CHẤT LƯỢNG NƯỚC - XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHẤT KHÔNG PHÂN CỰC - PHƯƠNG PHÁP SỬ DỤNG SẮC KÝ KHÍ KẾT HỢP KHỐI PHỔ

TIÊU CHUẨN VIỆT NAM TCVN 10495 : 2015 ISO/TS 28581 : 2012 CHẤT LƯỢNG NƯỚC - XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHẤT KHÔNG PHÂN CỰC - PHƯƠNG PHÁP SỬ DỤNG SẮC KÝ KHÍ KẾT HỢP KHỐI PHỔ Water quality - Determination of selected non-polar substances - Method using gas chromatography with mass spectrometric detection (GC-MS) Lời nói đầu TCVN 10495:2015 (ISO/TS 28581:2012) hoàn toàn tương đương với ISO/TS 28581:2012 TCVN 10495:2015 Tổng cục Môi trường biên soạn, Bộ Tài nguyên Môi trường đề nghị, Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng thẩm định, Bộ Khoa học Công nghệ công bố Lời giới thiệu Các chất không phân cực có mặt hầu hết tất loại nước Các chất bị hấp phụ lên chất rắn (trầm tích, chất lơ lửng) hịa tan vào pha lỏng Phần lớn chất không phân cực hydrocacbon thơm đa vòng (PAH) Một số PAH biết đến nghi ngờ gây ung thư Ở số nước thiết lập mức tối đa chấp nhận Ví dụ, Nghị định 98/83/EC[10] hội đồng châu Âu chất lượng nước dùng cho mục đích sinh hoạt thiết lập mức tối đa chấp nhận benzo[a]pyren 0,010 g/l, tổng bốn PAH (benzo[b]florathen, benzo[k]floranthen, benzo[ghi]perylen, indeno[1,2,3-cd]pyren) 0,100 g/l Có nhiều tiêu chuẩn quốc tế xác định PAH nước nước thải ISO 6468 quy định phương pháp xác định số hóa chất bảo vệ thực vật clo hữu cơ, PCBs clorobenzen nước uống, nước ngầm, nước mặt nước thải ISO 17933[6] quy định phương pháp xác định 15 PAH sắc ký lỏng hiệu cao nước uống, nước ngầm nước mặt ISO 7981[2] qui định phương pháp xác định PAH nước uống nước ngầm sắc ký lớp mỏng hiệu cao sắc ký lỏng hiệu cao ISO 17858[5] quy định phương pháp xác định PCBs tương tự dioxin nước nước thải ISO 28540[9] quy định phương pháp xác định PAH sử dụng sắc ký khí kết hợp khối phổ (GC-MS) CHẤT LƯỢNG NƯỚC - XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHẤT KHÔNG PHÂN CỰC - PHƯƠNG PHÁP SỬ DỤNG SẮC KÝ KHÍ KẾT HỢP KHỐI PHỔ Water quality - Determination of selected non-polar substances - Method using gas chromatography with mass spectrometric detection (GC-MS) CẢNH BÁO - Sử dụng tiêu chuẩn liên quan đến vật liệu, thao tác thiết bị nguy hại Người sử dụng tiêu chuẩn cần thành thạo với thực hành phịng thí nghiệm thơng thường Tiêu chuẩn khơng đề cập tới vấn đề an toàn liên quan đến người sử dụng Trách nhiệm người sử dụng phải xác lập thực hành an toàn, bảo đảm sức khỏe phù hợp với quy định quốc gia QUAN TRỌNG - Điều quan trọng phép thử tiến hành theo tiêu chuẩn phải thực nhân viên đào tạo Phạm vi áp dụng Tiêu chuẩn quy định phương pháp xác định số chất không phân cực hydrocacbon đa vịng dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật sắc ký khí kết hợp khối phổ (GC-MS) nước uống nước ngầm với nồng độ khối lượng lớn 0,005 g/ nước mặt nước thải với nồng độ khối lượng lớn 0,01 g/l (đối với hợp chất) Ngoài hydrocacbon thơm đa vịng (PAH) dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật, phương pháp áp dụng với chất không phân cực khác Tuy nhiên, phải kiểm tra tính phù hợp khả áp dụng phương pháp với chất CHÚ THÍCH 1: Phương pháp kiểm chứng phù hợp quy định ISO/TS 13530[3] Tiêu chuẩn dùng cho mẫu có chứa đến 150 mg/l chất rắn lơ lửng CHÚ THÍCH 2: Xác định PAH áp dụng GC-MS thuộc phạm vi ISO 28540[9] 2 Tài liệu viện dẫn Các tài liệu viện dẫn sau cần thiết cho việc áp dụng tiêu chuẩn Đối với tài liệu viện dẫn ghi năm cơng bố áp dụng phiên nêu Đối với tài liệu viện dẫn khơng ghi năm cơng bố áp dụng phiên nhất, bao gồm sửa đổi (nếu có) TCVN 6661 -1 (ISO 8466-1), Chất lượng nước -Hiệu chuẩn đánh giá phương pháp phân tích ước lượng đặc trưng thống kê - Phần 1: Đánh giá thống kê hàm chuẩn tuyến tính TCVN 6663-1 (ISO 5667-1), Chất tượng nước - Lấy mẫu - Phần 1: Hướng dẫn thiết kế chương trình lấy mẫu kỹ thuật lấy mẫu TCVN 6663-3 (ISO 5667-3), Chất lượng nước -Lấy mẫu- Phần 3: Hướng dẫn bảo quản xử lý mẫu nước TCVN 9241 (SO 6468), Chất lượng nước - Xác định thuốc trừ sâu clo hữu định, polyclo biphenyl clorobezen - Phương pháp sắc ký khí sau chiết lỏng-lỏng Thuật ngữ định nghĩa Trong tiêu chuẩn này, áp dụng thuật ngữ định nghĩa sau: 3.1 Chất phân tích (analyte) Chất xác định [ISO 15089:2000[4] định nghĩa 3.2] CHÚ THÍCH 1: Các chất đề cập đến tiêu chuẩn nêu Bảng 3.2 Chuẩn hiệu chuẩn (calibration standard) Dung dịch chuẩn bị từ chuẩn thứ và/hoặc dung dịch gốc, dùng để hiệu chuẩn tín hiệu đáp ứng thiết bị tương ứng với nồng độ chất phân tích [ISO 18073:2004[7] định nghĩa 3.1.2] 3.3 Ion phân tích (diagnostic ion) Các mảnh ion chọn lọc, ion phân tử ion đặc trưng khác chọn lọc từ phổ khối lượng hợp chất mục tiêu với tính đặc thù cao có [ISO 22892:2006[8] định nghĩa 3.6] 3.4 Chuẩn bơm (injection standard) Hỗn hợp chuẩn bổ sung vào mẫu trước bơm vào thiết bị GC-MS, để giám sát tính biến đổi tín hiệu trả lời thiết bị để tính độ thu hồi nội chuẩn 3.5 Nội chuẩn (internal standard) Chuẩn đồng vị đánh dấu chất không phân cực khơng có mẫu bổ sung vào mẫu trước chiết, trừ khỏi nồng độ chất tính CHÚ THÍCH 1: Chất bổ sung vào mẫu trước chiết dùng để định lượng thành phần đo Độ thu hồi chất chuẩn tính tốn sử dụng để kiểm tra tính qui trình phân tích 3.6 Hợp chất nguyên thể/hợp chất nguyên (native compound) Hợp chất không đánh dấu 3.7 Cách thức đo ion có chọn lọc (selected ion mode) SIM