THÔNG TIN TÀI LIỆU
ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận án này, xin trân trọng cảm ơn: - Ban Giám hiệu, Phịng đào tạo sau đại học, Bộ mơn Nhi Trường Đại học Y Dược Thái Nguyên - Ban Giám đốc, Phòng Kế hoạch tổng hợp, Khoa Nhi, Khoa Huyết học - Truyền máu Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang - Ban Giám đốc, Phòng Kế hoạch tổng hợp, Trung tâm Thalassemia Viện Huyết học - Truyền máu Trung ương - Ủy ban nhân dân tỉnh Tuyên Quang, Sở Y tế Tuyên Quang, Sở Khoa học Công nghệ Tuyên Quang, Ủy ban nhân dân Thành phố, Ủy ban nhân dân huyện thuộc tỉnh Tuyên Quang cho phép tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ trình học tập nghiên cứu Với tất lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, tơi xin chân thành cảm ơn PGS.TS.Nguyễn Thành Trung TS.Trịnh Văn Hùng ln động viên, dìu dắt, giành nhiều thời gian quý báu trực tiếp hướng dẫn giúp đỡ bước trưởng thành đường nghiên cứu khoa học hồn thành luận án Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới TS.Nguyễn Thị Xuân Hương, chủ nhiệm Bộ môn Nhi thầy cô giáo Bộ môn Nhi Trường Đại học Y - Dược, Đại học Thái Nguyên ủng hộ, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi, bảo đóng góp cho tơi ý kiến q báo giúp xây dựng thực đề tài Tôi xin bày tỏ biết ơn tới GS.TS.Nguyễn Văn Sơn thầy cô Hội đồng chấm luận án cấp sở đóng góp ý kiến quý báu cho tơi hồn thành luận án tốt Tơi ln biết ơn giúp đỡ vơ tư, tận tình Khoa Nhi Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang, bạn bè, đồng nghiệp, người động viên, giúp đỡ sát cánh bên tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Cuối tơi xin kính tặng Cha mẹ, chồng con, anh chị em gia đình thành đạt hôm nay, người bên tôi, dành cho điều kiện tốt giúp yên tâm học hành nghiên cứu Thái Nguyên, ngày tháng Đỗ Thị Thu Giang năm iii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Danh mục kỹ hiệu, chữ viết tắt v Danh mục bảng, biểu vii Danh mục biểu đồ, hình vẽ x Đặt vấn đề Chương Tổng quan tài liệu 1.1 Khái niệm lịch sử 1.2 Sơ lược hemoglobin phân loại bệnh lý huyết sắc tố 1.3 Đột biến gen bệnh thalassemia 12 1.4 Cơ chế bệnh sinh thalassemia 18 1.5 Triệu chứng lâm sàng 20 1.6 Đặc điểm dịch tễ thalassemia 22 1.7 Quy trình sàng lọc, chẩn đoán bệnh thalassemia cộng đồng 29 1.8 Sơ lược vài nét địa điểm nghiên cứu - tỉnh Tuyên Quang 36 Chương Đối tượng phương pháp nghiên cứu 38 2.1 Đối tượng nghiên cứu 39 2.2 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 40 2.3 Phương pháp nghiên cứu 40 2.4 Cỡ mẫu phương pháp chọn mẫu 42 2.5 Công cụ phương pháp thu thập số liệu: 50 2.6 Kỹ thuật xét nghiệm 52 2.7 Tiêu chuẩn chẩn đoán 53 2.8 Một số tiêu chuẩn chẩn đoán sử dụng nghiên cứu 57 2.9 Phương pháp xử lý số liệu 59 2.10 Kiểm soát yếu tố nhiễu 60 iv 2.11 Đạo đức nghiên cứu 60 Chương Kết nghiên cứu 61 3.1 Xác định tần suất mang genThalassemia trẻ em dân tộc Tày Dao toàn tỉnh Tuyên Quang 61 3.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia trẻ em dân tộc Tày, Dao điều trị khoa Nhi - Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang 72 Chương Bàn luận 94 4.1 Đặc điểm dịch tễ học bệnh Thalassemia dân tộc Tày, Dao Tuyên Quang 94 4.