Nghiên cứu thu nhận, đánh giá đặc tính của lipase thực vật và khả năng ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm​.

Nghiên cứu thu nhận, đánh giá đặc tính của lipase thực vật và khả năng ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm​.Nghiên cứu thu nhận, đánh giá đặc tính của lipase thực vật và khả năng ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm​.Nghiên cứu thu nhận, đánh giá đặc tính của lipase thực vật và khả năng ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm​.Nghiên cứu thu nhận, đánh giá đặc tính của lipase thực vật và khả năng ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm​.Nghiên cứu thu nhận, đánh giá đặc tính của lipase thực vật và khả năng ứng dụng trong công nghiệp thực phẩm​.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG PHAN THỊ VIỆT HÀ NGHIÊN CỨU THU NHẬN, ĐÁNH GIÁ ĐẶC TÍNH CỦA LIPASE THỰC VẬT VÀ KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG TRONG CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM LUẬN ÁN TIẾN SĨ KỸ THUẬT ĐÀ NẴNG 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG PHAN THỊ VIỆT HÀ NGHIÊN CỨU THU NHẬN, ĐÁNH GIÁ ĐẶC TÍNH CỦA LIPASE THỰC VẬT VÀ KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG TRONG CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM Chuyên ngành : Công nghệ thực phẩm Mã số : 62.54.01.01 LUẬN ÁN TIẾN SĨ KỸ THUẬT NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS ĐẶNG MINH NHẬT PGS.TS TRẦN THỊ XƠ ĐÀ NẴNG 2021 LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Việc tham khảo nguồn tài liệu trích dẫn ghi nguồn tài liệu tham khảo quy định Người cam đoan Phan Thị Việt Hà MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VÀ KÝ HIỆU VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục tiêu nghiên cứu 3 Nội dung nghiên cứu Phương pháp nghiên cứu 4.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết 4.2 Phương pháp nghiên cứu thực nghiệm Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Bố cục luận án CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan lipase 1.1.1 Nguồn thu nhận lipase 1.1.2 Cấu trúc chế xúc tác lipase 1.1.3 Tính đặc hiệu lipase 10 1.1.4 Các hệ phản ứng cho lipase xúc tác 11 1.2 Lipase thực vật 12 1.2.1 Khả xúc tác lipase thực vật 12 1.2.2 Một số nguồn lipase từ thực vật 13 1.2.3 Phương pháp chiết tách lipase từ thực vật 17 1.2.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt độ lipase thực vật 19 1.2.5 Ứng dụng lipase thực vật 21 1.2.5.1 Trong công nghiệp thực phẩm 21 1.2.5.2 Trong công nghiệp dược 22 1.2.5.3 Trong lĩnh vực khác 23 1.3 Dầu cá ứng dụng lipase làm giàu DHA, EPA dầu cá 24 1.3.1 Dầu cá .24 1.3.2 Ứng dụng lipase làm giàu DHA, EPA dầu cá .26 1.4 Lược sử vấn đề nghiên cứu 28 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 28 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nước 34 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .38 2.1 Nguyên liệu 38 2.1.1 Nguyên liệu hạt .38 2.1.2 Nguyên liệu phụ phẩm nông nghiệp (cám gạo, phơi lúa mì) 38 2.1.3 Ngun liệu mủ từ loại 39 2.2 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 40 2.2.1 Hóa chất 