Phương pháp ghi lại ion có chọn lọc (selectec ion recording) SIR Đo cường độ ion phân tích chọn lọc [ISO 22892:2006,[8] định nghĩa 3.8, bổ sung, sửa đổi - thêm vào hai tên đồng nghĩa cuối cùng] Nguyên tắc Phương pháp quy định tiêu chuẩn xác định chất không phân cực liệt kê Bảng Sử dụng phương pháp chiết lỏng-lỏng dùng hexan để chiết chất không phân cực khỏi mẫu nước Một hỗn hợp nội chuẩn thêm vào mẫu trước chiết Làm giàu dịch chiết cách làm bay lượng lại đưa vào dung mơi thích hợp để làm chạy sắc ký khí (GC) Sử dụng dung mơi bay khác chứng minh có hiệu suất thu hồi tốt (độ thu hồi từ 70% đến 110%) CHÚ THÍCH: Dung mơi phù hợp khác là: izohexan C6H15 (CAS: 107-83-5);xyclohexan: C6H12 (CAS: 110-82-7); pentan: C5H12 (CAS: 109-66-0); ete dầu mỏ: nhiệt độ sôi từ 40°C đến 60°C Phương pháp chiết lỏng-lỏng khơng sử dụng với mẫu có hàm lượng chất rắn lơ lửng lớn 150mg/l Nếu cần, làm dịch chiết mẫu nước mặt nước thải sắc ký cột trước phân tích Trước bơm mẫu, chuẩn bơm thêm vào dịch chiết phần nhỏ dịch chiết bơm vào sắc ký khí Chất khơng phân cực tách cột mao quản nhồi silica phù hợp, phủ lớp màng polysiloxan không phân cực polysiloxan cải biên phân cực nhẹ với trình tách hiệu Cột phải phù hợp với việc tách cặp đồng phân chất Nhận biết định lượng thực khối phổ (MS) sử dụng ion hóa điện tử (El) Bảng - Các chất khơng phân cực xác định qui định kỹ thuật Tên Công thức phân tử Khối lượng g/mol Số CAS Naphthalen C10H8 128,17 91-20-3 Acenaphthylen C12H8 152,20 208-96-8 Acenaphthen C12H10 154,21 83-32-9 Fluoren C13H10 166,22 86-73-7 Phenanthren C14H10 178,23 85-01-8 Anthracen C14H10 178,23 120-12-7 Pyren C16H10 202,26 129-00-0 Fluoranthen C16H10 202,26 206-44-0 Crysen C18H12 228,29 218-01-9 Benzo[a]anthracen C18H12 228,29 56-55-3 Benzo[b]fluoranthen C20H12 252,32 205-99-2 Benzo[k]fluoranthen C20H12 252,32 207-08-9 Benzo[a]pyren C20H12 252,32 50-32-8 Dibenzo[a,h]anthracen C22H14 278,35 053-70-3 Benzo[ghi]perylen C22H12 276,34 191-24-2 Indeno[1,2,3-cd]pyren C22H12 276,34 193-39-5 PCB-28:2,4,4'-trichlorobiphenyl C12H7Cl3 257,54 7012-37-5 PCB-52:2,2',5,5'-tetrachlorobiphenyl C12H6Cl4 291,99 35693-99-3 PCB-101:2,2',4,5,5'-pentachlorobiphenyl C12H5Cl5 326,43 37680-73-2 PCB-118:2,3',4,4',5-pentachlorobiphenyl C12H5Cl5 326,43 31508-00-6 PCB-138:2,2',3,4,4',5'-hexachlorobiphenyl C12H4Cl6 360,88 35065-28-2 PCB-153:2,2’,4,4',5,5'-hexachlorobiphenyl C12H4Cl6 360,88 35065-27-1 PCB-180: 2,2',3,4,4',5,5'-heptachlorobiphenyl C12H3Cl7 395,33 35065-29-3 PAH PCB OCP Hexachlorobenzen (HCB) C6CI6 284,78 118-74-1 -Hexachlorocyclohexan (-HCH) C6H6Cl6 290,83 319-84-6 -Hexachlorocyclohexan (-HCH) C6H6Cl6 290,83 319-85-7 y-Hexachlorocyclohexan (y-HCH) C6H6Cl6 290,83 58-89-9 δ-Hexachlorocyclohexan (δ-HCH) C6H6Cl6 290,83 319-86-8 -Hexachlorocyclohexan (-HCH) C6H6Cl6 290,83 6108-10-7 Aldrin C12H8Cl6 364,93 309-00-2 Dieldrin C12H8Cl6O 380,91 60-57-1 Endrin C12H8Cl6O 380,91 72-20-8 C10H5Cl7 373,32 76-44-8 Heptaclor epoxid (exo-, cis- or -isomer) C10H5Cl7O 389,30 28044-83-9 Heptachlor epoxid (endo-, trans- or -isomer) C10H5Cl7O 389,30 1024-57-3 -Endosulfan C9H6Cl6O3S 406,92 959-98-8 -Endosulfan C9H6Cl6O3S 406,92 33213-65-9 p,p'-DDE C14H8Cl4 318,02 72-55-9 o,p'-DDD C14H10Cl4 320,04 53-19-0 o,p'-DDT C14H9Cl5 354,49 784-02-6 p,p'-DDD C14H10Cl4 320,04 72-54-8 o,p'-DDE C14H8Cl4 318,02 3424-82-6 p,p'-DDT C14H9Cl5 354,49 50-29-3 C16H15Cl3O2 345,65 72-43-5 1,2,4-Trichlorobenzene C6H3Cl3 181,45 120-82-1 1,2,3-Trichlorobenzene C6H3Cl3 181,45 87-61-6 1,3,5-Trichlorobenzene C6H3Cl3 181,45 108-70-3 1,2,3,4-Tetrachlorobenzene C6H2Cl4 215,89 634-66-2 1,2,3,5-Tetrachlorobenzene C6H2Cl4 215,89 634-90-2 1,2,4,5-Tetrachlorobenzene C6H2Cl4 215,89 95-94-3 Pentachlorobenzene C6HCl5 250,34 608-93-5 C6Cl5NO2 295,34 82-68-8 Azinphos-ethyl C12H16N3O3PS2 345,40 2642-71-9 Bromofenvinphos-ethyl C12H14BrCl2O4P 404,02 33399-00-7 C12H14Cl3O4P 359,57 470-90-6 Chloropyriphos-ethyl C9H11Cl3NO3PS 350,59 2921-88-2 Chloropyriphos-methyl C7H7Cl3NO3PS 322,53 5598-13-0 C9H12ClO4P 250,02 23560-59-0 Heptaclor Methoxychlor Clorobenzens Pentachloronitrobenzene Phospho hữu Chlorofenvinphos Heptenophos Cản trở 5.1 Cản trở lấy mẫu, chiết làm giàu Bình chứa mẫu phải làm vật liệu không gây ảnh hưởng đến chất phân tích thời gian tiếp xúc (tốt làm thép không gỉ thủy tinh) Tránh sử dụng nhựa vật liệu hữu khác trừ polytetrafluoroeten (PTFE) trình lấy mẫu, bảo quản mẫu chiết Cần ý sử dụng chất hoạt động bề mặt để làm bình chứa mẫu chúng tạo thành nhũ tương q trình chiết lỏng-lỏng Nếu sử dụng thiết bị lấy mẫu tự động, tránh sử dụng ống làm Silicon cao su Nếu sử dụng vật liệu này, cần giảm thiểu thời gian tiếp xúc Tráng rửa đường ống lấy mẫu nước trước thử mẫu Xem hướng dẫn TCVN 6663-1 (ISO 5667-1) TCVN 6663-2 (ISO 5667-3) Tránh để ánh sáng mặt trời chiếu trực tiếp vào mẫu thử thời gian tiếp xúc với ánh sáng kéo dài Bảo quản mẫu bình chứa mẫu Có thể sử dụng chai thủy tinh sau mẫu cần phải giữ hộp tối Trong trình bảo quản mẫu thử, xảy việc thành phần hấp phụ lên thành bình chứa Mức độ phụ thuộc vào thời gian bảo quản Làm giàu dung mơi hữu dẫn đến thành phần dễ bay naphtalen, clorobenzen hóa chất bảo vệ thực vật có chứa phospho 5.2 Cản trở với sắc ký khí Các chất không phân cực tách riêng biệt cột mao quản nhồi silica nung chảy, phủ lớp polysiloxan không phân cực polysiloxan cải biên phân cực nhẹ với tính hiệu Cột cần phải phù