Nghiên cứu tần suất, đặc điểm lâm sàng và đột biến gen bệnh thalassemia ở trẻ dân tộc tày và dao tỉnh tuyên quang

i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Nếu sai tơi xin chịu hồn toàn trách nhiệm Tác giả Đỗ Thị Thu Giang ii LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận án này, tơi xin trân trọng cảm ơn: Ban Giám hiệu, Phòng đào tạo sau đại học, Bộ môn Nhi Trường Đại học Y Dược Thái Nguyên Ban Giám đốc, Phòng Kế hoạch tổng hợp, Khoa Nhi, Khoa Huyết học Truyền máu Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Ban Giám đốc, Phòng Kế hoạch tổng hợp, Trung tâm Thalassemia Viện Huyết học - Truyền máu Trung ương Ủy ban nhân dân tỉnh Tuyên Quang, Sở Y tế Tuyên Quang, Sở Khoa học Công nghệ Tuyên Quang, Ủy ban nhân dân Thành phố, Ủy ban nhân dân huyện thuộc tỉnh Tuyên Quang cho phép tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu Với tất lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn PGS.TS.Nguyễn Thành Trung TS.Trịnh Văn Hùng ln động viên, dìu dắt, giành nhiều thời gian quý báu trực tiếp hướng dẫn giúp đỡ bước trưởng thành đường nghiên cứu khoa học hoàn thành luận án Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới TS.Nguyễn Thị Xn Hương, chủ nhiệm Bộ mơn Nhi thầy cô giáo Bộ môn Nhi Trường Đại học Y - Dược, Đại học Thái Nguyên ủng hộ, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi, bảo đóng góp cho tơi ý kiến quý báo giúp xây dựng thực đề tài Tôi xin bày tỏ biết ơn tới GS.TS.Nguyễn Văn Sơn thầy cô Hội đồng chấm luận án cấp sở đóng góp ý kiến q báu cho tơi hồn thành luận án tốt Tôi biết ơn giúp đỡ vô tư, tận tình Khoa Nhi Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang, bạn bè, đồng nghiệp, người động viên, giúp đỡ sát cánh bên suốt trình học tập nghiên cứu Cuối tơi xin kính tặng Cha mẹ, chồng con, anh chị em gia đình thành đạt hơm nay, người bên tôi, dành cho điều kiện tốt giúp yên tâm học hành nghiên cứu Thái Nguyên, ngày tháng Đỗ Thị Thu Giang năm iii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Danh mục kỹ hiệu, chữ viết tắt v Danh mục bảng, biểu vii Danh mục biểu đồ, hình vẽ x Đặt vấn đề Chương Tổng quan tài liệu 1.1 Khái niệm lịch sử 1.2 Sơ lược hemoglobin phân loại bệnh lý huyết sắc tố 1.3 Đột biến gen bệnh thalassemia 12 1.4 Cơ chế bệnh sinh thalassemia 18 1.5 Triệu chứng lâm sàng 20 1.6 Đặc điểm dịch tễ thalassemia .22 1.7 Quy trình sàng lọc, chẩn đoán bệnh thalassemia cộng đồng 29 1.8 Sơ lược vài nét địa điểm nghiên cứu - tỉnh Tuyên Quang .36 Chương Đối tượng phương pháp nghiên cứu .38 2.1 Đối tượng nghiên cứu 39 2.2 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 40 2.3 Phương pháp nghiên cứu 40 2.4 Cỡ mẫu phương pháp chọn mẫu 42 2.5 Công cụ phương pháp thu thập số liệu: 50 2.6 Kỹ thuật xét nghiệm 52 2.7 Tiêu chuẩn chẩn đoán 53 2.8 Một số tiêu chuẩn chẩn đoán sử dụng nghiên cứu 57 2.9 Phương pháp xử lý số liệu 59 2.10 Kiểm soát yếu tố nhiễu .60 iv 2.11 Đạo đức nghiên cứu 60 Chương Kết nghiên cứu 61 3.1 Xác định tần suất mang genThalassemia trẻ em dân tộc Tày Dao toàn tỉnh Tuyên Quang .61 3.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia trẻ em dân tộc Tày, Dao điều trị khoa Nhi - Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang .72 Chương Bàn luận .94 4.1 Đặc điểm dịch tễ học bệnh Thalassemia dân tộc Tày, Dao Tuyên Quang .94 4.