Xây dựng quy trình công nghệ chiết tách, xác định thành phần hóa học của rễ cây mật nhân (eurycoma longifolia Jack) ở khu vực miền Trung Tây Nguyên và ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm.Xây dựng quy trình công nghệ chiết tách, xác định thành phần hóa học của rễ cây mật nhân (eurycoma longifolia Jack) ở khu vực miền Trung Tây Nguyên và ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm.Xây dựng quy trình công nghệ chiết tách, xác định thành phần hóa học của rễ cây mật nhân (eurycoma longifolia Jack) ở khu vực miền Trung Tây Nguyên và ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm.Xây dựng quy trình công nghệ chiết tách, xác định thành phần hóa học của rễ cây mật nhân (eurycoma longifolia Jack) ở khu vực miền Trung Tây Nguyên và ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm.Xây dựng quy trình công nghệ chiết tách, xác định thành phần hóa học của rễ cây mật nhân (eurycoma longifolia Jack) ở khu vực miền Trung Tây Nguyên và ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm.Xây dựng quy trình công nghệ chiết tách, xác định thành phần hóa học của rễ cây mật nhân (eurycoma longifolia Jack) ở khu vực miền Trung Tây Nguyên và ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm.
ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA VÕ KHÁNH HÀ NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ CHIẾT TÁCH, XÁC ĐỊNH THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA RỄ CÂY MẬT NHÂN (EURYCOMA LONGIFOLIA JACK) Ở MIẾN TRUNG – TÂY NGUYÊN VÀ ỨNG DỤNG TRONG CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM Chun ngành: Cơng nghệ thực phẩm Mã số: 9.54.01.01 TĨM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ KỸ THUẬT Đà Nẵng – Năm 2021 Cơng trình hồn thành TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Trương Thị Minh Hạnh PGS.TS Giang Thị Kim Liên Phản biện 1: Phản biện 2: Luận án bảo vệ hội đồng chấm luận văn tiến sĩ họp Đại học Bách khoa vào ngày … … tháng … … năm … … Có thể tìm hiểu luận văn tại: Trung tâm Học liệu Truyền thông, Đại học Đà Nẵng Trường Đại học Bách khoa Thư viện Khoa Hóa, Trường Đại học Bách khoa - ĐHĐN MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Mật nhân loại dược liêu có giá trị sử dụng phổ biến Tuy nhiên, nghiên cứu đối tượng chưa mang tính hệ thống, sản phẩm thực phẩm bổ sung mật nhân chưa nhiều đa dạng Nghiên cứu nhằm xây dựng quy trình cơng nghệ chiết tách, xác định thành phần hóa học, thăm dị hoạt tính sinh học rễ mật nhân miền Trung - Tây Nguyên, ứng dụng công nghiệp thực phẩm nhằm đa dạng hóa sản phẩm thực phẩm, nâng cao giá trị kinh tế khuyến khích bảo tồn nguồn nguyên liệu thiên nhiên Mục tiêu nghiên cứu Tìm kiếm, phát xác định hợp chất có hoạt tính sinh học đáng q rễ mật nhân miền Trung – Tây Ngun Từ đó, ứng dụng bổ sung vào quy trình sản xuất thực phẩm bảo vệ sức khỏe Đối tượng, phạm vi nội dung nghiên cứu Rễ mật nhân thu nhận Gia Lai Quảng Nam để khảo sát, chiết, phân lập, định danh, xác định thành phần, ứng dụng sản xuất thực phẩm quy mơ phịng thí nghiệm Phương pháp nghiên cứu 4.