ngô chuyển gen EPSPS trong điều kiện nhà lƣới
Các cây chuyển gen tái sinh đƣợc chuyển ra đất trồng, khi đạt 5 – 6 lá chúng tôi tiến hành đánh giá khả năng kháng thuốc diệt cỏ glyphosate. Dựa trên kết quả sàng lọc cây chuyển gen bằng phƣơng pháp hóa sinh, chúng tôi đã tiến hành phun thuốc glyphosate ở nồng độ 200 mg/l lên các cây chuyển gen và cây đối chứng. Tiến hành phun 3 lần, mỗi lần phun cách nhau 2 ngày. Kết quả đƣợc thể hiện trên bảng 3.8
Bảng 3.8. Đánh giá khả năng kháng thuốc diệt cỏ của các dòng chuyển gen Dòng ngô thế hệ T0 Tổng số cây phun Số cây có mặt protein Số cây sống sót sau 3 lần phun CM8 28 4 3 VH1 19 3 2 CH9 18 3 3 Đối chứng (CM8) 5 0 0 Đối chứng (VH1) 5 0 0 Đối chứng (CH9) 5 0 0
Kết quả thu đƣợc cho thấy có sự khác biệt rõ rệt giữa các dòng đối chứng (không chuyển gen) và các dòng ngô chuyển gen EPSPS kháng thuốc trừ cỏ. Các cây đối chứng (cây không chuyển gen) ngay sau lần phun đầu tiên đã xuất hiện hiện tƣợng vàng lá, sau đó cây tiếp tục bị héo rồi chết. Trong khi đó, các dòng chuyển gen sau 3 lần phun có 8 cây (2 cây thuộc dòng VH1, 3 cây dòng CH9, 3 cây dòng CM8) có khả năng kháng rõ rệt nhất, sống sót và sinh trƣởng sau 3 lần phun thuốc Vifosate với nồng độ của glyphosate là 200 mg/l (Hình 3.11). Kết quả đánh giá khả năng kháng thuốc trừ cỏ của các dòng ngô chuyển gen cho thấy, hầu hết các cây có kết quả dƣơng tính với protein đều có khả năng kháng lại thuốc trừ cỏ. Các cây có mặt protein EPSPS, nhƣng không có khả năng kháng lại thuốc trừ cỏ có thể hàm lƣợng protein EPSPS trong cây đó thấp, không đủ đáp ứng lại thuốc diệt cỏ glyphosate. Nhƣ vậy có thể kết luận rằng gen EPSPS đã đƣợc chuyển vào hệ gen và bƣớc đầu biểu hiện hoạt tính của gen chuyển ở cây ngô.
Hình 3.12. Các cây ngô sau 7 ngày phun Vifosat nồng độ 2%