Ảnh hưởng của phương pháp và điều kiện trích ly đến quá trình thu nhận dịch trích giàu hợp chất kháng Oxy của lá vối (Cleistocalyx Operculatus)

Nghiên cứu cho thấy hiệu suất trích ly và khả năng kháng oxy hóa của lá vối bằng phương pháp trích ly có hỗ trợ vi sóng hiệu quả hơn phương pháp trích ly bằng ngâm dầm. Tại công suất 560W trong 50 giây hiệu suất trích ly đạt 78,36%, khả năng bắt gốc tự do DPPH đạt 89,33% tương đương với nồng độ 139,35mgVit C/l.

Kỷ yếu hội thảo khoa học – Phân ban Công nghệ thực phẩm ẢNH HƯỞNG CỦA PHƯƠNG PHÁP VÀ ĐIỀU KIỆN TRÍCH LY ĐẾN Q TRÌNH THU NHẬN DỊCH TRÍCH GIÀU HỢP CHẤT KHÁNG OXY HÓA CỦA LÁ VỐI (CLEISTOCALYX OPERCULATUS) Mai Thị Ánh Nhi1,*, Nguyễn Thị Thu Huyền1 Trường Đại học Cơng nghiệp thực phẩm Thành phố Hồ Chí Minh * Email: nhimai.cntp@gmail.com Ngày nhận bài: 15/06/2017; Chấp nhận đăng: 02/07/2017 TĨM TẮT Lá vối có chứa nhiều hợp chất có khả kháng oxy hóa [1] Nghiên cứu tiến hành khảo sát ảnh hưởng phương pháp trích ly ngâm dầm trích ly có hỗ trợ vi sóng đến hiệu suất trích ly chất hịa tan khả kháng oxi hóa (khả bắt gốc tự DPPH) vối Thừa Thiên Huế Kết nghiên cứu cho thấy hiệu suất trích ly khả kháng oxy hóa vối phương pháp trích ly có hỗ trợ vi sóng hiệu phương pháp trích ly ngâm dầm Tại công suất 560W 50 giây hiệu suất trích ly đạt 78,36%, khả bắt gốc tự DPPH đạt 89,33% tương đương với nồng độ 139,35mgVit C/l Với kết thu được, vối nguyên liệu có triển vọng để sản xuất loại nước giải khát dạng thực phẩm chức Từ khóa: Lá vối, hiệu suất trích ly, kháng oxy hóa, vi sóng MỞ ĐẦU Cây vối (Cleistocalyx operculatus) loại phổ biến miền Bắc miền Trung nước ta Người dân ta thường sử dụng nụ vối để nấu trà uống Trong vối có chứa flavonoid, coumarin, tanin, acid hữu cơ, đường tự sterol, hàm lượng flavonoid tính theo chất chuẩn catechin đạt 20,728 – 30,331 mg/g [2] Hàm lượng polyphenol vối đạt 146,6 mg/g [1] Về tính dược lí nước sắc vối có tác dụng lợi mật, tác dụng độc tính tế bào mẫu chiết vối bước đầu cho thấy tinh dầu cao thô tồn phần có khả ức chế phát triển tế bào ung thư Tính kháng khuẩn vối, đặc biệt vối ủ có tác dụng tốt vi khuẩn E.coli, loại vi khuẩn thường gây bệnh đường ruột, hai vi khuẩn Gr (+) Gr (-) thường gặp bệnh viêm da [3] Flavonoid vối cịn có tác dụng bảo vệ hệ tim mạch, giảm nguy tử vong bệnh lý tim mạch thiếu máu tim, đau thắt ngực, nhồi máu tim, xơ vữa động mạch,…nhờ khả chống oxy hóa khơng hồn tồn cholesterol[ 2] Năm 2012, Hà Thị Bích Ngọc nghiên cứu dịch chiết vối có tác dụng hỗ trợ điều hòa lượng đường máu bệnh nhân bị đái tháo đường type [4] Hiện có nhiều 86 Mai Thị Ánh Nhi, Nguyễn Thị Thu Huyền nghiên cứu cho thấy, khả kháng oxy hóa tổng hàm lượng polyphenol thảo dược phụ thuộc lớn vào phương pháp điều kiện trích ly Nghiên cứu Dương Thị Phương Liên cộng năm 2014 cho thấy khả kháng oxy hóa đậu nành thay đổi theo thời gian, nhiệt độ trích ly [5] Đồng thời theo nghiên cứu Phạm Thành Quân cộng năm 2006 phương pháp trích ly ảnh hưởng đến hiệu suất trích ly polyphenol từ búp trà tươi [6] Trong nghiên cứu này, phương pháp điều kiện trích ly khảo sát để đánh giá ảnh hưởng phương pháp điều kiện trích ly đến q trình thu nhận dịch trích giàu hợp chất kháng oxy hóa vối xác định phương pháp điều kiện thích hợp để tiến hành trích ly nhằm giữ lại thành phần có hoạt tính sinh học cao VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu Lá vối mua huyện Phú Lộc, tỉnh Thừa Thiên Huế tiến hành rửa để đem sấy thức 700C để đạt độ ẩm 8,5% [7] Lá vối sau sấy xay đến