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh nhân Thalassemia .105 Kết luận 132 Thực trạng mang gen Thalssemia nhóm trẻ Tày, Dao tỉnh Tuyên Quang 132 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia bệnh viện đa khoa Tuyên Quang .132 Khuyến nghị 134 Tài liệu tham khảo Phụ lục Phụ lục Phiếu đồng ý tham gia nghiên cứu Phụ lục Phiếu thu thập thông tin bệnh án nghiên cứu Phụ lục Danh sách bệnh nhân cộng đồng tham gia nghiên cứu Phụ lục Danh sách bệnh nhân bệnh viện tham gia nghiên cứu Phụ lục Quy trình thu thập số liệu sàng lọc đột biến gen Phụ lục Phiếu vận chuyển mẫu máu bệnh nhân Thalassemia Phụ lục Một số hình ảnh trình thu thập số liệu v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt AND ARN Bp CD CS DCIP DHT DT-SHPT ĐBG 10 ĐHT 11 Hb (g/dL) 12 HCT (%) 13 HBB 14 HPLC 15 HST 16 M-ARMS-PCR Viết tắt 17 MCH (pg) 18 MCV (fL) 19 NGS 20 NST 21 PCR 22 RBC (SLHC) 23 RDW 24 VHHTMTW 25 Thal 26 TIF 27 WHO 28 Β 29 Γ 30 Δ 31 Ε vii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1.Cấu trúc globin thời kỳ xuất Hb sinh lý Bảng 1.2 Kiểu hình, kiểu gen bệnh beta thalassemia 10 Bảng 1.3 Một số đột biến vùng promoter khu vực châu Á 15 Bảng 1.4 Một số đột biến điểm nối khu vực châu Á 16 Bảng 1.5 Một số đột biến khu vực châu Á 16 Bảng 1.6 Một số đột biến codon khởi đầu khu vực châu Á 16 Bảng 1.7.Các đột biến vô nghĩa khu vực châu Á .17 Bảng 1.8 Các đột biến dịch khung phân bố khu vực châu Á 17 Bảng 1.9 Phân bố bệnh Hemoglobin Việt Nam 26 Bảng 1.10 Sự phân bố đột biến gen β-thalassemia số nghiên cứu khu vực miền Trung miền Nam Việt Nam 28 Bảng 1.11 Sự phân bố đột biến beta thalassemia số nghiên cứu khu vực miền Bắc Việt Nam 29 Bảng 1.12 Độ nhạy, độ đặc hiệu MCV, MCH sàng lọc thalassemia 30 Bảng 3.1 Đặc điểm chung nhóm nghiên cứu 61 Bảng 3.2 Trình độ học vấn nghề nghiệp bố/mẹ nhóm trẻ nghiên cứu cộng đồng 62 Bảng 3.3 Xếp loại kinh tế hộ gia đình 63 Bảng 3.4 Phân loại thiếu máu theo nhóm trẻ dân tộc Tày, Dao 64 Bảng 3.5 Sàng lọc dựa vào số MCV xét nghiệm tổng phân tích tế bào máu ngoại vi test DCIP 65 Bảng 3.6 Xét nghiệm chẩn đoán dựa thành phần huyết sắc tố 66 Bảng 3.7 Kết xét nghiệm sàng lọc Thalassemia 67 Bảng 3.8 Phân loại thể Thalassemia nhóm trẻ mang gen Thalassemia 67 viii Bảng 3.9 Đặc điểm số huyết học trẻ xác định Thalassemia 68 Bảng 3.10 Đặc điểm số thành phần huyết sắc tố 69 Bảng 3.11 Đặc điểm kiểu gen nhóm Thalassemia cộng đồng 69 Bảng 3.12 Đối chiếu kiểu gen với số huyết học 70 Bảng 3.13 Phân bố kiểu đột biến đơn alen trẻ mang gen αThalassemia 71 Bảng 3.14 Đặc điểm giới theo dân tộc nhóm trẻ điều trị Thalassemia bệnh viện 72 Bảng 3.15 Lý vào viện nhóm trẻ điều trị Thalassemia BV 73 Bảng 3.16 Đặc điểm khám triệu chứng trẻ vào viện 73 Bảng 3.17 Đặc điểm phát triển thể chất (Chiều cao cân nặng) 74 Bảng 3.18 Đặc điểm da niêm mạc xương bệnh nhân Thalassemia 75 Bảng 3.19 Triệu chứng lâm sàng gan, lách, tim mạch 76 Bảng 3.20 Phân loại mức độ thiếu máu dựa vào nồng độ Hemoglobin .77 Bảng 3.21 Đặc điểm số huyết học nhóm bệnh nhân Thalassemia 77 Bảng 3.22 Phân loại thành phần huyết sắc tố theo dân tộc Tày Dao 78 Bảng 3.23 Phân loại thể bệnh Thalassemia theo dân tộc Tày, Dao 79 Bảng 3.24 So sánh phân loại thể bệnh bệnh nhân Thalassemia điều trị Bệnh viện sàng lọc cộng đồng .79 Bảng 3.25 Đặc điểm phân loại thể bệnh Thalassemia đối chiếu 80 Bảng 3.26 Phân loại thể bệnh kiểu hình bệnh Thalassemia 81 Bảng 3.27 Đặc điểm sinh hố máu nhóm 151 trẻ theo dân tộc 82 Bảng 3.28 Phân loại bệnh Thalassemia 83 Bảng 3.29 Tần số đột biến đơn alleles 84 Bảng 3.30 Tần xuất allen đột biến với dân tộc 85 Bảng 3.31 Phân bố kiểu hình, kiểu tổ hợp gen đột biến 86 STT Code 492 271 493 353 494 213 495 233 496 182 497 236 498 244 499 324 500 339 501 133 502 136 503 228 504 316 505 291 Tuyên Quang, ngày Xác nhận Giám đốc BVĐK tỉnh Tuyên Quang Xác nhận Khoa Huyết học - Truyền máu Phạm Quang Thanh Lưu Duy Đàn thán năm g Người lập danh sách Đỗ Thị Thu Giang Phụ lục DANH SÁCH BỆNH NHÂN TẠI BỆNH VIỆN THAM GIA NGHIÊN CỨU STT Mã BN 15149254 15010814 15141274 17005485 14142306 9006961 