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh nhân Thalassemia 105 Kết luận 132 Thực trạng mang gen Thalssemia nhóm trẻ Tày, Dao tỉnh Tuyên Quang 132 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia bệnh viện đa khoa Tuyên Quang 132 Khuyến nghị 134 Tài liệu tham khảo Phụ lục Phụ lục Phiếu đồng ý tham gia nghiên cứu Phụ lục Phiếu thu thập thông tin bệnh án nghiên cứu Phụ lục Danh sách bệnh nhân cộng đồng tham gia nghiên cứu Phụ lục Danh sách bệnh nhân bệnh viện tham gia nghiên cứu Phụ lục Quy trình thu thập số liệu sàng lọc đột biến gen Phụ lục Phiếu vận chuyển mẫu máu bệnh nhân Thalassemia Phụ lục Một số hình ảnh trình thu thập số liệu ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh tan máu bẩm sinh (Thalassemia) thuộc nhóm bệnh lý di truyền đơn gen, tính trạng lặn, bệnh di truyền phổ biến toàn giới bệnh huyết sắc tố di truyền giảm hẳn tổng hợp loại chuỗi globin phân tử hemoglobin ảnh hưởng đến trưởng thành đời sống hồng cầu gây thiếu máu tán huyết mạn tính lúc nhỏ tuổi Thalassemia phân bố khắp giới khu vực châu Á Theo ước tính WHO (2008) hàng năm có khoảng 300.000 trẻ đẻ bị thể nặng Thalassemia Bệnh thalassemia có đặc điểm tỷ lệ lưu hành cao nhóm dân tộc thiểu số, dao động khoảng - 63%, dân tộc Kinh chiếm từ 5,6 - 7% [9] Tại Việt Nam phân bố kiểu gen có có khác biệt tuỳ theo vùng địa lý theo nhóm dân tộc Với nhiều nhóm dân tộc nằm trải dài từ Bắc đến Nam với nhiều phong tục tập quán khác dân tộc Sự dịch chuyển dân số vùng miền Do vậy, số liệu tần xuất mang gen kiểu gen gây bệnh vùng miền với nhóm dân tộc thiểu số khác có ý nghĩa xây dựng chiến lược dự phòng thalassemia [26] Thalassemia bệnh di truyền theo quy luật gen lặn nhiễm sắc thể 11 16 thường Sự biểu tình trạng bệnh phụ thuộc vào kiểu gen mức độ đột biến mà nhận từ bố, mẹ Bệnh thể nặng có biểu thiếu máu nặng, gan lách to, giảm khả học tập, lao động tuổi thọ ngắn Bệnh nhân gánh nặng cho gia đình xã hội, ngồi việc phải bỏ cơng chăm sóc khơng có thời gian lao động chi phí cho việc chữa trị từ năm sang năm khác khơng nhỏ, Việt Nam lên đến vài chục triệu/ năm, nhiều gia đình rơi vào cảnh khó khăn [5] Sự đa dạng đột biến, phong phú bệnh cảnh lâm sàng đặt vấn đề lớn chương trình phịng chống Để giảm tỷ lệ sinh đứa trẻ bị bệnh đẩy lùi nguồn gen bệnh khỏi cộng đồng, công nghệ sinh học phân tử trở thành cơng cụ, vũ khí thiết yếu Có nhiều kỹ thuật xác định đột biến gen giải trình tự gen, realtime PCR, multiplex ARMS-PCR, MLPA,…đang bước áp dụng rộng rãi làm tăng khả chẩn đoán xác đột biến gen đặc biệt đột biến gen β-globin, nhiên chưa phổ biến triển khai rộng rãi nhiều nơi Hiện việc thường xuyên truyền máu định kỳ thải sắt [33] Có nhiều phương pháp điều trị đại áp dụng chưa mang lại kết triệt để chưa có biện pháp phòng bệnh áp dụng rộng rãi, hàng năm thấy nhiều trẻ bị bệnh thể nặng sinh ra, hầu hết đứa trẻ không điều trị đầy đủ với biểu triệu chứng thiếu máu nặng (ít trì mức độ thiếu máu vừa) [9] Tuyên Quang tỉnh miền núi có 23 dân tộc dân tộc Tày, Dao đông thứ sau dân tộc Kinh Với đặc thù tỉnh miền