Nghiên cứu về hóa học

- Định tính các nhóm chất hữu cơ bằng phản ứng hóa học: Các phản ứng hóa học đƣợc tiến hành theo nguyên tắc chiết xuất và định tính các hợp chất hữu cơ có trong dƣợc liệu bằng phản ứng hóa học [2], [3].

- Định tính bằng sắc kí lớp mỏng

Bản mỏng GF254 đã hoạt hóa ở 110^oC trong 1h. Dịch chấm sắc kí đƣợc chiết bằng dung môi MeOH.

Hệ dung môi khảo sát: (1). CHCl3- EtOAc-HCOOH [4 : 8 : 1,5]. (2). EtOAc-HCOOH-H₂O [10 : 1,5 : 1].

Phƣơng pháp phát hiện: Quan sát dƣới ánh sáng thƣờng, UV 254, UV 365, hiện màu bằng hơi ammoniac dƣới ánh sáng thƣờng [48].

- Chiết xuất và tinh chế mangiferin từ lá xoài

Chiết xuất: Sử dụng phƣơng pháp chiết hồi lƣu với dung môi EtOH 70^o. Tinh chế: Loại tạp nhiều lần bằng n-hexan và chloroform, sau đó sử dụng phƣơng pháp kết tinh trong EtOH.

- Nhận dạng chất phân lập: đƣợc dựa trên tính chất hóa lý và phổ ¹H- NMR và phổ ¹³C-NMR.

- Khảo sát hàm lượng mangiferin trong lá xoài bằng phương pháp HPLC

Tiến hành: Cân chính xác khoảng 1,00g bột lá xoài đã xác định độ ẩm cho

vào bình chiết hồi lƣu 2h với 20ml ethanol 90^o, lọc nóng thu dịch chiết lần 1. Thêm tiếp 20ml EtOH 90^o, tiếp tục chiết hồi lƣu trong 2h, lọc nóng, thu dịch chiết lần 2. Tiến hành tƣơng tự chiết lần thứ 3. Gộp dịch chiết 3 lần vào bình định mức 100ml bổ sung bằng dung môi chiết xuất cho đủ thể tích (dung dịch 1). Sau đó lấy 1ml dịch chiết cho vào bình định mức dung tích 50ml bổ sung bằng dung mối chiết xuất cho đủ thể tích (dung dịch 2). Lấy 1ml dung dịch 2 cho vào bình định mức dung tích 10ml, thêm pha động đến vạch (dung dịch 3). Dung dịch 3 đƣợc phân tích bằng HPLC.

Điều kiện sắc kí: Cột BDS Hypersil C18 (250x4,6mm; 5µm); Pha động:

Acetonitril - Dung dịch CH3COOH 3% (14:86); Lƣu lƣợng dòng 1,0ml/phút; Bộ phân phát hiện: Detector UV- VIS. Bƣớc sóng: 257nm. Thể tích tiêm mẫu 20µl.

Phương pháp xử lí số liệu: Số liệu thu đƣợc đƣợc xử lý bằng phần mềm

Microsoft Ofice Excel 2007:

Dựng đƣờng chuẩn mangiferin. Tính hàm lƣợng mangiferin:

Nồng độ mangiferin (C) trong dịch chiết đƣợc tính theo đƣờng chuẩn mangifeirn

Lƣợng Mangiferin /1ml dung dịch 1: mmangiferin

= C . h

.h

= 500.C

Với: h₂: độ pha loãng từ dung dịch 1 thành dung dịch 2

h3: độ pha loãng từ dung dịch 2 thành dung dịch 3. Hàm lƣợng Mangiferin đƣợc tính theo công thức:

.100.10

.100

.(1 )

Mangiferin Dl

m

m HA

M _Dl:khối lƣợng dƣợc liệu (g). HA: hàm ẩm của dƣợc liệu

Chƣơng 3: KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM

Một phần của tài liệu NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY RÁNG SEO GÀ NỬA LÔNG CHIM (PTERIS SEMIPINNATA L ) HỌ CỎ LUỒNG (PTERIDACEAE) (Trang 29 -29 )