14143353 14169927 9075548 10 16005632 11 14116398 12 12127744 13 14123329 14 11016981 15 9011709 16 10040853 17 9002218 18 9062836 19 15000628 20 16025846 21 13005838 22 16153897 23 13064786 24 12110775 25 13056188 26 11008476 27 14000219 STT Mã BN 28 14268930 29 13009227 30 16018135 31 13025600 32 12100536 33 14153307 34 17775525 35 12004511 36 12007642 37 16059279 38 9046073 39 15173336 40 12086872 41 12073268 42 17017827 43 14140097 44 17045730 45 15153431 46 14128566 47 16046876 48 13064823 49 11068819 50 9005163 51 9003128 52 16027911 53 16056683 54 14147343 55 17015819 56 9007067 57 12116858 STT Mã BN 58 9079782 59 10014450 60 9046073 61 17075209 62 17006374 63 17009005 64 16047430 65 17001753 66 13050424 67 16034615 68 9003046 69 9050046 70 11017303 71 16032560 72 10011573 73 13009636 74 16043968 75 13004467 76 13057863 77 13171184 78 12081664 79 9006675 80 13170896 81 9000353 82 11044350 83 15153751 84 9014573 85 13003120 86 9003456 87 17019810 STT Mã BN 88 16019164 89 15118491 90 10010188 91 9010136 92 10073775 93 16009497 94 13026470 95 16004521 96 17019005 97 13035788 98 15132410 99 17017639 100 16060399 101 14127910 102 9026943 103 14010608 104 9003786 105 14126625 106 12094915 107 17020050 108 9012122 109 15142731 110 16011394 111 15158910 112 15167366 113 17022576 114 9011715 115 14123731 116 13053696 117 15230858 STT Mã BN 118 11032398 119 16817766 120 15122412 121 17017835 122 12098233 123 11070447 124 9000259 125 16017230 126 13011913 127 12074898 128 14165691 129 10030690 130 14003413 131 1100280 132 11029672 133 9013833 134 10018523 135 12074521 136 15151335 137 9066720 138 10039681 139 9085911 140 12097564 141 11027575 142 15151020 143 9016744 144 9000881 145 9001554 146 15144621 147 14160371 STT Mã BN 148 9069750 149 17074450 150 15004330 151 15145504 Tuyên Quang, ngày Xác nhận Giám đốc BVĐK tỉnh Tuyên Quang Xác nhận Khoa Huyết học - Truyền máu Phạm Quang Thanh Lưu Duy Đàn thán năm g Người lập danh sách Đỗ Thị Thu Giang Phụ lục QUY TRÌNH THU THẬP SỐ LIỆU SÀNG LỌC ĐỘT BIẾN GEN Phụ lục PHIẾU VẬN CHUYỂN MẪU MÁU BỆNH NHÂN THALASSEMIA Họ tên bệnh nhân: Mã số: Tuổi: Nam/Nữ Khoa : Buồng: Chẩn đoán: Thời điểm lấy/gửi bệnh phẩm : phút Thời điểm nhận bệnh phẩm : phút Ngày tháng năm …… Người nhận Người gửi Phụ lục MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH THU THẬP SỐ LIỆU Lấy mẫu xã Sinh Long - huyện Na Hang Lấy mẫu xã Yên Thuận - huyện Hàm Yên Lấy máu xã Hùng Đức - huyện Hàm Yên Lấy máu xã Lăng Can - huyện Lâm Bình Lấy mẫu máu xã Thượng Lâm - huyện Lâm Bình Làm xét nghiệm Cơng thức máu, DCIP test khoa Huyết học - Truyền máu Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Bệnh nhân Thalassemia điều trị thường xuyên Khoa Nhi Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Bệnh nhân Thalassemia điều trị thường xuyên Khoa Nhi Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Tập huấn cho cán chẩn đoán Thalassemia Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Kỷ niệm ngày Thalassemia Thế giới tập huấn cho người nhà bệnh người nhà người bệnh ... Thalassemia trẻ em dân tộc Tày Dao tỉnh Tuyên Quang? ?? Với mục tiêu: Xác định tần suất mang gen Thalassemia trẻ dân tộc Tày Dao tỉnh Tuyên Quang Mô tả đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia. .. loại đột biến gen bệnh Thalassemia cộng đồng dân tộc thiểu số nói chung trẻ em dân tộc Tày, Dao nói riêng Tuyên Quang tiến hành đề tài: ? ?Nghiên cứu tần suất, đặc điểm lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia. .. mang genThalassemia trẻ em dân tộc Tày Dao toàn tỉnh Tuyên Quang .61 3.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia trẻ em dân tộc Tày, Dao điều trị khoa Nhi - Bệnh