núi nhiều dân tộc thiểu số, trình độ dân trí nhiều vùng cịn thấp, dân tộc thường sống quần thể biệt lập, di cư di chuyển dân số đặc biệt huyện vùng sâu, vùng xa chưa có biến động, điều kiện kinh tế cịn hạn chế Đó điều kiện thuận lợi cho bệnh huyết sắc tố di truyền Thalassemia phổ biến lan rộng cộng đồng Những năm gần khoa Nhi - Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang tỷ lệ trẻ em đến khám phát điều trị truyền máu định kỳ Thalassemia thể nặng ngày tăng phân bố hầu hết huyện tỉnh đặc biệt huyện có tỷ lệ người Tày người Dao Hàm Yên, Chiêm Hóa Na Hang… Đã có nhiều nghiên cứu thực trạng thiếu máu bệnh Thalassemia trẻ em, chưa có cơng trình nghiên cứu cách hệ thống tần suất mắc Thalassemia trẻ em dân tộc Tày, Dao cộng đồng, biểu lâm sàng cận lâm sàng đột biến gen Thalassemia trẻ em dân tộc Tày, Dao điều trị truyền máu định kỳ khoa Nhi - Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Vì vậy, để xác định tần suất mắc bệnh thalassemia cộng đồng, làm giảm nguy lan truyền, tìm hiểu loại đột biến gen bệnh Thalassemia cộng đồng dân tộc thiểu số nói chung trẻ em dân tộc Tày, Dao nói riêng Tuyên Quang tiến hành đề tài: “Nghiên cứu tần suất, đặc điểm lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia trẻ em dân tộc Tày Dao tỉnh Tuyên Quang” Với mục tiêu: Xác định tần suất mang gen Thalassemia trẻ dân tộc Tày Dao tỉnh Tuyên Quang Mô tả đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia trẻ em dân tộc Tày, Dao tỉnh Tuyên Quang Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Khái niệm lịch sử 1.1.1 Khái niệm Thalassemia (còn biết với tên “Bệnh thiếu máu vùng biển” hay “bệnh thiếu máu Cooley”) dùng để mơ tả nhóm bệnh lý thiếu máu tan máu hồng cầu nhỏ bẩm sinh, có đặc tính di truyền, rối loạn tổng hợp globulin cấu thành phân tử hemoglobin [114] Thalassemia bệnh thiếu máu tan máu di truyền, giảm hẳn tổng hợp loại chuỗi globin, tuỳ theo thiếu hụt tổng hợp chuỗi alpha (α) globin hay beta (β) globin, mà có tên gọi alpha thalassemia hay beta thalassemia [47] 1.1.2 Lịch sử bệnh beta thalassemia Thalassemia phát tương đối sớm, năm 1925 Lee Cooley mô tả trẻ biểu thiếu máu, kèm theo có lách to, gan to Hai năm sau (1927), Cooley phát thêm trường hợp khác triệu chứng trên, thấy da bị nhiễm sắc tố, xương sọ dày lên, có biến đổi sức bền hồng cầu Sau này, bệnh có biểu lâm sàng gọi “bệnh thiếu máu Cooley” Năm 1936, Whippe Bradford phát nhiều bệnh nhân thiếu máu vùng Địa Trung Hải có biểu lâm sàng giống “bệnh thiếu máu Cooley” đặt tên cho loại thiếu máu Thalassemia (tiếng Hy Lạp có nghĩa “thiếu máu vùng biển”) [114] Năm 1940, Wintrobe cộng cho thiếu máu Cooley beta thalassemia thể nặng, đồng hợp tử, biểu mà Cooley mô tả biểu hiện tượng thiếu máu mạn tính, nhiễm sắt biến dạng xương [42] Để chứng minh có tượng tan máu, từ năm 1950, Hamilton dùng phương pháp đánh dấu hồng cầu Cr51 xác định đời sống hồng cầu bệnh nhân Thalassemia thể nặng bị rút ngắn, thời gian bán hủy hồng cầu - ngày Năm 1968, Angelovoy A cộng sự, nghiên cứu đời sống hồng cầu trẻ em thiếu máu Cooley thu kết tương tự Thời gian sống hồng cầu rút ngắn 1/3 so với thời