kích thước 1-2mm bảo quản bao PE hút chân không sử dụng bảo quản 4-60C Hóa chất sử dụng cho nghiên cứu DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) (Sigma Aldrich USA), Methanol (cơng ty TNHH Bình Trí ) 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.1.1 Phương pháp trích ly Phương pháp trích ly ngâm dầm Tiến hành chuẩn mẫu gồm nguyên liệu: dung môi theo tỉ lệ 1:50 (g:ml) bình tam giác bao gói tránh ánh sáng Dung mơi sử dụng nước Sau đem mẫu trích ly bể ổn nhiệt 800C vịng 60 phút Dịch sau trích ly đem lọc thu dịch lọc Dịch trích ly dùng để xác định khả bắt gốc tự DPPH hiệu suất trích ly chất khơ hịa tan Phương pháp trích ly có hỗ trợ vi sóng Chuẩn bị mẫu gồm nguyên liệu: dung môi theo tỉ lệ 1:50 (g:ml) bình tam giác bao gói tránh ánh sáng Dung môi sử dụng nước Sau cho vào lị vi sóng cơng suất thời gian xác định Sau đem mẫu trích ly bể ổn nhiệt 800C 60 phút Dịch sau trích ly đem lọc thu dịch lọc Dịch trích ly dùng để xác định khả bắt gốc tự DPPH hiệu suất trích ly chất khơ hịa tan 2.1.2 Xác định hiệu suất trích ly Hàm lượng chất hịa tan xác định theo phương pháp Voronsov Chất hòa tan bao gồm tất hợp chất tan nước chiết xuất từ vối nước sôi Qua đó, ± 0,001g vối (độ ẩm 8,5%; kích thước: 1-2mm) cho vào bình tam giác có dung tích 250ml, cho vào 100ml nước cất sơi chiết cách thủy 30 phút Sau đó, dịch chiết lọc qua giấy lọc vào bình địch mức 250ml Lặp tương tự lần, lần 30ml nước cất 87 Ảnh hưởng phương pháp trích ly đến trính thu nhận dịch trích giàu hợp chấtkháng oxy hóa vối (Cleistocalyx operculatus) sôi Cuối cùng, tập trung dịch lọc định mức lên 250 ml Lấy 30ml dịch chiết cho vào cốc sứ 50ml (đã biết trước khối lượng), đun cách thủy cho bay sấy 1050C đến khối lượng không đổi Hàm lượng chất hịa tan tính theo cơng thức: X = ((m2 - m1)*V*100))/30*m (1) Trong đó: X: Hàm lượng chất khơ hịa tan (%) m1: khối lượng cốc sứ (g) m2: khối lượng cốc chất khơ hịa tan cân lần cuối (g) V: Thể tích dịch chiết vối từ g mẫu (250ml) m: khối lượng mẫu khô tuyệt đối (g) Mẫu sau sấy đem trích ly chất hịa tan phương pháp, điều kiện trích ly khác Sau phương pháp, điều kiện trích ly tiến hành lọc dịch trích đem kiểm tra hàm lượng chất khơ hịa tan dịch trích (X1) Hiệu suất trích ly (%) xác định theo công thức: 𝑋 𝑋 H= *100 (2) Trong đó: H : hiệu suất trích ly (%) X1: khối lượng chất hòa tan dịch chiết (g) X : khối lượng chất hòa tan nguyên liệu ban đầu (g) 2.2.3 Phương pháp xác định hoạt tính kháng oxy hóa Phương pháp DPPH [8] dùng để xác định hoạt tính kháng oxi hố điều chỉnh sau: Dung dịch gốc DPPH chuẩn bị cách hoà tan 24 mg DPPH 100 mL methanol bảo quản -200 C Dung dịch DPPH thí nghiệm chuẩn bị cách lấy 10 mL dung dịch gốc cho vào 45 mL methanol (để có độ hấp thụ 1,1 ± 0.02 đơn vị so màu bước sóng 517 nm) Sau lấy 150 µL dịch chiết vối 800C 60 phút cho vào 2850 L dung dịch DPPH để bóng tối 30 phút Tiến hành so màu 517 nm Kết biểu thị % kìm hãm DPPH theo công thức: AA = (ODcontrol - ODmẫu) *100/ ODcontrol (3) Trong đó: ODcontrol: Độ hấp thụ quang mẫu control ODmẫu: Độ hấp thụ quang mẫu cần xác định AA: % ức chế DPPH Thí nghiệm tiến hành lặp lại lần Hàm lượng kháng oxy hóa vối cịn tính tương đương mgVit C/l dựa vào phương trình đường chuẩn y = 0,5982x + 5,9712 (R2 = 0,9977) 88 Mai Thị Ánh Nhi, Nguyễn Thị Thu Huyền 2.2.4 Phương pháp xử lý số liệu Số liệu thí nghiệm đuợc phân tích thống kê phần mềm JMP 10 phần mềm Microsoft Excel Các số liệu biểu diễn giá trị trung bình lần lặp lại ± độ lệch chuẩn với mức ý nghĩa p