40 2.2.2 Thiết bị 40 2.3 Nội dung nghiên cứu 41 2.4 Bố trí thí nghiệm 42 2.4.1 Phần 1: Đánh giá khả thu nhận lipase từ nguồn thực vật: đậu nành, đậu phộng nảy mầm, cám gạo, phôi mì, mủ sung, mủ vả, mủ đu đủ 42 2.4.2 Phần 2: Nghiên cứu thu nhận lipase thô từ mủ đu đủ .49 2.4.3 Phần 3: Chiết tách tinh lipase từ lipase thô mủ đu đủ 51 2.4.4 Phần 4: Nghiên cứu tính chất lipase tinh 52 2.4.5 Phần 5: Phương pháp nghiên cứu ứng dụng lipase thô 53 2.5 Phương pháp phân tích 61 2.5.1 Phương pháp hóa học xác định thành phần nguyên liệu 61 2.5.2 Phương pháp xác định hoạt độ lipase phương pháp chuẩn độ 61 2.5.3 Phương pháp xác định hoạt độ lipase phương pháp đo quang 62 2.5.4 Phương pháp xác định hoạt độ lipase phương pháp khuếch tán đĩa thạch .62 2.5.5 Phương pháp xác định điểm đẳng điện lipase 62 2.5.6 Phương pháp kết tủa phân đoạn lipase với muối amoni sunfat 63 2.5.7 Phương pháp tinh lipase sắc ký trao đổi ion 63 2.5.8 Phương pháp điện di 64 2.5.9 Phương pháp xác định đặc tính hóa lý dầu cá 64 2.5.10 Phương pháp xác định thành phần acid béo có dầu cá hồi 65 2.5.11 Phương pháp xác định hiệu suất thủy phân dầu cá hồi xúc tác CPL 65 2.5.12 Phương pháp xác định thông số động học Km Vmax phản ứng thủy phân dầu cá hồi CPL .65 2.5.13 Phương pháp xác định lượng hoạt hóa 66 2.5.14 Phương pháp phân tích số liệu thực nghiệm 67 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 68 3.1 Đánh giá khả thu nhận lipase từ số nguồn thực vật 68 3.1.1 Hoạt tính lipase từ loại hạt có dầu nảy mầm 68 3.1.2 Hoạt tính lipase từ phụ phẩm nơng nghiệp: cám gạo phơi lúa mì 74 3.1.3 Hoạt tính lipase từ mủ loại 79 3.1.4 Đánh giá khả thu nhận lipase từ nguồn thực vật khác 86 3.2 Thu nhận enzyme lipase thô từ mủ đu đủ 87 3.2.1 Các phương pháp bảo quản mủ đu đủ .87 3.2.2 Thu nhận enzyme thô 90 3.2.3 Kết khảo sát khả thủy phân lipase thô từ mủ đu đủ chất khác 96 3.3 Tinh enzyme lipase từ mủ đu đủ 99 3.3.1 Chiết tách lipase mủ đu đủ muối sodium lauroyl sarcosinate (SLS) 99 3.3.2 Ảnh hưởng nồng độ SLS lên hoạt độ lipase 101 3.3.3 Tủa lipase dung dịch amoni sunfat (AS) 102 3.3.4 Kết xác định điểm đẳng điện protein enzyme 103 3.3.5 Kết tinh enzyme lipase từ mủ đu đủ sắc ký trao đổi ion 104 3.4 Tính chất lipase tinh 104 3.4.1 Kết xác định khối lượng phân tử lipase 104 3.4.2 Xác định Km Vmax 105 3.5 Đánh giá khả ứng dụng lipase mủ đu đủ quy trình sản xuất dầu cá giàu DHA EPA 106 3.5.1 Một số đặc điểm dầu cá hồi thô 106 3.5.2 Xác định thành phần acid béo có dầu cá hồi 107 3.5.3 Ứng dụng lipase từ mủ đu đủ để thủy phân dầu cá hồi 109 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 127 A KẾT LUẬN 127 B NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN 128 C KIẾN NGHỊ VỀ NHỮNG NGHIÊN CỨU TIẾP THEO 128 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC ĐÃ CƠNG BỐ 129 TÀI LIỆU THAM KHẢO 130 DANH MỤC CHỮ VÀ KÝ HIỆU VIẾT TẮT Ký hiệu CPL DHA EPA Tiếng Anh Carica papaya lipase Docosahexaenoic acid Eicosapentaenoic acid PUFAs Polyunsaturated fatty acids p-NPP p-NP OD AS TCVN DH TAG SLS Para-nitrophenyl palmitate Para-nitrophenol Optical density CHAPS EDTA Ammonium sulfate Degree of