M1 2.0018g 2.5525g 2.516 g 1.81 M2 2.0097g 2.5724g 2.5356g 1.83 AVERAGE CV % 1.82% 0.78%  Trung bình: % Béo thơ = 1.82%  % Béo thô chất khô mẫu = x 100 = = 2.06% Nhóm T4-I 21 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH XƠ THƠ CỦA MẪU THỨC ĂN T4-I (4) Phương pháp Henneberg Stoman - Nguyên tắc: Mẫu thức ăn nghiền nhỏ, đem xử ly dung dịch H2SO4 loãng, base loãng Acid ulfuric loãng thủy phân chất hòa tan acid carbonhydrat, biến thành đường đơn, ngồi phần protein bị hòa tan Còn base thủy - phân chất béo biến thành xà phịng Glycerin, hịa tan tồn protid Acid kiềm hịa tan phần chất khoáng, sau xử lý đem đốt, - trọng lượng phần bã chất xơ thơ Dụng cụ, hóa chất: Cân phân tích, độ xác 0,0001g Giấy lọc Cốc đun 600ml Bình hú ẩm Chén sứ, lò đốt, tủ sấy Hệ thống bếp đun Bơm hút chân không phễu lọc Buchner Dung dịch H2SO4 0,255N Dung dịch NaOH 25% - Cách tiến hành Cân xác 2g mẫu, gói giấy lọc mang chiết béo hệ thống Soxhlet từ – để loại bỏ bớt trọng lượng chất béo có mẫu - Sau chiết béo, sấy khô giấy lọc 105oC giờ, cân ghi lại trọng lượng Cho toàn mẫu chiết béo giấy lọc vào cốc 600ml cho dung dịch - H2SO4 đến vạch 200ml Đặt lên bếp đun sôi đun tiếp 30 pút kể từ bắt đầu sôi, tránh độ sôi lớn - làm mẫu bám lên thành cốc Sau đun, nhắc cốc để yên – 10 phút cho phần chất rắn lắng xuống Nhóm T4-I 22 - Lọc lần qua giấy lọc với bơm chân khơng, dung bình xịt rửa mẫu nhiều lần với - nước cất, sau dùng bình xịt tia rửa toang mẫu giấy lọc vào cốc đun Cho 10ml NaOH 25% vào cốc đun cho them nước cất đến vừa đủ 200ml, đun - sơi hồn lưu 30 phút kể từ bắt đầu sơi Lọc lần 2, chuyển tồn mẫu cốc đun lên giấy lọc, rửa nhiều lần với nước cất đem sấy khô 105oC giờ, để nguội bình hút ẩm 10 – 15 phút - Cân ghi lại trọng lượng Trong thời gian đun mẫu, sấy khô chén sứ 105 oC, để nguội bình hút ẩm - cân trọng lượng chén Xếp tờ giấy phần cho vào chén sứ để vào lò đốt 600 oC giờ, để - nguội bình hút ẩm đem cân Tính tốn kết quả: TL chất xơ cịn khống = TL giấy lọc sau lọc – TL giấy lọc trước lọc TL chất khoáng = TL chén sứ sau đốt – TL chén sứ khơng TL chất xơ = TL chất xơ cịn khoáng – TL chất khoáng Bảng 4: Kết phân tích Xơ thơ mẫu T4-I NAME PAPER SAMPLE AFTER DRY CUP AFTER BURN CF (%) M1_22 0.7960g 2.0033g 0.8599g 0.7898g 2.0046g 0.8505g 23.8146 g 19.0556 g 3.12 M2_51 23.8132 g 19.0535 g 2.92 AVERAGE CV % 3.02% 4.68%  Trung bình %xơ thơ = 3.02%  % Béo thơ chất khô mẫu = x 100 = = 3.42% Nhóm T4-I 23 Nhóm T4-I 24 PHÂN TÍCH KHỐNG TOÀN PHẦN CỦA MẪU THỨC ĂN T4I (5) Nguyên tắc - Mẫu thức ăn sau đốt nhiệt độ cao, chất hữu bị phân hủy hết, chất vơ - cịn lại gọi khống tồn phần hay gọi chất tro Dụng cụ Cân phân tích có độ xác 0,0001 g Lị đốt 500oC Chén sứ Kẹp gắp Bình hút ẩm Tiến hành Dùng chén sứ khơ có kí hiệu 4, 52 đem sấy khoảng 30 phút để - nguội bình hút ẩm 10 phút Cân trọng lượng chén 18.3512 ( chén số 4) 21.3822 (chén số 52) Sau cân 3.0036g mẫu vào chén số 3.0828g mẫu vào chén số 52 - Đặt chén sứ cân mẫu vào lò nung tiến hành nung 600oC Nhóm T4-I 25 - Sau nung lượng mẫu chén biến thành tro xốp màu trắng xá gắp để - nguội bình hút ẩm cân trọng lượng Trong nung có thấy hạt acid silic (HSiO3) bám vào chén mẫu làm mẫu khơng cháy hồn tồn phải ngừng đốt, để nguội, nhỏ vào vài giọt nước cất để hịa tan hết acid silic tíếp tục nung cháy hết hồn tồn Tính tốn kết % Khoáng tổng số= X100 Bảng 5: Kết phân tích Khống tổng số mẫu T4-I NAME CUP SAMPLE M1_4 M2_52 18.3512g 21.3822g 3.0036g 3.0828g AFTER BURN 18.4927g 21.5268g % ASH AVERAGE CV % 4.71% 4.69% 4.7% 0.3%  Trung bình: % khống tổng số = 4.7%  %Khống tổng số chất khơ mẫu = x 100 = = 5.33% NFE (DẪN XUẤT VÔ ĐẠM) Tóm tắt kết dưỡng chất phân tích: (1) Vật chất khơ (VCK): 88.24% (2) Protein thơ: 38.30% (3) Béo thô: 1.82% (4) Xơ thô: 3.02% (5) Khoáng tổng số: 4.7% NFE: NFE = VCK – Khống tổng số – Protein thơ – Béo thơ – Xơ thô = 88.24 – 38.30 – 1.82 – 3.02 – 4.7 = 40.4% % NFE chất khô mẫu = x 100 = Nhóm T4-I 26 = 45.78% Nhóm T4-I 27 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu thực hành Lý thuyết dinh dưỡng - Bộ môn dinh dưỡng gia súc – Khoa Chăn nuôi thú y – Trường Đại Học Nơng Lâm TP HCM Nhóm T4-I 28 ... HCM KHOA CHĂN NUÔI - THÚ Y  MÔN: SẢN XUẤT THỨC ĂN BÁO CÁO THỰC HÀNH PHÂN TÍCH MỘT SỐ THÀNH PHẦN DINH DƯỠNG TRONG MẪU THỨC ĂN T4-I TP HCM, tháng 11 năm 2020 Nhóm T4-I DANH SÁCH THÀNH VIÊN... CÁC THÀNH PHẦN DINH DƯỠNG CÓ TRONG THỨC ĂN Các thành phần thức ăn: Nhóm T4-I THỨC ĂN Nước Vật chất khô (1) Chất hữu Chấ Hợp chất hữu có chứa Nitơ Hợp chất hữu khơng có chứa Nitơ CP = Ntóng số. .. nguyên liệu: − Mẫu thức ăn dùng để phân tích xay nhỏ bảo quản hủ nhựa có nắp đậy Và xem có chứa 88% vật chất khơ  Chọn ngun liệu phân tích: Mẫu thức ăn T4-I  Phương pháp phân tích chung: (1)