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết Tổng hợp tài liệu, tư liệu, sách báo, cơng trình nghiên cứu nước quốc tế rễ mật nhân nước giới 4.2 Phương pháp nghiên cứu thực nghiệm 4.2.1 Phương pháp phân lập Sử dụng phương pháp sắc ký cột kết hợp sắc ký lớp mỏng với hệ dung mơi thích hợp 4.2.1.1 Phương pháp định danh, xác định cấu trúc hóa học chất Sử dụng phương pháp phổ hồng ngoại, phổ khối, phổ cộng hưởng từ hạt nhân 4.2.1.2 Phương pháp tối ưu hóa số yếu tố ảnh hưởng phương pháp quy hoạch thực nghiệm trực giao cấp 1, mức với k yếu tố ảnh hưởng Sử dụng phương pháp quy hoạch thực nghiệm trực giao cấp 1, mức với k yếu tố ảnh hưởng (TYT 2k) 4.2.2 Phương pháp xác định hoạt tính sinh học dịch chiết Xác định hoạt tính gây độc tế bào ung thư, hoạt tính kháng viêm, hoạt tính ức chế sản sinh NO, hoạt tính ức chế enzyme αglucosidase, hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định, hoạt tính chống oxy hóa Thử độc tính, thử khả gây độc tế bào người 4.2.3 Phương pháp sản xuất sản phẩm thực phẩm bảo vệ sức khỏe Xây dựng quy trình cơng nghệ tạo sản phẩm đáp ứng quy định hành Nhà nước thực phẩm bảo vệ sức khỏe 4.2.4 Phương pháp đánh giá mức độ an toàn thực phẩm Xác định hàm lượng kim loại nặng, vi sinh vật gây bệnh 4.2.5 Phương pháp phân tích đánh giá cảm quan sản phẩm thực phẩm Sử dụng phương pháp cho điểm thị hiếu để đánh giá mức độ chấp nhận người tiêu dùng sản phẩm 4.2.6 Phương pháp xử lý số liệu Sử dụng phần mềm xử lý số liệu: TableCurve 2Dv4, Matlab R2016a, Anova, Excel Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Bố cục luận án Chương TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ CÂY MẬT NHÂN 1.1.1 Đặc điểm sinh thái, phân bố Mật nhân (danh pháp khoa học: Eurycoma longifolia) loại có hoa thuộc họ Simaroubaceae Cây mật nhân mọc nhiều nơi nước ta, phổ biến miền Trung số vùng Tây Nguyên như: Quảng Nam, Thừa Thiên Huế, Gia Lai, đó, vùng núi tỉnh Gia Lai huyện Kbang, huyện Ia-Grai, mật nhân mọc tự nhiên nhiều khai thác với số lượng lớn 1.1.2 Thành phần hóa học mật nhân 1.1.3 Tác dụng dược lý mật nhân ứng dụng dân gian 1.2 TỔNG QUAN VỀ CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1.2.1 Tổng quan phương pháp chiết 1.2.2 Tổng quan phương pháp phân lập 1.2.3 Tổng quan phương pháp xác định cấu trúc hóa học 1.2.4 Tổng quan phương pháp thăm dị hoạt tính sinh học 1.2.5 Tổng quan quy trình sản xuất thực phẩm bảo vệ sức khỏe 1.3 TỔNG QUAN VỀ TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU MẬT NHÂN TRONG VÀ NGỒI NƯỚC 1.3.1 Nghiên cứu thành phần hóa học 1.3.2 Nghiên cứu hoạt tính sinh học 1.3.3 Nghiên cứu phương pháp chiết 1.3.4 Nghiên cứu ứng dụng mật nhân thực phẩm 1.4 ĐÁNH GIÁ TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU CÂY MẬT NHÂN Tại Việt Nam, nghiên cứu mật nhân chưa mang tính hệ thống tính định hướng từ khảo sát nguyên liệu, chiết tách, thăm dò hoạt tính sinh học ứng dụng cơng nghiệp thực phẩm, đặc biệt mật nhân khu vực miền Trung Tây Nguyên Bên cạnh đó, chưa nhiều sản phẩm ứng dụng mật nhân mang tính thị hiếu vừa có tác dụng hỗ trợ sức khỏe, vừa có chức giải khát Chương NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU 2.1.1 Thu hái định danh mẫu rễ mật nhân 2.1.2 Xử lý nguyên liệu 2.2 HÓA CHẤT, VẬT TƯ, THIẾT BỊ, DỤNG CỤ 2.2.1 Hóa chất, vật tư 2.2.2 Thiết bị, dụng cụ 2.3 SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU TỔNG QUÁT Hình 2.2 Sơ đồ tổng quát nội dung nghiên cứu 2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU THỰC NGHIỆM 2.4.1 Khảo sát, lựa chọn nguyên liệu 2.4.2 Phương pháp phân lập, xác định cấu trúc hóa học hợp chất từ rễ mật nhân 2.4.2.1 Phân lập hợp chất hóa học 2.4.2.2 Xác định cấu trúc hóa học chất phân lập 2.4.3 Phương pháp xây dựng quy trình chiết rễ mật nhân 2.4.3.1 Chiết rễ mật nhân dung môi nước 2.4.3.2 Chiết rễ mật nhân dung môi ethanol 80 % 2.4.4 Khảo sát hoạt tính sinh học dịch chiết rễ mật nhân - Xác định khả gây độc tế bào ung thư Xác định hoạt tính kháng viêm Xác định khả ức chế đại thực bào sản sinh NO Xác định hoạt tính ức chế enzyme α- glucosidase Xác định hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định Xác định hoạt tính chống oxy hóa Thử độc tính Thử khả không gây độc tế bào người 2.4.5 Nghiên cứu ứng dụng mật nhân sản xuất số sản phẩm thực phẩm 2.4.5.1 Cơ sở bổ sung mật nhân vào sản phẩm thực phẩm bảo vệ sức khỏe 2.4.5.2 Nghiên cứu sản xuất cao chiết mật nhân 2.4.5.3 Nghiên cứu sản xuất bột mật nhân 2.4.5.4 Nghiên cứu sản xuất trà thảo mộc mật nhân nước rau má mật nhân Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 ĐỊNH DANH MẪU THỰC VẬT VÀ LỰA CHỌN NGUYÊN LIỆU NGHIÊN CỨU 3.1.1 Kết định danh mẫu thực vật Kết chi tiết trình bày phụ lục 3.1.2 Đánh giá, lựa chọn vùng nguyên liệu nghiên cứu 3.1.2.1 Khảo sát số thành phần hóa học ngun liệu Kết phân tích số thành phần hóa học nguyên liệu thể bảng 3.1 Bảng 3.1 Một số thành phần hóa học rễ mật nhân Gia Lai Quảng Nam Chỉ tiêu Protein Tro tổng Xenlulose Lipid Zn Cu Pb Hg Cd ĐVT % % % % mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg Quảng Nam 3,53 0,02 32 4,13 5,48 1,60 KPH (100 IC50 Ellipticine 98,66 ± 2,58 71,70 ± 2,87 50,75 ± 3,92 23,46 ± 3,80 0,44 ± 0,04 Kết bảng 3.20 cho thấy, dịch chiết không gây độc tế bào HEK-293 nồng độ nghiên cứu (IC 50>100 µg/mL) Do đó, bổ sung mật nhân vào sản xuất thực phẩm Kết luận: Dịch chiết ethanol 80 % hoạt tính gây độc tế bào ung thư dòng: KB, Hep-G2, LU-1, MCF7 nồng độ thử nghiệm Dịch chiết nước khả gây độc tế bào ung thư dòng: MKN7, SW626, HL-60, SK-Mel2, NIH/3T3, nhiên, dịch chiết nước lại thể số hoạt tính kháng viên như: khả ức chế tế bào đại thực bào sinh NO khả ức chế sản sinh IL-8 Ngồi ra, dịch chiết rễ mật nhân khơng gây độc cho tế bào thận người gây độc tính bất thường 3.5 NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG SẢN XUẤT MỘT SỐ SẢN PHẨM THỰC PHẨM BẢO VỆ SỨC KHỎE 3.5.1 Sản phẩm cao chiết mật nhân 3.5.1.1 Kết kiểm tra chất lượng sản phẩm cao chiết Các tiêu chất lượng cao mật nhân đạt yêu cầu theo quy định dược điển Việt Nam tập V Bảng 3.21 Kết tiêu chất lượng cao chiết mật nhân Cắn không tan nước Hàm lượng ẩm Tro toàn phần Cao lỏng, sánh, đồng Màu nâu đậm Mùi nồng, đặc trưng dược liệu Vị đắng 1,18 ± 0,05 % 58,75 ± 0,04 % 4,18 ± 0,03 % pH Tỷ trọng d2020 Hàm lượng chất EL4 5,19 1,2138 390 ± 7,07 mg/kg Mô tả Kết phân tích số hợp chất thiên nhiên cao chiết rễ mật nhân thể bảng 3.22 Bảng 3.22 Kết định tính số hợp chất thiên nhiên cao chiết mật nhân TT Nhóm chất Thuốc thử Hiện tượng Alkaloid Wagner + Phenolic Dung dịch FeCl3 