hợp với việc tách benzo[a]pyren benzo[e]pyren Nhận dạng định lượng thực MS sử dụng ion hóa electron (El) Độ phân giải đủ cao (ví dụ khơng nhỏ R = 0,8) pic benzo[b]fluorathen benzo[k]fluoranthen benzo[a]pyren benzo[e]pyren đặt làm tiêu chí chất lượng cột mao quản Benzo[j]fluoranthen khơng tách khỏi benzo[k]fluoranthen benzo[b]fluoranthen Có thể triphenylen khơng thể tách hồn tồn khỏi benzo[a]anthracen chrysen Nếu tượng xảy ra, ghi lại báo cáo thử CHÚ THÍCH: Benzo[f]fluoranthen, benzo[e]fluoranthen triphenylen khơng phải phần 16 chất phân tích PAH Có thể khó khăn việc tách sắc ký cặp Do khác khối lượng phân tử chúng, việc định lượng thực phát khối lượng chọn lọc Khi phân giải khơng hồn tồn, cần phải kiểm tra tích hợp pic cần, hiệu lại - PCB 52 - PCB 73; - PCB 101 - PCB 89/PCB 90; - PCB 118 - PCB 106; - PCB 138-PCB 164/PCB 163 Cản trở các cặp đồng phân clorobiphenyl quan trọng chúng có khối lượng kiểu phân đoạn Do vậy, độ phân giải hợp chất cần phải R > 0,8 PCB Số Ballschmitter - Tricloro PCB 28-PCB 31 - Tetracloro PCB 52-PCB 43 - Pentacloro PCB 101-PCB 113 PCB 118-PCB 149 - Hexacloro PCB 153/PCB 168-PCB 132 PCB 138/PCB 164/PCB163-PCB PCB160 - Heptacloro PCB 180-PCB 193 Việc hấp phụ thông số chọn lọc, ví dụ 4,4’-DDT (p,p’-DDT); 2.4’-DDT (o,p'-DDT) và/hoặc endrin, xảy buồng bơm mẫu 5.3 Cản trở với GC-MS Các chất rửa giải với hợp chất cần phân tích cản trở đến việc xác định Những cản trở dẫn đến tín hiệu phân giải khơng hồn tồn phụ thuộc vào độ lớn chúng ảnh hưởng đến độ xác độ chụm kết phân tích Những pic khơng đối xứng rộng pic tương ứng chất chuẩn gợi ý đến chất cản trở Phân tách sắc ký benzo[a,h]anthracen indeno[1,2,3-cd]pyren thường khó khăn Do khác khối lượng phân tử chúng, việc định lượng thực phát khối lượng chọn lọc Khi độ phân giải khơng hồn tồn, cần phải kiểm tra tích phân pic cần, hiệu chỉnh lại Thuốc thử Trong q trình phân tích, ngoại trừ có định khác, sử dụng thuốc thử cấp phân tích cơng nhận, “đối với phân tích dư lượng” “đối với phân tích GC”, tùy trường hợp cụ thể, nước cất nước loại khống nước có độ tinh khiết tương đương Cần ý mẻ dung môi không chứa nồng độ trắng ảnh hưởng tới kết 6.1 Chất rắn 6.1.1 Natri sunphat, Na2SO4, khan, làm trước cách nung tới 500 °C h khơng có hợp chất cản trở 6.2 Dung môi 6.2.1 Hexan, C6H14 6.2.2 Axetonitril, CH3CN 6.2.3 Axeton, C3H6O 6.2.4 Decan, C10H22 6.2.5 lzooctan, C8H18 6.2.6 Diclorometan, CH2Cl2 6.3 Các chất khí 6.3.1 Nitơ, 99,999 % theo thể tích, đồ bay dịch chiết 6.4 Dung dịch chuẩn 6.4.1 Chất chuẩn (xem Bảng 2) nội chuẩn Chọn nội chuẩn với đặc tính lý học hóa học (ví dụ khả chiết, thời gian lưu) tương tự đặc tính hợp chất cần phân tích Sử dụng nội chuẩn lớp hợp chất cho phương pháp GC-MS để đánh giá kết Sử dụng hai nội chuẩn cho loại chất Kiểm chứng độ ổn định nội chuẩn thường xuyên Bảng đưa hợp chất sử dụng Các nội chuẩn thêm vào mẫu để chiết hịa tan dung mơi tan nước CHÚ THÍCH: Có thể sử dụng chuẩn đánh dấu chất đồng vị 13C làm nội chuẩn Các dung dịch xác nhận chất khơng phân cực có độ tinh khiết xác nhận có sẵn từ số lượng giới hạn nhà cung cấp Vì tính chất nguy hiểm chất sử dụng, tốt cần có chứng nhận sử dụng dung dịch chuẩn có bán sẵn Tránh tiếp xúc với da Các nội chuẩn thường sử dụng chất đánh dấu chất đồng vị Nên sử dụng chất Chúng dùng để đánh giá kết định lượng chất (Điều 11 12) Bảng - Các chất nội chuẩn đơtơri hóa chất khơng phân cực tự nhiên Các hợp chất gốc Nội chuẩn đánh dấu PAH PAH Naphthalene Naphthalene-d8 (CAS No 1146-65-2) Acenaphthene Acenaphthene-d10 (CAS No 15067-26-2) Acenaphthylene Acenaphthylene-d8 (CAS No 93951 -97-4) Fluorenee Fluorenee-d8 (CAS No 81103-79-9) Anthracene Anthracene-d8 (CAS No 1719-06-8) Phenanthrene Phenanthrene-d8 (CAS No 1517-22-2) Fluoranthene Fluoranthene-d8 (CAS No 93951-69-0) Pyrene Pyrene-d8 (CAS No 1718-52-1) Benzo[a]anthracen Benzo[a]anthracen- d8(CAS No 1718-53-2) Crysene Crysene-d8 (CAS No 1719-03-5) Benzo[b]fluoranthene Benzo[b]fluoranthene-d8 (CAS No 93951 -98-5) a Benzo[f]fluoranthene (CAS No 205-82-3) Triphenylenea(CAS No 217-59-4) Benzo[k]fluoranthene Benzo[k]fluoranthene d12 (CAS No 93952-01-3) Benzo[a]pyrene Benzo[a]pyrene d12 (CAS No 63466-71-7) Benzo[a]pyrene Benzo[a]pyrenea (CAS No 192-97-2) Benzo[e]pyrenea (CAS No 192-97-2) D12 Available (CIL)b lndeno[1,2,3-cd]pyrene lndeno[1,2,3-cd]pyrene-d12 (CAS No 2035781-33-0) Dibenzo[a,h]anthracene Dibenzo[a,h]anthracene-d14 (CAS No 13250-98-1) Benzo[ghi]perylene Benzo[ghi]perylene-d12 (CAS No 93051-66-7) PCB-28:2,4,4'-trichlorobiphenyl PCB-28: 13 C-2,4,4'-trichlorobiphenyl PCB-52:2,2',5,5'-tetrachlorobiphenyl PCB-52:13 C-2,2’,5,5'-tetrachlorobiphenyl PCB-101:2,2’,4,5,5'-pentachlorobiphenyl PCB-101:13 C-2,2',4,5,5’-pentachlorobiphenyl PCB-118:2,3',4,4’,5-pentachlorobiphenyl PCB-118:13 C-2,3’,4,4',5-pentachlorobiphenyl PCB-138:2,2’,3,4,4',5-hexachlorobiphenyl PCB-138:13 C-2,2',3,4,4',5'-hexachlorobiphenyl PCB-153:2,2’,4,4',5,5'-hexachIorobiphenyl PCB-153:13 C-2,2’,4,4',5,5'-hexachIorobiphenyl PCB-180:2,2',3,4,4',5,5'heptachlorobiphenyl PCB-180:13 C-2,2',3,4,4',5,5,-heptachlorobiphenyl OCP OCP -Hexachlorocyclohexan (-HCH) (-HCH) 13C6H6Cl6 (CAS No 222966-66-7) -Hexachlorocyclohexan (-HCH) 13 Y-Hexachlorocyclohexan (y-HCH) (y-HCH) 13C6H6Cl6 (CAS No 104215-85-2) δ-Hexachlorocyclohexan (δ-HCH) 13 C Available (CIL)b C Available (CIL) -Hexachlorocyclohexan(-HCH) OCP OCP