hydrolysis Triacylglycerol Sodium Lauroyl Saccosine 3-[(3-Cholamidopropyl) dimethylammonio]-1propanesulfonate hydrate Ethylene Diamine Tetracetic Acid Tiếng Việt Lipase từ mủ đu đủ Acid béo khơng bão hịa nhiều nối đơi Mật độ quang Amoni sunfat Tiêu chuẩn Việt Nam Hiệu suất thủy phân Acid etylenediaminetetraacetic DANH MỤC CÁC BẢNG Số hiệu Bảng 1.1 Tên bảng Tính chất số lipase có nguồn gốc từ hạt [72] Bảng 1.2 Tính chất lipase từ số loại hạt chứa dầu 30 Bảng 1.3 Tính chất lipase từ số loại hạt ngũ cốc 31 Bảng 1.4 Tính chất lipase từ số loại mủ 32 Bảng 2.1 Một số hóa chất d ng nghiên cứu 40 Bảng 2.2 48 Bảng 2.3 Bố trí thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng yếu tố nhiệt độ, pH ion kim loại đến hoạt độ lipase Khoảng biến thiên yếu tố thực nghiệm Bảng 2.4 Ma trận quy hoạch thực nghiệm 55 Bảng 2.5 Khoảng biến thiên yếu tố thực nghiệm 56 Bảng 2.6 Ma trận quy hoạch thực nghiệm 57 Bảng 2.7 Khoảng biến thiên yếu tố thực nghiệm 60 Bảng 2.8 Ma trận quy hoạch thực nghiệm 60 Bảng 3.1 Thành phần hóa học hạt đậu nành, đậu phộng 68 Bảng 3.2 Thành phần hóa học cám gạo phơi lúa mì 75 Bảng 3.3 Thành phần hóa học mủ đu đủ 79 Bảng 3.4 Hiệu thu nhận lipase từ nguồn thực vật 86 Bảng 3.5 Ảnh hưởng phương pháp sấy khác lên hoạt độ lipase Sự thay đổi hoạt độ lipase mủ đu đủ theo thời gian trữ đông Ảnh hưởng tỷ lệ nước đến hiệu thu nhận lipase thô Ảnh hưởng số lần lặp rửa – ly tâm đến hiệu thu nhận lipase thô Hoạt độ chế phẩm lipase thô thu phương pháp sấy khác Hoạt độ CPL sau loại lipid chiết tách với SLS Hoạt tính CPL sau hịa tan mà không loại lipid 88 Bảng 3.6 Bảng 3.7 Bảng 3.8 Bảng 3.9 Bảng 3.10 Bảng 3.11 Bảng 3.12 Bảng 3.13 Hoạt tính lipase thu phân đoạn tủa khác Các số chất lượng dầu cá hồi thô Tran g 14 55 89 90 92 93 100 100 102 107 Error Lack-of-Fit Pure Error Total 13,387 12,780 0,607 16 157,14 1,9124 2,5560 0,3033 8,43 PL 56 Source P-Value Model 0,005 Linear 0,004 Nồng độ enzyme (%) 0,003 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) 0,931 Nhiệt độ (độ C) 0,004 Square 0,004 Nồng độ enzyme (%)*Nồng độ enzyme (%) 0,003 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w)*Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) 0,027 Nhiệt độ (độ C)*Nhiệt độ (độ C) 0,002 2-Way Interaction 0,277 Nồng độ enzyme (%)*Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) 0,352 Nồng độ enzyme (%)*Nhiệt độ (độ C) 0,097 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w)*Nhiệt độ (độ C) 0,787 Error Lack-of-Fit 0,109 Pure Error Total Model Summary S R-sq R-sq(adj) R-sq(pred) 1,38290 91,48% 80,53% 35,12% Coded Coefficients SE TPCoef Value Value Term Coef Constant 35,45 0,797 44,47 0,000 Nồng độ enzyme (%) 2,74 0,633 4,34 0,003 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) 0,05 0,629 0,09 0,931 Nhiệt độ (độ C) 2,62 0,629 4,18 0,004 Nồng độ enzyme (%)*Nồng độ enzyme (%) -5,18 1,17 -4,43 0,003 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w)*Tỉ lệ dung -3,26 1,17 -2,80 0,027 môi/cơ chất (w/w) Nhiệt độ (độ C)*Nhiệt độ (độ C) -5,71 1,17 -4,90 0,002 Nồng độ enzyme (%)*Tỉ lệ dung môi/cơ chất -1,39 1,40 -1,00 0,352 (w/w) PL 57 Nồng