1% Kết tủa nâu đỏ Dung dịch Kết luận sơ Có chuyển sang màu xanh thẫm + Có Phản ứng Salkowski Steroid Phản ứng LiebermanBourchard Dung dịch chuyển sang màu đỏ đậm Dung dịch chuyển sang màu cam Kết + Có + Từ kết từ bảng 3.22 nhận thấy, diện hợp chất alkaloid, polyphenol, steroid cao mật nhân Đây chất chứng minh có nhiều hoạt tính sinh học 3.5.1.2 Kết kiểm tra an toàn vệ sinh thực phẩm sản phẩm cao mật nhân Mẫu cao chiết mật nhân đảm bảo an toàn thực phẩm theo QĐ 46:2007/BYT giới hạn kim loại vi sinh thực phẩm 3.5.1.3 Công bố chất lượng sản phẩm cao mật nhân Xây dựng công bố chất lượng sản phẩm 3.5.2 Sản phẩm trà thảo mộc mật nhân Nụ vối có vị đắng dịu nên làm hài hịa vị đắng gắt mật nhân Ngoài ra, bổ sung nguyên liệu có hậu vị cỏ ngọt, cam thảo, la hán quả, thảo dược chứng minh có nhiều tác dụng dược lý tốt cho sức khỏe chống tiểu đường, béo phì, cao huyết áp, giải nhiệt Cao chiết mật nhân: Sử dụng sản phẩm cao chiết sản xuất kiểm tra chất lượng theo mục 3.5.1 để bổ sung vào quy trình sản xuất 3.5.2.1 Quy trình cơng nghệ sản xuất trà thảo mộc mật nhân Sau trình thử nghiệm đánh giá sản phẩm, đưa cơng thức sản xuất lít sản phẩm trà thảo mộc mật nhân sau: Nụ vối khô: 30 g; Quả la hán khô: g; Cỏ khô: 8,5 g; Cam thảo: g; Nước: 1400 mL; Cao mật nhân: 1000 mg 3.5.2.2 Kết đánh giá cảm quan sản phẩm Kết quả: Điểm mức độ yêu thích: 6,6 ± 0,9 điểm, nằm khoảng - điểm, khoảng từ tương đối thích đến thích 3.5.2.3 Kết kiểm tra chất lượng sản phẩm Kết thử nghiệm tiêu an toàn thực phẩm thấp giới hạn tối đa cho ph p Bên cạnh đó, hàm lượng EL4: 0,38 mg/L, hàm lượng gần không bị biến đổi 3.5.2.4 Công bố chất lượng sản phẩm cao mật nhân Xây dựng công bố chất lượng sản phẩm 3.5.3 Nghiên cứu sản xuất sản phẩm nước rau má mật nhân Rau má có nhiều hoạt tính sinh học tốt người, kết hợp rau má mật nhân tạo sản phẩm tốt cho sức khỏe Bột mật nhân: Cao chiết rễ mật nhân sau trình chiết dung mơi ethanol cịn mùi cồn nên việc bổ sung vào quy trình sản xuất thực phẩm gây khó chịu cho người sử dụng 3.5.3.1 Quy trình sản xuất nước rau má mật nhân Sau trình thử nghiệm đánh giá sản phẩm, đưa cơng thức sản xuất lít sản phẩm nước rau má mật nhân: Rau má: 300 g; Nước: 800 mL; Đường: 10 % ứng với 100 g; Bột mật nhân: 0,8 % w/wck, ứng với 0,96 g; Pectin: 0,08 % ứng với 0,8 g; NaHCO3 dùng để chỉnh pH dịch rau má đạt 6,5 nằm khoảng (0,4 ÷ 0,45) g; Bx = 12 3.5.3.2 Đánh giá cảm quan Kết quả: Điểm mức độ yêu thích: 6,44 ± 1,22 điểm, nằm khoảng - điểm, thích đến tương đối thích 3.5.3.3 Kiểm tra chất lượng sản phẩm Kết thử nghiệm tiêu an toàn thực phẩm thấp giới hạn tối đa cho phép 3.5.3.4 Công bố chất lượng sản phẩm cao mật nhân Xây dựng công bố chất lượng sản phẩm KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ A KẾT LUẬN Cơng trình nghiên cứu thu nhận kết sau: - Đã phân lập định danh hợp chất nhóm alkaloid, bao gồm: Hợp chất β-carboline-1-propionic acid lần từ rễ mật nhân miền Trung – Tây Nguyên phân lập cơng bố Hợp chất 9,10-dimethoxycanthin-6-one có hoạt tính kháng độc tế bào mạnh dòng tế bào Fibrosarcoma HT1080 người Hợp chất infractine lần từ rễ mật nhân miền Trung – Tây Nguyên phân lập công bố Hợp chất βcarboline-2N-oxide-1-propionic acid lần phân lập