Aldrin 13 C Available (CIL)b Dieldrin 13 C Available (CIL)b Endrin 13 C Available (CIL)b Heptaclor 13 C Available (CIL)b Heptaclor epoxid (exo-, cis- or -isomer) 13 C Available (CIL)b Heptachlor epoxid (endo-, trans- or isomer) -Endosulfan d4 13 C Available (CIL)b -Endosulfan d4 13 C Available (CIL)b p,p'-DDE 13 C Available (CIL)b o,p'-DDD 13 C Available (CIL)b o,p'-DDT 13 C Available (CIL)b p,p'-DDD 13 C Available (CIL)b o,p'- DDE 13 C Available (CIL)b p,p'- DDT 13 C Available (CIL)b Methoxychlor 13 C Available (CIL)b 1,2,4-Trichlorobenzene 13 C Available (CIL)b 1,2,3-Trichlorobenzene 13 C Available (CIL)b 1,3,5-Trichlorobenzene 13 C Available (CIL)b 1,2,3,4-Tetrachlorobenzene 13 C Available (CIL)b 1,2,3,5-Tetrachlorobenzene 1,2,4,5-Tetrachlorobenzene D2 13 C Available (CIL)b Pentachlorobenzene 13 C Available (CIL)b Pentachloronitrobenzene 13 C Available (CIL)b Hexachlorobenzene (HCB) 13 C Available (CIL)b Phốt hữu Azinphos-ethyl Phốt hữu 13 C Available (CIL)b 13 C Available (CIL)b Bromofenvinphos-ethyl Chlorofenvinphos Chloropyriphos-ethyl 13 C Available (CIL)b Chloropyriphos-methyl 13 C Available (CIL)b Heptenophos a Không chất 16 chất phân tích mục tiêu, để kiểm tra dù có đủ độ phân giải b Phịng thí nghiệm đồng vị Cambridge (CIL) tiến sỹ Ehrenstorfer ví dụ nhà cung cấp phù hợp Thông tin nêu để thuận tiện cho người sử dụng tiêu chuẩn không xác nhận nhà cung cấp 6.4.2 Chuẩn bơm Thêm chất không phân cực đánh dấu đồng vị vào dịch chiết cuối vào dung dịch hiệu chuẩn (6.5.3) trước bơm vào GC-MS để kiểm tra độ thu hồi nội chuẩn Chuẩn bị dung dịch gốc chuẩn bơm dung mơi phù hợp, ví dụ axetonitril (6.2.2) hexan (6.2.1) với nồng độ khối lượng,  = 10 g/ml 6.5 Dung dịch 6.5.1 Dung dịch gốc đơn chất Chuẩn bị dung dịch đơn chất nguyên thể nội chuẩn (xem Bảng 2) dung môi phù hợp, ví dụ axetonitril (6.2.2) hexan (6.2.1), với nồng độ khối lượng  = 200 g/ml Các dung dịch dùng để xác nhận nhận biết thành phần đơn lẻ sắc đồ 6.5.2 Dung dịch gốc nhiều chất Pha loãng thể tích vừa đủ, ví dụ ml dung dịch gốc đơn chất (6.5.1) vào bình định mức (ví dụ 100 ml) với dung mơi thích hợp, ví dụ axetonitril (6.2.2) hexan (6.2.1) để chuẩn bị dung dịch có nồng độ khối lượng,  = 10 g/ml Cách khác, sử dụng dung dịch hỗn hợp/Kết hợp có bán sẵn (đã chứng nhận) vài chất chuẩn (xem Bảng 2) nồng độ khối lượng phù hợp với chất tương ứng Ví dụ 10 g/ml dung môi phù hợp, axetonitril (6.2.2) hexan (6.2.1) Dung dịch 6.4.2, 6.5.1 6.5.2 bền năm bảo quản chỗ tối nhiệt độ phòng tránh để bay Độ bền dung dịch tiêu chuẩn cần phải kiểm tra thường xuyên Với mục đích này, cần phải có sẵn dung dịch độc lập để kiểm sốt chất lượng phịng thí nghiệm 6.5.3 Dung dịch hiệu chuẩn (CS) Chuẩn bị năm dung dịch hiệu chuẩn (CS1 đến CS5) cách pha loãng phù hợp với dung dịch gốc nhiều chất (6.5.2), dùng hexan (6.2.1) axetonitril (6.2.2) làm dung môi Thêm vào dung dịch lượng dung dịch gốc chuẩn bơm để có nồng độ cuối cùng,  = 100 ng/ml Dung môi dùng cho dung dịch hiệu chuẩn nên giống với dung dịch chiết cuối Chuyển, ví dụ 50 l dung dịch gốc nhiều chất vào bình định mức ml làm đầy đến vạch mức dung mơi phù hợp Thể tích l dung dịch chuẩn chứa 100 pg chất cần phân tích ( = 100 ng/ml) Nồng độ khối lượng chất không phân cực dung dịch gốc nhiều chất cần phải kiểm tra cách so sánh với dung dịch chuẩn độc lập, ưu tiên dung dịch chuẩn chứng nhận Tất chất đơn lẻ phải nằm khoảng sai số ± 10 % so với chuẩn độc lập Dung dịch chuẩn phải dùng để hiệu chuẩn hệ thống GC [hỗn hợp hexan (6.2.1) để kiểm tra tỉ lệ thu hồi [hỗn hợp axeton (6.2.3)] Bảo quản dung dịch (3 ± 2) °C tối Các dung dịch bền tháng Thiết bị, dụng cụ 7.1 Yêu cầu chung Bình thủy tinh tiêu chuẩn khuấy làm để loại bỏ hết tất chất cản trở CHÚ THÍCH: Tất bình thủy tinh khuấy làm sạch, ví dụ cách tráng rửa với nước tẩy, nước nóng sấy khoảng từ 15 đến 30 120 °C Sau làm nguội, bình thủy tinh tráng axeton bảo quản kín mơi trường Khơng sử dụng lại bình thủy tinh khuấy tiếp xúc với mẫu nước - nước thải mẫu có nồng độ cao phân tích nước uống Đặc biệt phân tích PAH, PCB HCH 7.2 Chai thủy tinh màu, cổ hẹp, đáy bằng, 1000 ml có nắp lót nhơm 7.3 Khuấy từ, có khuấy (cỡ khoảng cm) thủy tinh bọc PTFE, giữ dung môi dùng để chiết 7.4 Phễu tách, dung tích danh định 1000 ml, có Khóa PTTE nắp thủy tinh 7.5 Bình nón, dung tích danh định 250 ml, có nắp thủy tinh 7.6 Thiết bị để làm giàu dung dịch rửa giải bay hơi, ví dụ máy làm bay quay, điều chỉnh chân không không đổi kèm bể kiểm soát nhiệt độ nước, thiết bị làm khơ sử dụng khí nitơ 7.7 Thiết bị chân khơng để chiết pha rắn, ví dụ hộp chân khơng, hộp chiết 7.8 Xyranh microlit, ví dụ 500 l 1000 l 7.9 Bình khử, 100 l (ví dụ Hình B.3) 7.10 Máy ly tâm có trục quay, kèm ống ly tâm (ví dụ Hình B.2) với đáy nhỏ dần, 50 ml 7.11 Bộ rung, điều chỉnh tốc độ quay 7.12 Lọ thủy tinh, máy lấy mẫu tự động, dung tích, ví dụ ml, có nắp làm vật liệu trơ lớp bọc PTFE 7.13 Lọ thủy tinh, ví dụ ống máy ly tâm, có vạch chia độ (có vạch chia 0,1 ml), dung tích danh định 10 ml, có nắp thủy tinh 7.14 Sắc ký khí, kết hợp với detector MS (El) 7.15 Cột mao quản, phân giải cao dùng cho GC (xem Phụ lục A) 7.16 Màng vi lọc, màng ưa nước chịu dung môi, cỡ lỗ 0,45 m 7.17 Pipet Pasteur 7.18 Cột thủy tinh, nhồi đầy với 0,5 g silica (xem 7.19) CHÚ THÍCH: Các cột có bán sẵn thị trường 7.19 Silica, cỡ hạt trung bình Khoảng 40 m, nung nóng 450 °C h bảo