gian sống hồng cầu bình thường Qua thực nghiệm với nhiều nghiên cứu xác định hồng cầu β-thalassemia bị vỡ sớm khuyết tật bên hồng cầu [56] 1.2 Sơ lược hemoglobin phân loại bệnh lý huyết sắc tố 1.2.1 Sơ lược hemoglobin Hemoglobin (Hb) protein phức hợp, tạo thành chuỗi peptit gồm chuỗi α chuỗi β (hoặc tương tự β-like), đảm nhiệm nhiều chức sinh học quan trọng: vận chuyển O2 CO2 Hemoglobin có nhóm ngoại lai Hem, protein Globin, ngồi cịn có phân tử 2,3-DPG Mỗi nhân Hem có chứa phân tử Fe2+ Globin thành phần protein phân tử hemoglobin, định đặc tính loại hemoglobin 2,3-DPG tạo q trình thối hóa glucose, làm giảm lực Hb với O2 [107] Trong trình phát triển cá thể người, loại chuỗi polypeptide có chuyển đổi, loại chuỗi thay chuỗi giai đoạn sống Phân tích cấu trúc loại Hb khác người, tác giả chia chuỗi polypeptide thành loại sau: Chuỗi alpha (α), chuỗi beta (β), chuỗi gamma (γ), chuỗi delta (δ), chuỗi epsilon (ε), chuỗi zeta (δ) Ở người bình thường có loại Hb tìm thấy hồng cầu thời kỳ phôi thai, thai nhi trưởng thành Sự tổng hợp chuỗi Globin thay đổi theo giai đoạn phát triển, loại chuỗi giai đoạn sau thay cho loại chuỗi giai đoạn trước Các chuỗi globin xuất trình phát triển cá thể sau cặp đôi với tạo thành loại Hb sau: Bảng 1.1.Cấu trúc globin thời kỳ xuất Hb sinh lý Hb sinh lý Hb Gower Hb Gower Hb Portland HbF HbA1 HbA2 Như vậy, sau sinh loại hemoglobin bình thường HbA1, HbA2 HbF Thành phần loại hemoglobin có tỷ lệ giới hạn định theo lứa tuổi, thay đổi tỷ lệ trở thành bệnh lý Sau sinh tỷ lệ thành phần hemoglobin thay đổi nhanh, thời kỳ thai nhi, hemoglobin chủ yếu HbF Khi sinh, HbF có tỷ lệ cao, chiếm 60-80% lượng Hb, HbA1 có 20-40% lượng Hb, HbA2 0,03-0,6% Sau thời kỳ sơ sinh, lượng HbF giảm nhanh, từ lúc tuổi đến lúc trưởng thành HbF 2% Bình thường, hồng cầu người trưởng thành chứa khoảng 9698% HbA1; 0,5 - 3,5% HbA2 0,1 - 0,5% HbF [44] 1.2.2 Phân loại thalassemia bệnh huyết sắc tố bất thường Thalassemia bệnh đơn lẻ mà nhóm rối loạn, bệnh xuất phát từ bất thường di truyền việc sản xuất globin STT Code 492 271 493 353 494 213 495 233 496 182 497 236 498 244 499 324 500 339 501 133 502 136 503 228 504 316 505 291 Tuyên Quang, ngày Xác nhận Giám đốc BVĐK tỉnh Tuyên Quang Xác nhận Khoa Huyết học - Truyền máu Phạm Quang Thanh Lưu Duy Đàn thán năm g Người lập danh sách Đỗ Thị Thu Giang Phụ lục DANH SÁCH BỆNH NHÂN TẠI BỆNH VIỆN THAM GIA NGHIÊN CỨU STT Mã BN 15149254 15010814 15141274 17005485 14142306 9006961 14143353 14169927 9075548 10 16005632 11 14116398 12 12127744 13 14123329 14 11016981 15 9011709 16 10040853 17 9002218 18 9062836 19 15000628 20 16025846 21 13005838 22 16153897 23 13064786 24 12110775 25 13056188 26 11008476 27 14000219 STT Mã BN 28 14268930 29 13009227 30 16018135 31 13025600 32 12100536 33 14153307 34 17775525 35 12004511 36 12007642 37 16059279 38 9046073 39 15173336 40 12086872 41 12073268 42 17017827 43 14140097 44 17045730 45 15153431 46 14128566 47 16046876 48 13064823 49 11068819 50 9005163 51 9003128 52 16027911 53 16056683 54 14147343 55 17015819 56 9007067 57 12116858 STT Mã BN 58 9079782 59 10014450 60 