độ enzyme (%)*Nhiệt độ (độ C) -2,68 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w)*Nhiệt độ (độ C) 0,39 Term 1,40 1,38 VIF -1,92 0,28 0,097 0,787 PL 58 Constant Nồng độ enzyme (%) 1,00 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) 1,00 Nhiệt độ (độ C) 1,00 Nồng độ enzyme (%)*Nồng độ enzyme (%) 1,16 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w)*Tỉ lệ dung môi/cơ chất 1,16 (w/w) Nhiệt độ (độ C)*Nhiệt độ (độ C) 1,16 Nồng độ enzyme (%)*Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) 1,00 Nồng độ enzyme (%)*Nhiệt độ (độ C) 1,00 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w)*Nhiệt độ (độ C) 1,00  Regression Equation in Uncoded Units Hiệu suất thủy phân (%) = -265,4 + 189,2 Nồng độ enzyme (%) + 15,2 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) + 7,42 Nhiệt độ (độ C) - 44,8 Nồng độ enzyme (%)*Nồng độ enzyme (%) -4,62 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w)*Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) - 0,0810 Nhiệt độ (độ C)*Nhiệt độ (độ C) - 4,87 Nồng độ enzyme (%)*Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) - 0,937 Nồng độ enzyme (%)*Nhiệt độ (độ C) + 0,055 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w)*Nhiệt độ (độ C) Fits and Diagnostics for Unusual Observations Hiệu suất thủy St phân Obs Fit Resi d (%) Resid d 15 33,900 32,060 1,840 2,31 R R Large residual Effects Pareto for Hiệu suất thủy phân (%) Các biểu đồ đường mức biểu đồ mặt đáp biểu thị ảnh hưởng yếu tố đến hiệu suất thủy phân thể Hình 3.40, Hình 3.41, Hình 3.42, Hình 3.43, Hình 3.44, Hình 3.45 PL 59 enzyme (%) Contour Plot of Hiệu suất th vs Nồng độ enzyme (%), Nhiệt độ (độ C) Hiệu suất thủy phân (%) < 20 20 – 25 25 – 30 30 – 35 > 35 1.9 1.8 1.7 1.6 Nồ ng độ Hold Values Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) 1.5 1.4 1.3 28 30 32 34 36 38 40 42 Nhiệt độ (độ C) Hình 3.5 Biểu đồ đường mức biểu thị ảnh hưởng nồng độ enzyme nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân Surface Plot of Hiệu suất thủy phân (%) vs Nhiệt độ (độ C), Nồng độ en Hold Values Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w) 35 30 suất thủy phân (%) 25 45 20 40 35 1.2 1.4 1.6 30 Nhiệt độ (độ C) 1.8 Nồng độ enzyme (%) Hình 3.6 Biểu đồ mặt đáp biểu thị ảnh hưởng nồng độ enzyme nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân Từ biểu đồ đường mức biểu thị ảnh hưởng nồng độ enzyme nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân cho thấy vùng có hiệu suất thủy phân cao nằm khoảng nồng độ enzyme (1,57 – 1,8%) nhiệt độ (34 – 38,7oC) PL 60 Contour Plot of Hiệu suất th vs Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w), Nhiệt độ 1.8 Hiệu suất thủy phân (%) < 25.0 25.0 – 27.5 27.5 – 30.0 30.0 – 32.5 32.5 – 35.0 > 35.0 c t (w/w) i/ 1.4 1.2 1.0 Hold Values Nồng độ enzyme (%) 1.6 0.8 Tỉ lệ dung mô hấ 1.6 0.6 0.4 0.2 28 30 32 34 36 38 40 42 Nhiệt độ (độ C) Hình 3.7 Biểu đồ đường mức biểu thị ảnh hưởng nồng độ enzyme tỷ lệ dung môi/cơ chất đến hiệu suất thủy phân Surface Plot of Hiệu suất thủy phân (%) vs Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w Hold Values Nhiệt