quản bình hút ẩm để đảm bảo hoạt tính tối đa CHÚ THÍCH: Cartric silica nhồi trước có bán sẵn thị trường 7.20 Rây phân tử, đường kính lỗ 0,4 nm 7.21 Bông thủy tinh Lấy mẫu Lấy mẫu vào chai thủy tinh màu dung tích 1000 ml (7.2) Khi lấy mẫu nước uống từ vòi hệ thống cung cấp nước, lấy mẫu trước khử trùng vòi lửa lấy mẫu vi khuẩn Nạp đầy chai tới vai chai (khoảng 950 ml) Xác định thể tích mẫu chiết cách xác định khối lượng, trước chiết sau chai rỗng, với độ xác ± g Bảo quản mẫu (3 ±2) °C tránh ánh sáng trực tiếp tới tiến hành chiết (xem TCVN 6663-3 (ISO 5667-3)) Đảm bảo việc chiết thực khoảng thời gian bảo quản tối đa, quy định TCVN 6663-3 (ISO 5667-3) để tránh chất Nói chung, nên tiến hành chiết sớm tốt để giảm thiểu tác hại tiềm tàng bình chứa mẫu xảy 9 Cách tiến hành 9.1 Yêu cầu chung Phương pháp chiết lỏng-lỏng không sử dụng với mẫu chứa chất lơ lửng lớn 150 mg/l CHÚ THÍCH: Ngồi hexan, dung mơi bay dùng chứng minh dung môi có độ thu hồi tốt (độ thu hồi từ 70% đến 110%) 9.2 Chiết mẫu 9.2.1 Chuẩn bị mẫu chiết Thêm lượng xác định chất nội chuẩn (ví dụ thể tích chứa 50 ng) hòa tan mẫu nước (6.4.2) Thêm 25 ml hexan (6.2.1) khuấy, sau đóng bình có nắp vịng PTFE đậy bình nón (7.5) với nút nhám Lắc kỹ mẫu khuấy từ (7.3) khoảng tối đa 60 Chuyển mẫu vào phễu tách để tách pha Nếu tạo thành nhũ tương trình chiết, thu lấy nhũ tương vào ống ly tâm ly tâm (7.10), ví dụ 10 tốc độ khoảng 3000 r/min Chuyển nước tách pipet Pasteur Chuyển dịch chiết vào bình nón (7.5) làm khơ theo 9.2.2 Đối với nước thải nước mặt, lặp lại quy trình chiết hai lần Chuyển mẫu từ phễu tách vào lại bình chứa mẫu, thêm 25 ml hexan (6.2.1), tiến hành mơ tả Quy trình chiết tiến hành phễu tách (7.4) sử dụng thiết bị lắc (7.11) vi tách (xem Phụ lục B) Tráng chai kỹ dung môi chiết để chiết hết thành phần hấp phụ CHÚ THÍCH 1: Dung mơi bay khác dùng chứng minh hiệu suất thu hồi tốt (độ thu hồi từ 70% đến 110 %) CHÚ THÍCH 2: Đối với chiết nước thải mẫu nước khác nghi ngờ nồng độ PAH cao, chuyển 10 ml đến 100 ml mẫu đồng vào bình nón 250 ml (7.5) pipet pha loãng nước tới 200 ml Sau Khi thêm 25 ml hexan (6.2.1), tiến hành quy trình mô tả 9.2.2 Làm khô dịch chiết Chuyển lớp hexan thu theo 9.2.1 vào bình nón 100 ml Tráng phễu ống ly tâm ml hexan gộp chúng vào dịch chiết Làm khô dịch chiết với khoảng 1,0 g natri sunphat (6.1.1) 15 min, xoay bình thường xuyên Dịch chiết làm khơ cách lọc qua natri sunphat khan Gạn dịch chiết sấy vào bình khử (7.9) Tráng bình nón hai lần ml hexan gạn vào bình khử 9.2.3 Làm giàu Làm bay dịch chiết hexan khô thu theo 9.2.2 cịn đầu nhọn bình khử (khoảng ml), ví dụ, dùng máy quay, nhiệt độ 30 °C, giảm áp suất từ từ xuống 20 kPa Không làm bay dịch chiết tới khô kiệt, làm ví dụ, hợp chất vòng 1,2,4triclorobenzen Thêm vài giọt decan (6.2.4) izooctan (6.2.5) để hạn chế việc phần lớn chất hữu bay Hòa tan dịch chiết vào thể tích biết, ví dụ ml Đảm bảo cặn lắng đọng lên thành bình hịa tan cách lắc dịch chiết sử dụng thiết bị lắc Làm dịch chiết mẫu nước thải mẫu khác chưa biết nguồn gốc silica theo 9.2.4, sắc đồ cho thấy có chất cản trở đến việc định lượng Chuyển mẫu làm giàu vào lọ đựng mẫu thủy tinh, cần sau lọc qua màng lọc (7.16) Lưu giữ mẫu nơi mát, tối thực phân tích Tiến hành quy trình mơ tả 9.4 CHÚ THÍCH: Có thể sử dụng phương pháp làm giàu khác Nếu dùng bơm mẫu tích lớn dự đốn nồng độ hợp chất cần phân tích cao hơn, sử dụng hệ số làm giàu thấp 9.2.4 Làm Áp dụng quy trình mơ tả 9.2 dẫn đến việc chiết chất phân cực có liên quan và/hoặc chất khác không mong muốn, điều gây khó khăn xuất pic chưa biết, chồng lên pic chất cần phân tích Khi chất cần phân tích PAH, quy trình làm silica mơ tả Phụ lục C dùng Sử dụng quy trình làm chất khơng phân cực khác quy định TCVN 9241 (ISO 6468) 9.3 Sắc ký khí Vận hành máy sắc ký khí theo hướng dẫn nhà sản xuất Lựa chọn cột mao quản điều kiện sắc ký để việc tách hiệu (xem Phụ lục A)) Khi sử dụng chuẩn bơm, thêm xác lượng biết chuẩn bơm (6.4.2) vào mẫu chiết, lắc kỹ bơm vào GC 9.4.Đo mẫu trắng Phải phân tích để xác định mẫu trắng lần cho mẻ nước trước tiến hành trình thực loạt phân tích Loại nước phải khơng có hợp chất cần xác định mức phát Đo mẫu trắng phải bao gồm tất bước quy trình phân tích từ nhận mẫu phịng thí nghiệm đến đánh giá sắc đồ khí Nếu giá trị trắng cao bất thường (trên 50 % mức báo cáo thấp nhất), cần phải kiểm tra lại bước quy trình để tìm lý dẫn đến mẫu trắng cao bất thường Đảm bảo giá trị mẫu trắng giảm tới mức tối thiểu quy trình khác nhau, ví dụ loại bỏ chất ô nhiễm mẫu từ khơng khí xung quanh dung mơi, đồng thời kiểm tra thiết bị phân tích Nếu nồng độ mẫu gần với giới hạn phát hiện, nhưng, giá trị mẫu trắng cao 50 % so với giá trị báo cáo thấp chấp nhận Nếu xảy trường hợp này, mẫu nên cô đặc thử lại để xác nhận 9.5 Điều kiện khối phổ Điều chỉnh khối phổ theo hướng dẫn nhà sản xuất Sắc ký ghi lại phổ quét đầy đủ (50 amu đến 420 amu) chế độ quan trắc/ghi ion lựa chọn (SIM/SIR) Điều chỉnh tốc độ quét máy quang phổ khối lượng vận tốc cho phép cho pic GC mô tả bảy điểm số liệu Các ion chuẩn đoán với cường độ tương ứng theo ISO 22892[8] nêu Bảng CHÚ THÍCH: Tỷ số tương quan xác định theo quy trình mơ tả cách sử dụng nội chuẩn đơterri hóa đề cập 10 Hiệu chuẩn 10.1 Khái quát Đường chuẩn xây dựng cho hợp chất dựa dải nồng độ Tỷ số tương quan [Rrel FR tùy thuộc vào sử dụng nội chuẩn đánh dấu hay chuẩn