từ rễ mật nhân Các hợp chất khơng thuộc nhóm alkaloid, bao gồm: Hợp chất eurylene có hoạt tính chống lại dịng tế bào ung thư máu P388 Hợp chất eurycomanone, hợp chất với eurycomanol, biết đến hai hoạt chất làm tăng cường thúc đẩy hormone sinh dục nam testosterone Hợp chất 14,15β-hydroxy klaineanol có hoạt tính kháng ký sinh trùng sốt r t - Xây dựng hai quy trình chiết rễ mật nhân phương pháp chưng ninh hồi lưu nước 100 oC; 199,2 phút, tỷ lệ dung môi/nguyên liệu: 22,4/1 ethanol 80 % 83,2 oC; 202,2 phút, tỷ lệ dung môi/nguyên liệu: 20/1 Sản phẩm dịch chiết từ hai quy trình khảo sát hoạt tính sinh học thu số kết sau: Dịch chiết ethanol 80 % rễ mật nhân có khả gây độc tế bào ung thư mức trung bình yếu (IC50 từ 50,0 µg/mL đến 139,39 µg/mL) dòng tế bào ung thư KB, HepG2, LU-1, MCF7, đó, hoạt tính thể mạnh (do có giá trị IC50 thấp nhất) dịng tế bào ung thư gan Hep-G2 (IC 50 = 50,0 ± 2,25 µg/mL) Dịch chiết nước rễ mật nhân vùng núi huyện Ia-Grai - tỉnh Gia Lai có khả ức chế tế bào đại thực bào sinh NO đạt 50,41 % (ở nồng độ 200 µg/mL) giá trị IC 50 đạt 198,87 ± 9,05 µg/mL, hoạt tính lần tìm thấy dịch chiết nước rễ mật nhân miền Trung – Tây Nguyên Ngoài ra, dịch chiết nước rễ mật nhân có khả ức chế cytokine gây viêm IL-8 đạt 57,55 % (nồng độ 50 µg/mL) mức có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) - Kiểm tra chất lượng sản phẩm cao chiết mật nhân theo dược điển Việt Nam hành với kết quả: Cao mật nhân cao lỏng, sánh, đồng nhất, có màu nâu đậm, mùi nồng, đặc trưng dược liệu, vị đắng; cắn không tan nước 1,18 ± 0,05 %; hàm lượng ẩm 58,75 ± 0,04 %; tro toàn phần 4,18 ± 0,03 %; pH = 5,19; tỷ trọng tương đối 20 oC 1,2138; hàm lượng 9,10-dimethoxycathin-6-one 390 ± 7,07 mg/kg Kết định tính hợp chất có hoạt tính sinh học cao mật nhân cho thấy diện alkaloid, steroid, polyphenol, sản phẩm đảm bảo tính an tồn thực phẩm tiêu sinh vi sinh hàm lượng kim loại nặng đạt tiêu chuẩn theo quy định hành - Đề xuất quy trình cơng nghệ sản xuất sản phẩm bảo vệ sức khỏe trà thảo mộc mật nhân hàm lượng cao chiết bổ sung 1000 mg/lít sản phẩm tương ứng 0,1 % (w/w), hàm lượng EL4 0,38 mg/L Kết đánh giá cảm quan thị hiếu cho điểm sản phẩm mức độ tương đối thích đến thích Sản phẩm đạt tiêu chuẩn an toàn thực phẩm vi sinh hàm lượng kim loại nặng theo quy định Bộ Y tế Đề xuất quy trình cơng nghệ sản xuất sản phẩm bảo vệ sức khỏe nước rau má mật nhân với quy mơ phịng thí nghiệm với tỷ lệ bổ sung bột mật nhân 0,8 %, pectin 0,08 % Nước rau má mật nhân dạng lỏng, có màu xanh cây, mùi rau má vị đắng mật nhân Kết đánh giá cảm quan thị hiếu cho điểm sản phẩm mức độ thích đến tương đối thích Sản phẩm đạt tiêu chuẩn an toàn thực phẩm vi sinh hàm lượng kim loại nặng theo quy định Bộ Y tế B NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN * Về mặt học thuật: Đã chiết tách, phân lập xác định cấu trúc hóa học hai hợp chất thuộc nhóm alkaloid, theo tra cứu tài liệu đến thời điểm nghiên cứu, hợp chất lần phân lập từ rễ mật nhân khu vực miền Trung – Tây Nguyên: β-carboline-1-propionic acid infractine; hợp chất lần phân lập từ rễ mật nhân: β-carboline-2N-oxide-1propionic acid Theo tài liệu tham khảo đến thời điểm nghiên cứu khả ức chế tế bào đại thực