Luân văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E coly DH5α part 1 pdf

... 2 .1 Hiện tƣợng biến nạp ở vi khuẩn 2 .1. 1 Hiện tƣợng biến nạp Biến nạp là hiện tƣợng tiếp nhận DNA từ bên ngoài vào tế bào vi khuẩn. Hiện tƣợng biến nạp đƣợc chứng minh lần đầu tiên trên vi khuẩn ... khi nồng độ ComK thấp. 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E. coly 2.3 .1 Khái niệm sự biến nạp nhân tạo. Biến nạp nhân tạo là v...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... primer của đoạn DNA đó, kiểm tra mẫu số 9 với cặp primer T3, T7. DCB 2.1B 1. 5B 1. 2B 1. 5B 1. 4B 2.1H 1. 5H 1. 2H 1. 5H 1. 4H DCH 55 Hình 4 .19 Sản phẩm tách chiết plasmid mẫu biến nạp đoạn DNA ... theo quy trình 3.3.7 Hình 4 .18 Sản phẩm tách chiết plasmid mẫu biến nạp đoạn DNA 629bp. (1. 1), (1. 2), (1. 3), (1. 4), (1. 5), (1. 6) sản phẩm tách...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... Các loại enzym dùng trong thí nghiệm 25 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 26 3.3 .1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm ... tƣợng biến nạp 4 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E. coly 5 2.3 .1 Khái niệm sự biến nạp nhân tạo. 5 2.3.2 Sự điều hoà gen...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... 14 .http://www.fermentas.com/catalog/kits/kittransformaid.html 5. 15 .http://www.kings.edu/Biology/lux/bacterial.html 6. 16 .http://fruitfly4.aecom.edu/labmanual/27.html 7. 17 .http://core.eai.edu/biol/foruvellm/farwelebpage/Biotech 310 0/pvector.200.pfd ... Sambrook J, E. F. Fritsch, T. Maniatis, 19 89, Molecular cloning A laboratory manual, second edition, CSH. 5. Wolgang Schuman...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... genome DNA plasmid 3.0kb 43 4.2 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 4.2 .1 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 60µg/ ml Hình 4.3 Kết quả cấy vi khuẩn biến ... lạc thu được khi biến nạp ở tỉ lệ 10 :1 ; Mẫu số 11 , 12 , 13 , 14 , 15 : sản phẩm tách chiết plasmid từ khuẩn lạc thu được khi biến nạp...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... 3μl elution buffer. 3.3 .11 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5α khả nạp (theo quy trình của Sambrook và cộng sự, 19 89 có chỉnh sửa) Thực hiện biến nạp theo quy trình sau Hút 10 µl ... sau: Nồng độ ATP thấp (0.5mM), (Ferretti và Sgaramella 19 81) , nồng độ enzym lygase cao (50unit/ml), lƣợng DNA insert và vector cao, tỉ lệ về số mol của...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm tra Sơ đồ 3.3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α ... lại quy trình trên nhƣng không cho DNA plasmid vào khả nạp để làm đối chứng. Quy trình 2 Hút 10 µl dịch huyền phù tế bào competen...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... đƣợc xúc tác bởi hai loại enzym là E. coly DNA lygase hay T4 DNA lygase. 2.5.3 .1 E. coly DNA lygase Enzym đƣợc ly trích từ E. coly xúc tác nối hai đoạn DNA có đầu sole 5’ ACGG + TAATCGCCA 3’ ... Chủng vi khuẩn đã đột biến, có những thiếu hụt dùng để biến nạp và nhân nhanh số lƣợng bản sao plasmid hoặc cosmid. Kiểu gen : supE44 ∆lacU169(Ф80lacZ∆M15)...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... Sơ đồ 3.3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm tra. Vi khuẩn Ecoly DH5α Khả nạp + CaCl 2 Plasmid Bluescript II SK (+/-) Vi khuẩn mang plasmid Bluescript Sốc ... khi biến nạp ở tỉ lệ 30 :3 ; Mẫu số 6, 7, 8, 9, 10 : sản phẩm tách chiết plasmid từ khuẩn lạc thu được khi biến nạp ở tỉ lệ 10 :1 ; Mẫu số 1...

Ngày tải lên: 16/11/2012, 16:15

... 4 .1 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Hình 4 .1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn ở thể tích 1 0 :1 .5 (A) Biến nạp ... nạp 3:0 .5, và dịch biến nạp không pha loãng khi trang lên đĩa) và chọn lọc thể biến nạp theo quy trình 3 (ở thể tích biến nạp là 1...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 02:21