nguyên khác (không đánh dấu)] ứng với nồng độ dung dịch chuẩn lập đường chuẩn tính máy tính sử dụng hàm hồi quy Tỷ số tương quan xác định theo quy trình mơ tả Thực năm điểm hiệu chuẩn Xem thêm TCVN 6661-1 (ISO 8466-1) 10.2 Hiệu chuẩn nội chuẩn đánh dấu Sử dụng hiệu chuẩn nội chuẩn đánh dấu cho chất không phân cực cách bổ sung hợp chất đánh dấu vào mẫu Chuẩn bị đường chuẩn gồm dải nồng độ hợp chất xác định Lập đường chuẩn dựa tỷ số tương quan, Rrel (giữa hợp chất đánh dấu hợp chất gốc) với nồng độ dung dịch chuẩn tính máy tính sử dụng hồi quy tuyến tính Xác định tỷ số tương quan chất khơng phân cực theo quy trình mơ tả Thực năm điểm hiệu chuẩn Xác định tỷ số tương quan chất không phân cực tương ứng với chất tương tự đánh dấu sử dụng Công thức (1): Rrel= A1nL (1) A1Ln Trong đó: A1n diện tích pic ion chẩn đốn chất khơng phân cực; A1L diện tích pic ion chẩn đốn hợp chất đánh dấu; L nồng độ hợp chất đánh dấu dung dịch chuẩn hiệu chuẩn, tính microgam lít; n nồng độ hợp chất gốc (không phân cực) dung dịch chuẩn hiệu chuẩn, tính microgam lít CHÚ THÍCH 1: Tỷ số tương quan hợp chất không đổi (hệ số biến thiên nhỏ 20 %) điểm chuẩn, sử dụng tỷ số trung bình cho hợp chất Ngược lại, sử dụng đường chuẩn điểm hợp chất CHÚ THÍCH 2: Cũng sử dụng khối lượng để hiệu chuẩn định lượng 10.3 Hiệu chuẩn nội chuẩn Phương pháp nội chuẩn áp dụng để xác định chất không phân cực khác mà chất chuẩn không đánh dấu phải thêm vào mẫu Hiệu chuẩn yêu cầu xác định tỷ số đáp ứng, FR, xác định Công thức (2): FR = A1sis (2) A1iss Trong đó: A1s diện tích pic ion chẩn đốn chất khơng phân cực; A1is diện tích pic ion chẩn đốn chất nội chuẩn; is nồng độ chất nội chuẩn, tính microgam lít; s nồng độ hợp chất chất chuẩn hiệu chuẩn, tính microgam lít CHÚ THÍCH: Tỷ số đáp ứng FR hợp chất không đổi (hệ số biến thiên nhỏ 20 %) khoảng hiệu chuẩn điểm, sử dụng tỷ số trung bình cho hợp chất Ngược lại, đường chuẩn điểm hoàn chỉnh sử dụng cho hợp chất Đối với việc kiểm tra hiệu chuẩn hàng ngày (hiệu chuẩn lại), bơm hai dung dịch hiệu chuẩn, ví dụ nồng độ (20 ±10) % (80 ± 10) % khoảng tuyến tính thiết lập So sánh tỷ số đáp ứng tính với hệ số thu mẻ mẫu trước Các giá trị không sai khác 20 % 11 Đo mẫu Cân chỉnh hệ thống đo trước đo mẫu điều chỉnh máy phổ khối lượng theo hướng dẫn nhà sản xuất Áp dụng điều kiện đo sau Phương pháp ion hóa: va chạm electron Dải khối lượng phổ: 50 amu đến 420 amu, lớn 10 amu khối lượng lớn chất cần xác định Quãng chu kỳ: Khoảng thời gian xoay vòng < 2s cho năm phổ thực pic chất Nếu khối lượng đơn ghi nhận để làm tăng độ nhạy, cần ghi lại pic hai ion với quãng chu kỳ 12 Nhận biết Định lượng chất đơn đòi hỏi việc nhận dạng phải chắn rõ ràng Các thành phần có mảnh vỡ cần phải có tiêu chí bổ sung để nhận dạng Khi lấy toàn phổ, phổ mẫu đo phổ chuẩn tạo điều kiện làm việc, phải nhận dạng Phổ chuẩn phải phòng thí nghiệm sử dụng thiết bị tạo phải lưu giữ sở liệu phổ chuẩn Các phổ dùng cho mục đích nhận dạng MS Độ lệch pic pic (không phải pic 100 % khối lượng) phải nhỏ 10 % Nếu có độ lệch thời gian lưu, khẳng định việc nhận dạng thực cách thêm chuẩn Sử dụng chuẩn đánh dấu chất đồng vị cách tốt để khẳng định nhận dạng Một chất đơn nhận biết, nếu: - Thời gian lưu chất sắc đồ ion tổng dòng ion mẫu đồng dạng với sắc đồ tổng ion chất chuẩn đối chiếu dung dịch chuẩn thu cuối cùng, thực với điều kiện sắc ký (giới hạn: ± %; tối đa ± s); - Cường độ tương đối ion chẩn đoán ghi phổ khối lượng mẫu thu điều kiện không sai khác ± (0,1I +10) % so với cường độ tương đối chất chuẩn, I cường độ tương đối ghi từ ion đặc trưng phổ khối lượng dung dịch chuẩn Xem Bảng Bảng - Mức độ khẳng định nhận dạng Kỹ thuật MS Mức độ nhận dạng Nguyên tắc vận hành Tiêu chí bổ sung Có thể Quan trắc khối lượng Tn theo tỉ số khối lượng với hợp đơn (SIM/SIR) chất tiêu chuẩn giới hạn cho Khẳng định Thu phổ tổng (quét) Sự Phù hợp phổ với hợp chất tiêu chuẩn giới hạn cho Cập pic tới hạn dẫn đến phân bố tự động sai Trong trường hợp vậy, việc kiểm tra thủ công cần thiết Cặp pic tới hạn là: phenanthren anthracen; benzo[a]anthracen chrysen; benzo[b]floranthen benzo[k]floranthen; benzo[a]pyren benzo[e]pyren; PCB28 PCB31 Các hợp chất chồng lấn pic có khối lượng tương tự phân định giá trị chồng lấn hai pic tối thiểu 25 % tính từ pic nền, không chúng báo cáo tổng Khi sử dụng khối lượng đơn, tất ba tín hiệu khối lượng cần phải có Tỉ số tín hiệu so với nhiễu pic nhỏ khối lượng phải lớn Tỉ số ba khối lượng phổ phải xác định từ chiều cao pic pic tối đa Hai pic tương ứng với khối lượng 100 % xác định Pic tương ứng với 100 % khối lượng phải có sai số nằm khoảng 10 % giá trị pic xác định điều kiện chất chuẩn Phổ khối lượng mẫu phải bao gồm tất ion có cường độ tương ứng có sai số 10 % so với phổ chuẩn Tỉ số cường độ ion khác phổ mẫu phổ chuẩn phải nằm vòng 20 %, thử ba ion quan trọng Việc ghi nhận khối lượng đơn phải ghi báo cáo thử nghiệm Đối với việc phát MS, sử dụng diện tích pic pic chất i, sau kiểm tra nhận dạng so sánh phổ, với kỹ thuật SIM, sử dụng tỷ số đồng vị phân đoạn Nếu sử dụng chất nội chuẩn, tín hiệu khối lượng có cường độ lớn (ion chính) ln dùng để đối chiếu, sau tín hiệu kiểm tra độ tinh khiết Bảng - Các khối lượng đặc trưng khuyến nghị chất không phân cực, quy định ISO 22892[8] Hợp chất lon chẩn đoán 1a lon chẩn đoán 2a lon chẩn đoán 3a m/z m/z m/z PAH Naphthalen 128 (100) 102 (11) - Acenaphthylen 