độ (độ C) 35 35 suất thủy phân (%) 30 25 1.5 1.0 1.2 1.4 1.6 0.5 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w 1.8 0.0 Nồng độ enzyme (%) Hình 3.8 Biểu đồ mặt đáp biểu thị ảnh hưởng nồng độ enzyme tỷ lệ dung môi/cơ chất đến hiệu suất thủy phân PL 61 Từ biểu đồ đường mức biểu thị ảnh hưởng nồng độ enzyme tỷ lệ dung môi/cơ chất đến hiệu suất thủy phân cho thấy vùng có hiệu suất thủy phân cao nằm khoảng nồng độ enzyme (1,6 – 1,8%) tỷ lệ dung môi/cơ chất (0,65 – 1,25) PL 62 C) độ (độ iệ Nh t Contour Plot of Hiệu suất th vs Nhiệt độ (độ C), Tỉ lệ dung môi/cơ chấ Hiệu suất thủy phân (%) < 25.0 25.0 – 27.5 27.5 – 30.0 30.0 – 32.5 32.5 – 35.0 > 35.0 42 40 38 36 Hold Values Nồng độ enzyme (%) 1.6 34 32 30 28 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 Tỉ lệ dung mơi/cơ chất (w/w) Hình 3.9 Biểu đồ đường mức biểu thị ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/cơ chất nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân Surface Plot of Hiệu suất thủy phân (%) vs Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/w Hold Values Nồng độ enzyme (%) 1.6 35 u suất thủy phân (%) 30 1.5 25 30 35 Nhiệt độ (độ C) 1.0 0.5 Tỉ lệ dung môi/cơ chất (w/ 40 45 0.0 Hình 3.10 Biểu đồ mặt đáp biểu thị ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/cơ PL 63 chất nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân Từ biểu đồ đường mức biểu thị ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/cơ chất nhiệt độ đến hiệu suất thủy phân cho thấy vùng có hiệu suất thủy phân cao nằm khoảng nhiệt độ (35,3 – 39oC) tỷ lệ dung môi/cơ chất (0,75 – 1,28) PL 64 Phụ lục 3.37 Kiểm chứng điều kiện tối ưu thực nghiệm trình thủy phân dầ cá hồi CPL hệ pha iso-octan/nước Xác định nồng độ KOH Mẫu lặp 10,3 Thể tích dung dịch KOH (ml) chuẩn độ với 10ml Mẫu lặp 10,3 dung dịch acid oxalic 0,1N Trung 10,3 bình Nồng độ dung dịch KOH (N) 0,09 Thể tích KOH chuẩn độ ứng với mẫu lặp (ml) Thể tích KOH trung bình (ml) Chỉ số acid 15,05 15,10 15,30 15,1 82,5 Phụ lục 3.38 Xác định Km Vmax Xác định nồng độ KOH Mẫu lặp Thể tích dung dịch KOH (ml) chuẩn độ với 10ml Mẫu lặp dung dịch acid oxalic 0,1N Trung bình Nồng độ dung dịch KOH (N) Hiệu suất thủy phân (%) 35,7 11,0 11,0 11,0 0,09 Nồng độ chất dầu cá hồi [S] ban đầu xác định số mol acid béo liên kết có 1ml thể tích hỗn hợp Số mol acid béo liên kết xác định thơng qua số ester số xà phịng trừ số acid Thể tích (V) V hỗn hợp = V nước cất + V dung dịch đệm + V dầu + V dung môi = + + khối lượng dầu.Khối lượng riêng dầu + khối lượng dung môi.Khối lượng riêng dung môi = + khối lượng dầu.0,892 + khối lượng dung môi.0,69 (ml) PL 65 [S] = số mol dầu/V hỗn hợp =khối lượng dầu/( M dầu V hỗn hợp) M dầu = M glycerol + M acid béo – 3MH2O = 38,5 - M acid béo n x M acid i Mi i 100 béo = xi: tỷ lệ % theo khối lượng acid béo thành phần thứ i PL 66 Mi : khối lượng phân tử acid béo thành phần thứ i n: số acid béo có mặt dầu KLPT trung bình acid béo dầu cá hồi x i% myristic acid methyl ester palmitic acid ester palmitoleic acid methyl ester stearic acid methyl ester oleic acid methyl ester linoleic acid methyl ester arachidic acid