bào sinh NO dịch chiết nước từ rễ mật nhân khu vực miền Trung – Tây Nguyên, đạt 50,41 % (ở nồng độ 200 µg/mL) với giá trị IC 50 đạt 198,87 ± 9,05 µg/mL kết nghiên cứu lần công bố * Về mặt thực tiễn: Đã đề xuất quy trình công nghệ sản xuất trà thảo mộc mật nhân lượng cao chiết bổ sung 1000 mg/L sản phẩm tương ứng 0,1 % (w/w), hàm lượng EL4 0,38 mg/L Đã đề xuất quy trình cơng nghệ sản xuất nước rau má mật nhân với quy mơ phịng thí nghiệm, tỷ lệ bổ sung 0,8 % bột mật nhân, 0,08 %pectin C HƯỚNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO - Cần nghiên cứu bổ sung nhiều hoạt tính sinh học dịch chiết rễ mật nhân khu vực miền Trung – Tây Nguyên như: Khả gây độc tế bào ung thư dịng ngồi dịng nghiên cứu, hoạt tính kháng sốt rét, kháng viêm với cytokin đóng vai trị quan trọng hệ thống miễn dịch tự nhiên khác như: TNF-α, IL-1, IL-10, IL-12, interferon loại I (IFN-α IFN-β), IFN-γ, chemokin Ứng dụng mật nhân vào sản xuất số sản phẩm thực phẩm bảo vệ sức khỏe cần nghiên cứu quy mô lớn 1 CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ Trương Thị Minh Hạnh, Võ Khánh Hà (2017), “Khảo sát trình chiết rễ mật nhân (eurycoma longifoilia) Quảng Nam, Gia Lai phương pháp Soxhlet định danh cấu tử dịch chiết phương pháp GC-MS”, Kỷ yếu Hội thảo khoa học tồn quốc “Hóa học với phát triển bền vững: Khai thác nguồn lợi tài nguyên thiên nhiên, sản xuất thực phẩm dược phẩm”, 241 Võ Khánh Hà, Trương Thị Minh Hạnh, Giang Thị Kim Liên, Mai Thị Phương Chi, Trần Thị Phương Thảo (2020), “Khảo sát hoạt tính sinh học dịch chiết rễ mật nhân ( eurycoma longifolia jack) thu hái vùng núi huyện Ia Grai, tỉnh Gia Lai”, Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nông thôn, số 5: 56-61 Võ Khánh Hà, Trương Thị Minh Hạnh, Hồ Thị Diệu Oanh, Mai Thị Phương Chi, Giang Thị Kim Liên (2020), “Tối ưu hóa số điều kiện chiết thu nhận cao khô từ rễ mật nhân ( eurycoma longifolia) dung môi ethanol để làm phụ gia sản xuất nước rau má mật nhân”, Tạp chí khoa học công nghệ ĐHĐN, số18 (5.1): 84-88 Vo Khanh Ha, Truong Thi Minh Hanh, Phan Cam Nam, Giang Thi Kim Lien, Mai Thi Phuong Chi, Tran Thi Phuong Thao (2020), “Phytochemical investigation of eurycoma longifolia roots collected in Gia Lai province, Viet Nam”, Vietnam Journal of Chemistry (ESCI), vol 58 (5): 705-710 Võ Khánh Hà, Trương Thị Minh Hạnh, Nguyễn Thị Song Mơ, Mai Thị Phương Chi, Giang Thị Kim Liên (2020), “Nghiên cứu ứng dụng cao chiết từ rễ mật nhân ( eurycoma longifolia) trong sản xuất trà thảo mộc mật nhân”, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Nông nghiệp Việt Nam, số 10 (119): 98-104 ... sung mật nhân chưa nhiều đa dạng Nghiên cứu nhằm xây dựng quy trình cơng nghệ chiết tách, xác định thành phần hóa học, thăm dị hoạt tính sinh học rễ mật nhân miền Trung - Tây Nguyên, ứng dụng công. .. r t 3.3 XÂY DỰNG QUY TRÌNH CHIẾT RỄ CÂY MẬT NHÂN 3.3.1 Xây dựng quy trình chiết rễ mật nhân phương pháp chưng ninh hồi lưu dung môi ethanol 80 % Quy trình chiết mật nhân ethanol 80 % trình bày... đồ quy trình chiết mật nhân ethanol 3.3.2 Xây dựng quy trình chiết rễ mật nhân phương pháp chưng ninh hồi lưu nước Quy trình chiết mật nhân nước trình bày theo sơ đồ hình 3.9 Bột rễ mật nhân Chưng