152(100) 150 (3) 76(10) Acenaphthen 153 (100) 154 (70) 76(10) Fluoren 155(150) 166 (81) 139 (4) Phenanthren 178(100) 152 (9) 76b (3) Anthracen 178 (100) 152 (12) 76 (6) Fluoranthen 202 (100) 200 (31) 100b (3) Pyren 202 (100) 200 (2) 101b (4) Benzo[a]anthracen 228 (100) 226 (3) 114b (2) Chrysen 228 (100) 226 (6) 113b (4) Benzo[b]fluoranthen 252 (100) 250 (22) 126 (5) Benzo[k]fluoranthen 252(100) 250 (22) 126 (5) Benzo[a]pyren 252 (100) 250 (18) 113 (11) lndeno[1,2,3-cd]pyren 276 (100) 138 (12) 274b * (4) Dibenzo[a,h]anthracen 278 (100) 139 (9) 276b * (5) Benzo[ghi]perylene 276 (100) 138 (12) 274 (4) 186 (100) 258 (74) 186 (82) 268 270 — 292 (100) 294 (49) 220 (95) 304 306 — 326 (100) 328 (65) 256 (62) 338 340 — 326 (100) 328 (62) 254 (57) 338 340 PCB PCB 28 13C12-PC8 28 PCB 52 13C12-PCB 52 PCB101 13C12-PCB101 PCB 118 13C12-PCB 118 PCB 138 13C12-PCB 138 PCB153 13C12-PCB 153 PCB 180 13C12-PCB 180 290 (100) 358 (42) 360 (94) 372 374 — 360 (100) 362 (92) 290 (73) 372 374 — 394 (100) 396 (96) 324 (84) 406 408 — Bảng - (Kết thúc) lon chẩn đoán 1a lon chẩn đoán 2a lon chẩn đoán 3a Hexachlorobenzene (HCB) 284 (100) 142 (22) 249 (24) -Hexachlorocyclohexane (-HCH) 181 (100) 219 (33) 109 (29) -Hexachlorocyclohexane (-HCH) 181 (97) 219 (54) 109 (49) y-Hexachlorocyclohexane (y-HCH) 181 (97) 219 (34) 109 (33) δ-Hexachlorocyclohexane 109 (100) 219 (96) 183 (90) -Hexachlorocyclohexane 109 (88) 219 (100) 183 (90) Aldrin 66(100) 263 (78) 293 (41) Dieldrin 79 (100) 263 (70) 277 (18) Endrin 81 (100) 263 (70) 277 (18) Heptachlor 100 (100) 65 (65) 272 (89) Heptachlor epoxide (cis-isomer) 253 (100) 183 (90) 289 (85) Heptachlor epoxide (trans-isomer) 353 (100) 81 (67) 263 (26) -Endosulfan 195 (100) 159 (93) 265 (55) -Endosulfan 195 (100) 241 (80) 159 (56) p,p'-DDE 246 (100) 318 (37) 176 (36) o,p'-DDD 235 (102) 165(66) 199 (29) o,p'- DDT 235 (100) 165 (67) 199 (27) p,p'-DDD 235 (100) 165 (66) 199(20) o,p'-DDE 246 (100) 318 (37) 176 (27) p,p'- DDT 235 (100) 165 (68) 199 (20) Methoxychlor 227 (100) 228 (18) 274 (5) 1,2,4-Trichlorobenzene 180 (100) 182 (97) 145 (45) 1,2,3-Trichlorobenzene 180 (100) 182 (92) 145 (38) 1,3,5-Trichlorobenzene 180 (100) 182 (95) 145 (32) 1,2,3,4-Tetrachlorobenzene 216 (100) 214 (74) 108 (24) 1,2,3,5-Tetrachlorobenzene 216 (100) 214 (78) 108 (14) 1,2,4,5-Tetrachlorobenzene 216 (100) 214 (79) 108 (12) Pentachlorobenzene 250 (100) 252 (63) 215 (25) Pentachloronitrobenzene 237 (100) 295 (83) 142 (50) 132 (100) 160 (80) 77 (68) 267 269 323 Hợp chất OCP Clorobenzen Phospho hữu Azinphos-ethyl Bromofenvinphos Chlorofenvinphos 267 (100) 323 (59) 81 (58) Chloropyriphos-ethyl 97 (100) 197 (90) 314 (47) Chloropyriphos-methyl 286 (100) 125 (95) 288 (78) Heptenophos 124 (100) 89 (77) 215 (13) a Trong ngoặc: mật độ tương đối ion mảnh b Thường mảnh 13 Tính tốn 13.1 Định lượng nội chuẩn Để tính tốn nồng độ chất khơng phân cực dùng phương pháp nội chuẩn sử dụng tỷ số đáp ứng xác định từ số liệu hiệu chuẩn ban đầu (10.3) Công thức (3): mex= A1smis (3) A1isFR Trong đó: mex lượng chất khơng phân cực dịch chiết, tính nanogam; A1s diện tích ion chẩn đốn chất khơng phân cực; mis lượng nội chuẩn, tính nanogam; A1is diện tích ion chẩn đoán nội chuẩn; FR tỷ số đáp ứng xác định 10.3 Xác định tỷ số đáp ứng nội chuẩn tương ứng với chuẩn bơm cách sử dụng diện tích pic ion chẩn đốn Sử dụng nồng độ chất dịch chiết xác định Công thức (3), để tính phần trăm thu hồi, n, nội chuẩn theo công thức (4): = mex x 100 (4) mspk Trong đó: mex lượng chất tìm thấy dung dịch, tính nanogam; mspk lượng chất chuẩn thêm vào dung dịch, tính nanogam Đối với hợp chất, xác định không thêm nội chuẩn, hiệu suất thu hồi xác định sau: Ví dụ, thêm ml dung dịch chuẩn chuẩn bị theo 6.4.1 vào 1000 ml nước tiến hành quy định Điều Xác định tỉ lệ thu hồi mẫu nước mặt phương pháp thêm chuẩn Xác định độ thu hồi trung bình,  , chất phân tích i sử dụng Cơng thức (5) (6): i.N= i.N f i.N e (5) n  (6) i,N  i= N 1 n Trong đó: i.N độ thu hồi chất phân tích i mức nồng độ N; i.N nồng độ khối lượng chất phân tích i tìm thấy mức nồng độ N, tính hàm hiệu chuẩn, tính microgam lít f i.N nồng độ khối lượng chất phân tích i cho mức nồng độ N, tính microgam lít; e  i độ thu hồi trung bình; n số lượng mức nồng độ 13.2 Định lượng nội chuẩn đánh dấu Bằng cách cho thêm lượng biết hợp chất đánh dấu vào mẫu trước chiết, hiệu chỉnh hiệu suất thu hồi chất không phân cực chất tương tự đánh dấu có tác động tương tự q trình chiết, làm giàu GC Sử dụng tỷ số tương quan, R rel, tính theo đường chuẩn ban đầu mô tả 10.2 để xác định nồng độ trực tiếp, lượng hợp chất chuẩn đánh dấu bổ sung không đổi, sử dụng Công thức (7): mex= A1nmL (7) A1LRrel Trong đó: mex lượng chất khơng phân cực dịch chiết, tính nanogam; A1n diện tích ion chẩn đốn hợp chất tự nhiên; A1L diện tích ion chẩn đốn hợp chất đánh dấu; mL lượng hợp chất đánh dấu dung dịch chuẩn hiệu chuẩn, tính nanogam; Rrel tỷ số tương quan định nghĩa 10.2 Xác định độ thu hồi mẫu nước mặt mẫu nước thải phương pháp thêm chuẩn Xác định độ thu hồi trung bình,  i chất phân tích i sử dụng Cơng thức (8) (9): i.N= i.N f i.N e (8) (9) n  i,N  i= N 1 n Trong I,N độ thu hồi chất phân tích i mức nồng độ N; I,N nồng độ khối lượng chất phân tích i tìm thấy mức nồng độ N, tính hàm hiệu chuẩn, tính microgam lít; f i,N nồng độ khối lượng chất phân tích i cho mức nồng độ N, tính