methyl ester linolenic acid methyl ester cis-11-eicosenoic acid methyl ester cis-11,14-eicosadienoic acid methyl ester EPA DHA sum KLPT TB dầu cá hồi Tính nồng độ chất ban đầu [S] Khối Chỉ số Chỉ số Chỉ số xà lượn acid este phòn g g hóa dầu (g) 11,65 210,4 198,75 11,65 210,4 198,75 11,65 210,4 198,75 11,65 210,4 198,75 2,87 10,8 2,86 2,65 36,3 14,9 0,32 5,4 0,88 2,24 4,53 5,02 88,77 880,42 Mi , xi Mi 228,4 256,4 254,4 284,5 282,5 280,4 312,5 278,4 310,5 308,5 302,5 328,5 655,508 2769,12 727,584 753,925 10254,75 4177,96 100 1503,36 273,24 691,04 1370,325 1649,07 280,79 Số mol acid béo liên kết Thể tích Nồng độ hỗn hợp chất (ml) [S] 3549,462 7098,924 10648,386 14197,848 6,57 7,7 8,82 9,94 540,253 921,938 1207,3 1428,355 PL 67 Dầu cá Nồng độ chất [S] 1/[S] 1gam 540,25 0,001 2gam 921,94 0,001 3gam 1207,3 0,000 4gam Thời gian VKOH (phút ) 15 30 45 60 15 30 45 60 15 30 45 60 7,1 9,17 11,9 15,45 số mol KOH 643,9909297 831,7460317 1079,365079 1401,360544 số mol FFA số mol FFA tạo thành (*) 1103,854875 1568,253968 1900,226757 2571,428571 1/v 2,86 0,35 7,7 7,7 7,7 7,7 63,3 105,2 151,6 205,8 3,33 0,3 8,82 8,82 8,82 8,82 54,5 107,2 144,8 220,9 3,55 0,282 643,9909297 436,3260456 6,57 831,7460317 624,0811476 6,57 1079,365079 871,7001952 6,57 1401,360544 1193,69566 6,57 9,95 902,4943311 902,4943311 487,1645628 13,51 1225,396825 1225,396825 810,0670571 17,45 1582,76644 1582,76644 1167,436672 22,05 2000 2000 1584,670232 12,17 17,29 20,95 28,35 Tốc độ phả n ứng (v) V hỗ n hợ p 1103,854875 1568,253968 1900,226757 2571,428571 480,8602229 945,2593158 1277,232105 1948,433919 Nồn g độ FFA s tạo thàn h 66,4 95 132,7 181,7 PL 43 1428,36 0,000 15 30 45 60 15,25 22,3 26,02 34,55 1383,219955 2022,675737 2360,090703 3133,786848 1383,219955 552,5604181 9,94 55,6 2022,675737 1192,0162 9,94 119,9 2360,090703 1529,431166 9,94 153,9 3133,786848 2303,127312 9,94 231,7 3,74 0,267 PL 43 Ghi chú: Số mol FFA tạo thành (*) = số mol FFA - số ban đầu Số mol FFA ban đầu = 207,6649 Phụ lục 3.39 Xác định lượng hoạt hóa E Xác định nồng độ KOH Mẫu lặp Thể tích dung dịch KOH (ml) chuẩn độ với 10ml Mẫu lặp dung dịch acid oxalic 0,1N Trung bình Nồng độ dung dịch KOH (N) Nhiệt độ (K) 298 303 308 Thể tích KOH lần lặp (ml) 10,7 10,6 10,6 13,0 13,1 13,1 17,0 17,1 16,9 mol FFA 11,4 11,5 11,5 0,08 Thể tích KOH trung bình (ml) Nồng độ FFAs tạo thành đầu (µmol FFAs) Vận tốc phản ứng đầu (µmol FFAs/phút,ml ) 10,65 109,4 1,82 13,12 142,0 2,37 17,00 193,6 3,23 PL 44 ...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG PHAN THỊ VIỆT HÀ NGHIÊN CỨU THU NHẬN, ĐÁNH GIÁ ĐẶC TÍNH CỦA LIPASE THỰC VẬT VÀ KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG TRONG CƠNG NGHIỆP THỰC PHẨM Chun ngành : Cơng nghệ thực. .. đánh giá đặc tính lipase thực vật khả ứng dụng công nghiệp thực phẩm" thực có ý nghĩa khoa học thực tiễn Mục tiêu nghiên cứu Mục tiêu luận án đánh giá khả khai thác lipase từ nguồn thực vật sẵn... nơng nghiệp + Mủ loại - Xây dựng quy trình cơng nghệ thu nhận lipase thơ từ nguồn thực vật; - Xác định đặc tính hố sinh lipase thô lipase tinh sạch; - Đánh giá khả ứng dụng lipase thô công nghiệp