9046073 61 17075209 62 17006374 63 17009005 64 16047430 65 17001753 66 13050424 67 16034615 68 9003046 69 9050046 70 11017303 71 16032560 72 10011573 73 13009636 74 16043968 75 13004467 76 13057863 77 13171184 78 12081664 79 9006675 80 13170896 81 9000353 82 11044350 83 15153751 84 9014573 85 13003120 86 9003456 87 17019810 STT Mã BN 88 16019164 89 15118491 90 10010188 91 9010136 92 10073775 93 16009497 94 13026470 95 16004521 96 17019005 97 13035788 98 15132410 99 17017639 100 16060399 101 14127910 102 9026943 103 14010608 104 9003786 105 14126625 106 12094915 107 17020050 108 9012122 109 15142731 110 16011394 111 15158910 112 15167366 113 17022576 114 9011715 115 14123731 116 13053696 117 15230858 STT Mã BN 118 11032398 119 16817766 120 15122412 121 17017835 122 12098233 123 11070447 124 9000259 125 16017230 126 13011913 127 12074898 128 14165691 129 10030690 130 14003413 131 1100280 132 11029672 133 9013833 134 10018523 135 12074521 136 15151335 137 9066720 138 10039681 139 9085911 140 12097564 141 11027575 142 15151020 143 9016744 144 9000881 145 9001554 146 15144621 147 14160371 STT Mã BN 148 9069750 149 17074450 150 15004330 151 15145504 Tuyên Quang, ngày Xác nhận Giám đốc BVĐK tỉnh Tuyên Quang Xác nhận Khoa Huyết học - Truyền máu Phạm Quang Thanh Lưu Duy Đàn thán năm g Người lập danh sách Đỗ Thị Thu Giang Phụ lục QUY TRÌNH THU THẬP SỐ LIỆU SÀNG LỌC ĐỘT BIẾN GEN Phụ lục PHIẾU VẬN CHUYỂN MẪU MÁU BỆNH NHÂN THALASSEMIA Họ tên bệnh nhân: Mã số: Tuổi: Nam/Nữ Khoa : Buồng: Chẩn đoán: Thời điểm lấy/gửi bệnh phẩm : phút Thời điểm nhận bệnh phẩm : phút Ngày tháng năm …… Người nhận Người gửi Phụ lục MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH THU THẬP SỐ LIỆU Lấy mẫu xã Sinh Long - huyện Na Hang Lấy mẫu xã Yên Thuận - huyện Hàm Yên Lấy máu xã Hùng Đức - huyện Hàm Yên Lấy máu xã Lăng Can - huyện Lâm Bình Lấy mẫu máu xã Thượng Lâm - huyện Lâm Bình Làm xét nghiệm Công thức máu, DCIP test khoa Huyết học - Truyền máu Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Bệnh nhân Thalassemia điều trị thường xuyên Khoa Nhi Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Bệnh nhân Thalassemia điều trị thường xuyên Khoa Nhi Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Tập huấn cho cán chẩn đoán Thalassemia Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang Kỷ niệm ngày Thalassemia Thế giới tập huấn cho người nhà bệnh người nhà người bệnh ... Thalassemia trẻ em dân tộc Tày Dao tỉnh Tuyên Quang? ?? Với mục tiêu: Xác định tần suất mang gen Thalassemia trẻ dân tộc Tày Dao tỉnh Tuyên Quang Mô tả đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia. .. loại đột biến gen bệnh Thalassemia cộng đồng dân tộc thiểu số nói chung trẻ em dân tộc Tày, Dao nói riêng Tuyên Quang tiến hành đề tài: ? ?Nghiên cứu tần suất, đặc điểm lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia. .. Xác định tần suất mang genThalassemia trẻ em dân tộc Tày Dao toàn tỉnh Tuyên Quang 61 3.2 Đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng đột biến gen bệnh Thalassemia trẻ em dân tộc Tày, Dao điều
Ngày đăng: 15/01/2022, 06:37
Xem thêm: