Hộp Điện Trong Công Nghệ DNA part 32 ppsx

... phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp sẽ giúp sinh viên tiếp cận thêm một lĩnh vực khác của công nghệ sinh học thông ... truyền hay kỹ thuật gen) là một bộ phận quan trọng và là công nghệ chìa khóa (key technology) của lĩnh vực công nghệ sinh học. Công nghệ DNA tái tổ hợp được ra...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... con người. Công nghệ này có ứng dụng rộng rãi trong y học, dược học, nông nghiệp và nhiều ngành công nghiệp khác. Công nghệ sinh học (biotechnology). Theo nghĩa rộng là các quá trình công nghiệp ... thực vật (công nghệ sinh học truyền thống). Theo nghĩa phổ biến hiện nay đó là những quá trình sản xuất sử dụng các giống sinh vật mới, được tạo ra bởi công nghệ DNA tái...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... chiết DNA từ những sinh vật khác nhau; 2) Cắt và nối DNA ở những điểm đặc hiệu để tạo ra DNA tái tổ hợp (DNA mang các gen có nguồn gốc khác nhau), ví dụ: DNA plasmid có mang gen của người; 3) ... DNA (DNA ligase). Enzyme dùng để nối các phân tử DNA với nhau bằng cách tạo ra mối liên kết phosphodiester giữa nhóm 5’-phosphate và nhóm 3 -hydroxyl trong quá trình tái bản ho...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... phosphoryl hóa với một trong những hydroxyl của pentose. Phân tử đóng vai trò cấu trúc cơ sở của DNA và RNA, gồm ba phần: đường pentose (ribose trong RNA, deoxyribose trong DNA) , nitrogen base ... protein. Nấm men Saccharomyces cerevisiae. Là một vi sinh vật nhân thật được sử dụng nhiều trong công nghệ DNA tái t hp. Genome ca nm men S. cerevisiae khong 1,35ì10 7 base...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... protein trên các đoạn DNA, dựa vào độ di chuyển chậm của chúng so với DNA không bị protein bám trong các thí nghiệm điện di trên gel. Trình tự dẫn đầu (leader sequence). Một trong ba phần chủ yếu ... khuôn mẫu DNA sợi đơn với primer (mồi) để tổng hợp nên một sợi DNA bổ sung bằng cách sử dụng các dNTP có trong môi trường để kéo dài primer nhờ sự xúc tác của enzyme Taq DNA...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... đó DNA không bị cắt, những DNA của phage không có gắn gốc methyl sẽ bị cắt bởi RE. Trong kỹ thuật gen, enzyme methyl hóa được gọi là methylase enzyme. Methylase được dùng để bảo vệ đoạn DNA ... tiên trong vi khuẩn (first identified order in bacterium). Giá trị của enzyme hạn chế là ở tính đặc hiệu của chúng. Các enzyme này cắt DNA ở các vị trí nhận biết riêng biệt bao gồm từ 4...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... sâu trong một thời gian ngắn để dùng thì phải đặt trên đá tuyết (ice bath). II. Các enzyme trùng hợp 1. DNA polymerase (DNA- dependent DNA polymerase) DNA polymerase được dùng để tổng hợp DNA ... ứng cắt DNA bằng RE - Ứng dụng chính + Đánh dấu đoạn DNA để làm mẫu dò bằng dịch chuyển điểm đứt. + Khởi đầu cho sự tổng hợp sợi thứ hai trong tạo dòng cDNA. + Xác định...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... của DNA khuôn mẫu và ion Mg 2+ , thì Tth pol lại xúc tác phản ứng khuếch đại DNA. Enzyme này cho phép khuếch đại khuôn mẫu là RNA thông qua sự hình thành cDNA. 2. RNA polymerase (DNA- dependent ... hợp DNA theo chiều 5’ 3’. Cơ chất của nó là RNA hay DNA (sợi đơn hoặc sợi đôi): - Hoạt tính RNase H. Bao gồm hai hoạt tính exoribonuclease 5’ 3’ và 3’5’ phân hủy các DNA hoặ...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... Phân tích phức hợp protein :DNA (DNase footprinting). + Loại bỏ DNA trong các phân đoạn RNA hay protein. 2. Nuclease S1 (Aspergillus oryzae) Enzyme nuclease S1 cắt DNA sợi đơn hoặc RNA để tạo ... của DNA để phân tích trình tự bằng phương pháp Maxam và Gilbert ( 197 7), dùng làm mẫu dò trong các kỹ thuật lai phân tử (xem chương 5). + Phosphoryl hóa các đoạn nối (linker) và...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... của hệ điện di trong một điện trường có điện thế và cường độ thích hợp. Kỹ thuật này đơn giản và thực hiện nhanh. Hơn nữa, vị trí của DNA trong gel được xác định trực tiếp: các băng DNA trong ... số điện di DNA bằng agarose gel Hình 2.3 minh họa sự dịch chuyển của tập hợp các đoạn DNA trong hai mẫu ở ba nồng độ khác nhau của agarose, tất cả chúng ở trong một k...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... genomic DNA. Các giai đoạn trong xây dựng thư viện DNA trong vector bacteriophage l . a, b, c và d trình bày sự khác nhau (nhưng chồng lên nhau) của các đoạn DNA trong genome, được hợp nhất trong ... chứa các đoạn genomic DNA tạo thành thư viện genomic DNA. Mỗi đoạn DNA chứa trong vector của thư viện được gọi là một dòng (clone). Tùy thuộc vào kích thước của các đoạn...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... hiệu suất tổng hợp cDNA hoàn chỉnh. Nếu số lượng khuôn mẫu nhiều thì hiệu suất của sản phẩm phiên mã cDNA sẽ tăng lên cùng với việc tăng số lượng enzyme reverse transcriptase. Trong nghiên cứu, ... 90-99% rRNA và tRNA, trong đó rRNA chiếm khoảng 80-85% và tRNA chiếm khoảng 15-20%. Các RNA này có kích thước và trình tự xác định và có thể được tách riêng dễ dàng bằng điện di hoặc ly...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... trình tự nucleic acid của cDNA được tạo dòng. VII. Xây dựng thư viện cDNA trong bacteriophage  vector Sử dụng thư viện cDNA có hai ưu điểm sau: - Các dòng cDNA chứa trình tự mã hóa liên ... và như vậy trong các tế bào này mRNA của protein đó sẽ có tỷ lệ cao và thư viện cDNA được tạo ra từ các tế bào này sẽ có nhiều cDNA mã hóa cho các protein tương ứng. Sự dồi dào cDNA của một...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20

... hướng cDNA vào trong các vị trí SalI và NotI. Tổng hợp sợi thứ nhất và thứ hai của cDNA bằng phương pháp primer-linker cho phép cDNA sợi đôi được cắt bằng SalI và NotI và gắn trực tiếp trong ... hướng với promoter lacZ của E. coli. Đoạn cDNA dài 10 kb có thể được gắn vào trong các vị trí này và biểu hiện hoặc trong vi khuẩn được xâm nhiễm hoặc trong các thể tiềm tan được cảm ứng,...

Ngày tải lên: 08/07/2014, 14:20