PCR mutagenesis

... and P4. PCR mutagenesis 153 5' 3' PCR 1A PCR 1B Amplify target regions Denature template and anneal primers. P2 and P3 have identical tails encoding sequence E to be inserted PCR 2 5' ... the efficiency of inverse PCR by including a DpnI digestion step after the ligation step. PCR mutagenesis 139 Anneal primers in a back-to-back arrangement and perform PCR to r...

Ngày tải lên: 25/10/2013, 22:20

... vector (Promega, Madison, WI, USA). PCR mutagenesis Random mutagenesis of the XI gene (xylA) was performed under conditions described previously [21] using the PCR primers 5¢-TGATC AATGTACGAGCCCAAACC-3¢ ... of 100 lL. PCR was performed in a Thermal Cycler (PerkinElmer 2400) for nine cycles: 30 s at 94 °C, 30 s at 50 °Cand45sat68°C. The PCR products were then puri®ed using H igh Pu...

Ngày tải lên: 31/03/2014, 15:20

... kỹ thuật PCR khác: Một số kỹ thuật phát triển trên cơ sở của kỹ thuật PCR có ý nghĩa quan trọng cho định danh và định typ vi sinh vật là nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR (sao chép ... nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR (sao chép ngược) và asymmetric PCR (PCR một chiều). PCR lồng là phản ứng PCR bao bồm hai phản ứng đồng thời, phản ứng đầu ở vòn...

Ngày tải lên: 18/08/2012, 23:37

... kỹ thuật PCR khác: Một số kỹ thuật phát triển trên cơ sở của kỹ thuật PCR có ý nghĩa quan trọng cho định danh và định typ vi sinh vật là nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR (sao chép ... nested PCR (PCR lồng), revert transtriptase PCR (sao chép ngược) và asymmetric PCR (PCR một chiều). PCR lồng là phản ứng PCR bao bồm hai phản ứng đồng thời, phản ứng đầu ở vòn...

Ngày tải lên: 15/09/2012, 15:49

... Introduction to PCR 11.1 Introduction: PCR, a ‘DNA photocopier’ 11.2 PCR involves DNA synthesis 11.3 PCR is controlled by heating and cooling 31.4 PCR applications and gene cloning 51.5 History of PCR 6Chapter ... 6Chapter 2 Understanding PCR 92.1 How does PCR work? 92.2 PCR: a molecular perspective 112.3 The kinetics of PCR 152.4 Getting started 182.5 Post -PCR analysis 18...

Ngày tải lên: 08/10/2012, 15:00

... miễn dịch.1.4 Phương pháp Real-time PCR1 .4.1. Kỹ thuật PCR1 .4.1.1. Định nghĩaPCR là tên gọi tắt của phản ứng chuỗi polymedase (Polymedase Chain Reaction = PCR) để nhân các bản của đoạn DNA trong ... thuật Real-time PCR1 .4.2.1. Nguyên lýReal-time PCR là PCR tại thời điểm thực, nghĩa là quá trình khuếch đại DNA đang diển ra theo từng chu kỳ nhiệt được theo dõi trực tiếp. Real-time P...

Ngày tải lên: 29/10/2012, 13:26

... chính xác cao được thực hiện trong máy chu kỳ nhiệt (máy PCR) . Kỹ thuật PCR được Karry Mullis phát minh 1985 Khỏi nim Các yêu cầu cần thiết cho PCR 2 mồi (primer) tổng hợp oligonucleotide ( mỗi mồi ... loài sinh vật tồn tại cách đây hàng chục triệu n m. PCR for Cloning PCR for Medical Diagnostics Diagnosis of Sickle-Cell Anemia (hång cÇu liÒm) by PCR ... thành 2 đơn (94 0C, 30 giâ...

Ngày tải lên: 29/10/2012, 14:02

... 10 o C 4. Sản phẩm PCR ít Giảm nhiệt độ ủ bắt cặp đến mức có thể Gia tăng lƣợng mồi Gia tăng lƣợng DNA khuôn Gia tăng lƣợng Taq polymerase 2.4.2.9 Ứng dụng của PCR PCR có nhiều ứng dụng ... DNA của kỹ thuật RFLP ngƣời ta đƣa ra kỹ thuật PCR – RFLP. PCR – RFLP là kỹ thuật dựa trên cơ sở khuyếch đại có chọn lọc một đoạn DNA bằng kỹ thuật PCR trƣớc. Sau đó tiến hành phân c...

Ngày tải lên: 29/10/2012, 14:13

... chất PCR PCR buffer 1 X MgCl 2 1,5 mM Taq polymerase tùy phản ứng dNTP 200 μM / mỗi loại H 2 O cất 2 lần, khử ion, vô trùng, chiếu tia UV 15 phút, pH 6,8 – 7,0 - Hoá chất điện di sản phẩm PCR + ... tính ba giống bò dựa trên qui trình PCR tìm được. (4) So sánh hai mức độ làm khô DNA từ mẫu cơ trong quá trình thu hồi DNA lên phản ứng PCR. (5) So sánh hiệu quả PCR khi tiến hành tr...

Ngày tải lên: 29/10/2012, 14:13

... RT - PCR để phát hiện virus gây hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn”. 1 Phần IV. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1. Kết quả RT - PCR trên mẫu RNA chuẩn của PRRSV 4.1.1. RT -PCR với ... sau này. 4.2 Kết quả RT - PCR trên mẫu RNA ly trích 4.2.1 RT -PCR với Taq Beat trên RNA ly trích từ huyết thanh bằng TRIzol Sau khi xây dựng được quy trình RT -PCR trên mẫu chuẩn vớ...

Ngày tải lên: 29/10/2012, 14:23