microgam lít; e  i độ thu hồi trung bình; n số mức nồng độ 13.3 Độ thu hồi nội chuẩn Độ thu hồi nội chuẩn phần lớn mẫu tương tự với độ thu hồi từ dung dịch thuốc thử Giới hạn thu hồi khoảng từ 70 % đến 110 % Nếu độ thu hồi nội chuẩn nằm ngồi khoảng này, cần phải phân tích mẫu pha loãng Nếu độ thu hồi nội chuẩn mẫu pha lỗng nằm ngồi khoảng thơng thường, cần phải phân tích dung dịch hiệu chuẩn CS3 (6.5.3) kiểm định lại đường chuẩn Đối với hợp chất, phải đảm bảo kết phân tích kiểm chứng nằm khoảng 20 % nồng độ chuẩn Tuy nhiên, với hợp chất nằm giới hạn tương ứng chúng, hệ thống đo khơng phù hợp hợp chất Trong trường hợp này, chuẩn bị chuẩn hiệu chuẩn mới, giải vấn đề gây sai sót, chỉnh lại MS (9.5) đồng thời làm phép thử kiểm chứng, hiệu chuẩn lại (10.2) 13.4 Nồng độ mẫu Tính tốn nồng độ chất khơng phân cực pha nước mẫu sử dụng nồng độ hợp chất dịch chiết thể tích nước chiết, sau: = mex (3) Vs x 1000 Trong đó:  nồng độ chất không phân cực pha nước, tính microgam lít; mex lượng hợp chất dịch chiết, tính nanogam; Vs thể tích mẫu, tính lít 14 Biểu thị kết Báo cáo nồng độ khối lượng hợp chất không phân cực, theo microgam lít, khơng q hai chữ số có nghĩa Nồng độ < 0,01 g/l Ví dụ làm trịn xác đến 0,001 g/l Ví dụ làm trịn trình bày Bảng Bảng - Ví dụ làm trịn kết đo Giá trị đo Kết báo cáo g/l g/l 13.54 14 1.354 1.4 0.135 0.14 0.013 0.014 0,008 0.009 15 Báo cáo thử nghiệm Báo cáo thử nghiệm cần phải bao gồm thơng tin sau: a) Phương pháp thử sử dụng, với viện dẫn tiêu chuẩn này; b) Số liệu cần thiết để nhận dạng mẫu kiểm tra; c) Thông tin liên quan lấy mẫu bảo quản mẫu; d) Nồng độ chất không phân cực, biểu thị theo Điều 14; e) Nếu sử dụng, thích đăng ký khối lượng đơn q trình phân tích MS; f) Tất thao tác không quy định tiêu chuẩn có ảnh hưởng đến kết PHỤ LỤC A (Tham khảo) Ví dụ điều kiện GC-MS Bảng A.1 - Ví dụ điệu kiện sắc ký Cột Kích thước Chương trình nhiệt độ 95 % dimethylpolysiloxan Chiều dài: 30 m 40 oC, đẳng nhiệt % diphenylpolysiloxan Đường kính trong: 0,25 mm oC/min to 310 °C Độ dày phim: 25 m 15 đẳng nhiệt 86 % dimethylpolysiloxan Chiều dài: 30 m 40 oC, đẳng nhiệt 14 % cyanopropylenpolysiloxan Đường kính trong: 0,25 mm oC/min to 220 °C Độ dày phim: 1,0 m đẳng nhiệt PHỤ LỤC B (Tham khảo) VÍ DỤ VỀ CẤU TRÚC CỦA THIẾT BỊ CHUYÊN DỤNG Kích thước tínhh milimet CHÚ DẪN: Khóa vặn PTFE Hình B.1- Máy vi tách Kích thước tính millimet Kích thước tính millimet CHÚ DẪN: CHÚ DẪN: Khóa vặn PTFE ISO 383: [1] 14/23 Hình B.2- Ống ly tâm có đáy nhọn nắp vặn Thể tích định lượng tổng, 2ml; chia vạch 0,1ml Hình B.3- Bình thu gom PHỤ LỤC C (Tham khảo) LÀM SẠCH BẰNG SILICA Để làm dịch chiết, sử dụng cột [pipet Pasteu (7.17) có nút bơng thủy tinh] cột thủy tinh (7.18) có chứa 0,5 g silica (7.19) Làm silica cột cách xả thể tích hỗn hợp diclorometan (6.2.6)/hexan (6.2.1) (1+1) Sau với thể tích hexan (6.2.1) CHÚ THÍCH: Việc làm khơng thực với dung dịch có chứa axeton (6.2.3) Làm khô dung môi dùng làm dịch chiết cách sử dụng rây phân tử (7.20) Silica phải có hoạt tính tối đa Cơ đặc dịch chiết làm giàu (9.2.3) cách thổi dịng khí nitơ vừa phải (6.3.1) cho thể tích cịn lại 500 l Sử dụng pipet Pasteu chuyển dịch chiết cô đặc (7.17) lên silica có phủ hexan để chúng hịa gần hồn tồn vào silica Thu dịch giải lọ thủy tinh nhỏ (17.3) Rửa bình thu gom 500ml Hexan (6.2.1), đưa dịch lên cột để hịa tan hồn tồn vào silica Rửa giải PAH hỗn hợp diclorometan (6.2.6)/hexan (6.2.1) (1+1) CHÚ THÍCH Cột thủy tinh có chứa 0,5 g silica có bán sẵn ngồi thị trường cần ml hỗn hợp diclorometan (6.2.6)/hexan (6.2.1) (1+1) để rửa giải PAH Thêm vài giọt decan (6.2.4) izooctan (6.2.5) để rửa giải, làm đồng cách lắc, cô đặc (xem 9.2.3) tới thể tích từ 200 l đến 250 l Ví dụ, trước tiên làm bay máy cô quay (7.6) tới khoảng ml, sau thổi dịng nitơ (6.3.1) Làm đầy dịch chiết tới thể tích biết (ví dụ ml) dung mơi dùng cho chuẩn bị dung dịch hiệu chuẩn (6.5.3) Tiến hành quy trình mơ tả 9.4 Sử dụng phần mẫu để xác định GC-MS THƯ MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] ISO 383, Laboratory glassware - Interchangeable conical ground joints [2] ISO 7981, Water quality - Determination of polycyclic aromatic hydrocacbons (PAH) [3] ISO/TS 13530:2009, Water quality - Guidance on analytical quality control for chemical and physicochemical water analysis [4] ISO 15089:2000, Water quality - Guidelines for selective immunoassays for the determination of plant treatment and pesticide agents [5] ISO 17858:2000, Water quality - Determination of Dioxin-like polychlorinated biphenyls - Method using gas chromatography/mass spectrometry [6] ISO 17993:2002, Water quality - Determination of 15 polycyclic aromatic hydrocacbons (PAH) in water by HPLC with fluorescence detection after liquid-liquid extraction [7] ISO 10873:2004, Water quality - Determination of tetra-to octa-chlorinated dioxins and furans method using isotope dilution HRGC/HRMS [8] ISO 22892:2006, Water quality - Soil quality - Guidelines for the identification of target compounds by gas chromatography and mass spectrometry [9] ISO 28540:2011, Water quality - Determination of 16 polycyclic aromatic hydrocacbons (PAH) in water - Method using gas chromatography with mass spectrometry detection (GC-MS) [10] Council Directive 98/83/EC of November 1998 on the quality of water intended for human consumption Off J 1998-12-05, L330, pp 32-54