BÁO CÁO TIỂU LUẬN MÔN PHÂN TÍCH THỰC PHẨM PHÂN LOẠI VITAMIN, XÁC ĐỊNH VITAMIN

Khoa Cơng Nghệ Hóa Học Báo cáo tiểu luận Mơn phân tích thực phẩm Đề tài : Phân loại Vitamin –Xác định vitamin C  Nhóm Phan minh tuấn Phạm minh tuấn Nguyễn quốc tuấn Phan Cao xuân hùng Nguyễn thị nhật tiên Lớp : DHPT4 Sơ lược vitamin Vitamin, gọi sinh tố, yếu tố dinh dưỡng thiếu sinh vật, chất hữu có trọng lượng phân tử nhỏ, có cấu tạo hóa học khác nhau, có hoạt tính sinh học nhằm đảm bảo cho q trình chuyển hóa thể hoạt động bình thường, có ảnh hưởng lớn đến trao đổi chất sinh vật Phân loại vitamin Vitamin phân loại theo nhóm lớn sau: Nhóm 1: nhóm Vitamin hịa tan nước: Vitamin B, C, H, P, PP… Vitamin chủ yếu tham gia chức lượng (như phản ứng oxy hóa - khử, phân giải chất hữu cơ…) Nhóm 2: nhóm Vitamin hịa tan chất béo: A, D, E, F, K… Vitamin chủ yếu tham gia phản ứng xây dựng chất, xây dựng cấu trúc quan, mô nghĩa chức tạo hình  Nguồn gốc  Vitamin C có nhiều loại rau tươi nước cam, chanh, qt, có hàm lượng cao rau xanh, đặc biệt cải xanh, tiêu, khoai tây, cải brussel,rau cải, cà chua, xoong cam, quýt, chanh, bưởi …  Tính chất  Vitamin C kết tinh không màu vàng, dễ tan nước (300g/lít) Dung dịch nước 5% có pH=3 Có dùng dạng muối natri dễ tan nước (900g/lít) Vitamin C Hay cịn gọi acid ascobic Vitamin C chất chống oxy hố tốt, tham gia vào nhiều hoạt động sống trọng thể  Kìm hãm lão hố tế bào  Tăng cường khả chống nhiễm khuẩn  Chống lại chứng thiếu máu  Kích thích nhanh liền sẹo Các lợi ích Vitamin C  Vai trị Vitamin C - Vitamin C đóng vai trị quan trọng việc hình thành phục hồi collagen xương, sụn, dây chẳng mao mạch - Giúp thể hấp thu chất sắt - Giúp hệ miễn dịch chống lại nhiễm trùng, giúp bạch cầu chống lại tế bào lạ xâm nhập -Giống Vitamin E, Vitamin C chất chống oxy hóa, giúp thể chống lại phân tử bị oxy hóa , đóng vai trị quan trọng việc ngăn chặn bệnh đục nhân mắt (Các phân tử bị oxy hóa tạo nên màng mây mờ che thủy tinh thể mắt) - Vitamin C thành phần thiết yếu trình tạo nên collagen (collagen loại xi-măng tế bào), giúp chống lại nếp nhăn - Giúp thể chịu phản ứng chống lại bệnh hen suyễn cảm lạnh  Các nguyên nhân tác hại việc thiếu Vitamin C Có nhiều nguyên nhân làm thiếu Vitamin C, như: - Hút thuốc: điều thuốc đốt 25mg Vitamin C - Nghiện rượu - Ăn uống thiếu chất dinh dưỡng, đặc biệt người lớn tuổi - Ăn không đủ trái rau - Căng thẳng thần kinh: điều làm bạn cần dùng Vitamin C nhiều Các triệu chứng việc thiếu Vitamin C mệt mỏi, ăn khơng ngon miệng, đau nhức cơ, khó thở tập thể dục, buồn ngủ, khô da khả đề kháng thấp Thừa vitamin C -Vitamin C tích luỹ dùng liều cao lâu ngày, tạo sỏi oxalat (do dehydroascorbic chuyển thành acid oxalic), sỏi thận urat, có hai loại sỏi trên; lỏng, rối loạn tiêu hóa; giảm độ bền hồng cầu -Dùng vitamin C liều cao kéo dài thai phụ gây tăng nhu cầu bất thường vitamin C thai (vì vitamin C qua rau thai) dẫn đến bệnh scorbut sơm trẻ sơ sinh  Bạn có biết? Vitamin C vitamin dễ bị phân hủy, biến đổi gặp ánh sang, nhiệt độ cao, độ ẩm, môi trường nhiều axit nhiều kiềm Để giữ Vitamin C thực phẩm, đừng bảo quản thực phẩm lâu (đặc biệt bảo quản sáng); lột vỏ rửa trái cây, rau cần thiết; ăn chúng cịn tươi, khơng để chúng ngồi khơng khí; đừng nấu chúng lâu   Detector • UV-Vis: detector phổ hấp thu phân tử Xáv định chất có khả hấp thu quang Huỳnh quang (Fluorescence detector): xác định chất có khả phát huỳnh quang -Alflatoxin, Mycotoxin, Amino Acid, thuốc trừ sâuhọ Carbamate, … Đầu dò số khúc xạ(Refractive Index Detector: RI) Các trình tách sắc ký lỏng -Quá trình quan trọng phương pháp sắc ký -Những cân động xảy pha tĩnh pha động cột sắc ký -Là vận chuyển phân bố liên tục chất PT từ đầu cột đến cuối cột Chất phân tích ln phân bố pha,trong pha động chảy qua cột tách với tốc độ định gradient -Hiệu trình tách phụ thuộc nhiều vào tương tác chất phatĩnh pha động -Mục đích sắc ký là tách định tính chất hỗn hợp chất phức tạp -Thời gian chất PT bị pha tĩnh lưu giữ (thời gian lưu) định bởi: Bản chất pha tĩnh, cấu trúc tính chất chất PT Bản chất thành phần pha động dùng để rửa giải chất PT khỏi cột sắc ký(pha tĩnh) Ghi lại tồn q trình tách sắc ký hỗn hợp chất PT sắc ký đồ gồm nhiều peak -Đặc điểm peak PT: Các peak tách rời hoàn toàn Chập phần Chập hoàn toàn ĐỊNH LƯỢNG VITAMIN C BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG CAO ÁP (HPLC) Đối tượng áp dụng:  Phương pháp phân tích nhằm xác định hàm lượng Vitamin C có mẫu rau quả, trái cây, nước giải khát, đồ hộp, sữa sản phẩm từ sữa Nguyên tắc:  Vitamin C có sản phẩm trích hệ lỏng-lỏng với dung môi hữu (methanol, nước pH 2.1 chuẩn H2SO4) Sau đưa vào máy sắc ký lỏng cao áp (HPLC 1100 Hawlett Packard, đầu dò VWD, cột Hypersil BDS,3um C18), để định lượng Vitamin C có mẫu 3.Lấy mẫu xử lý mẫu:  Cần loại bỏ hạt vách cứng khoang chứa hạt trộn kĩ mẫu Vitamin C dễ bị oxi hóa khơng khí có diện ion kim loại (Fe, Cu) Vì chuẩn bị mẫu phải cắt nghiền dao không rỉ làm nhanh  Lọc tiến hành xác định với dung dịch lọc  Để sản phẩm tan giá bình kín dịch tan chảy vào sản phẩm trước nghiền trộn mẫu  Dung dịch chiết:dung dung dịch acid oxalic 2% dung dịch metaphotphoric/acid acetic chuẩn bị sau:hòa tan 15 g acid meta photphoric 40 ml acid acetic 200 ml mướ bình định mức dung tích 500 ml.Thêm nước vạch lọc qua giấy lọc cho vào chai thủy tinh.Dung dịch co thể bảo quản tủ lạnh từ đến 10 ngày  Tiến hành chiết:trộn phần mẫu thử với dung dịch chiết cho thể tích chiết(tính ml) gấp từ đến lần khối lượng mẫu(tính gam).Lọc dung dịch.loại bỏ vài ml dịch lọc ban đầu.Nồng độ dung dịch acid ascorbic mẫu thử phải khoảng 0.1 mg/l đến 1mg/l  TCVN 6427-2:1998 Dụng cụ thiết bị: Hệ thống sắc ký lỏng cao áp HPLC 1100, đầu dò VWD, cột Hypersil BDS, 3um,C18 Máy nghiền xay sinh tố Giấy lọc,phễu Bình tam giác 250ml Cân phân tích Kim bơm 20μl 5,Hóa chất:  Chuẩn vitamin C  Methanol  H20 khử ion lần  H2SO4  Acetonitrile 6.Trình tự thực hiện:  6,1,Chuẩn bị mẫu:  Cân xác 10 g chuẩn (±0.1 mg) cho vào bình định mức 10ml,hịa tan dung mơi methanol.Từ chuẩn 1000 ppm,ta pha thành chuẩn 100 ppm,50 ppm,10 ppm  Tiến hành phân tích HPLC :  Điều kiện phân tích  -         Cột sắc ký : cột pha đảo  -         Pha động: Hỗn hợp (methanol: acetonitrile)  -         Tốc độ dịng : 0.7ml/phút  -         Bước sóng cài đặt cho đầu dò : 254nm  Tiêm dung dịch mẫu thử nghiệm theo thứ tự :  -         Các dung dịch chuẩn Dựng đường chuẩn nồng độ vitamin C diện tích chuẩn Vitamin C Tính tốn hệ số tương quan hồi quy tuyến tính  -         Các dung dịch mẫu thử nghiệm Tính hàm lượng Vitamin C dịch chiết (Co) thông qua đường chuẩn xây dựng bước  Đảm bảo chất lượng :  Đường chuẩn phải có độ tuyến tính tốt, hệ số tương quang hồi quy tuyến tính (R2) phải lớn 99  Tính Kết Quả :  Hàm lượng Vitamin C (mg/kg) có mẫu ớt tính theo cơng thức sau  Trong :  -         C hàm lượng Vitamin C có mẫu, tính theo mg/kg  -         Co: Hàm lượng Vitamin C Có dịch chiết ( Co) thông qua đường chuẩn , mg/l  -         f: hệ số pha lỗng (nếu có)  -         m: khối lượng mẫu thứ(g) VD minh họa: Nồng độ vitamin C(ppm) Chiều cao peak 10 50 100 92.73183   485.0772   834.2644   Chiều cao peak mẫu 269.65417 Nồng độ vitamin C tính thao 28.78003 đường chuẩn(ppm):y = 8.1878x + 34.009 Hàm lượng vitamin C 142.46117 mẫu (ppm) tính theo công thức Tài liệu tham khao  www.tailieu.vn  www.congnghehoahoc.com  www.chem1.com  www.ebook.com  www.biotech.hcmuaf.edu.vn  TCVN 6427-2:1998 (trung tâm phân tích 3) ... metaphotphoric/acid acetic chuẩn bị sau:hòa tan 15 g acid meta photphoric 40 ml acid acetic 200 ml mướ bình định m? ?c dung tích 500 ml.Thêm nư? ?c vạch l? ?c qua giấy l? ?c cho vào chai thủy tinh.Dung dịch co thể... Tăng c? ?ờng khả chống nhiễm khuẩn  Chống lại chứng thiếu máu  Kích thích nhanh liền sẹo C? ?c lợi ích Vitamin C  Vai trị Vitamin C - Vitamin C đóng vai trị quan trọng vi? ?c hình thành ph? ?c hồi collagen... thể chịu phản ứng chống lại bệnh hen suyễn c? ??m lạnh  C? ?c nguyên nhân t? ?c hại vi? ?c thiếu Vitamin C Có nhiều nguyên nhân làm thiếu Vitamin C, như: - Hút thu? ?c: điều thu? ?c đốt 25mg Vitamin C -