Theo phương pháp của Hillmann-Elies, Griesbeck, Axel G. và cộng sự [6, 7]
được sơđồ phản ứng như sau:
Đun hồi lưu, t0 (150-1600C), 12h
Hình 3.7. Sơ đồ tổng hợp N-phthaloyl-L-tyrosin
Tiến hành: Chuẩn bị dụng cụ bao gồm: một bình cầu 2 cổ 250ml có nút mài, một pipet chia vạch 10ml, quả bóp, máy khuấy từ có gia nhiệt, một con khuấy từ, một nhiệt kế, cân kỹ thuật và hệ thống sinh hàn thích hợp. Cố định bình cầu chứa con khuấy từ và hệ thống sinh hàn lên giá đỡ. Đầu tiên, cân 5,0g anhydrid phthalic (34mmol) và 6,1g tyrosin (34mmol), cho vào bình cầu 2 cổ và them 25ml acid acetic đặc (440mmol), lắp bình cầu với hệ thống sinh hàn thich hợp. Tiến hành đun hồi lưu trong 12 giờ.
Theo dõi tiến triển phản ứng bằng sắc ký lớp mỏng với hệ dung môi là n-buthanol: acid acetic: nước (9:2:2,5) và hiện màu bằng đèn tử ngoại ở bước sóng 254nm. Dưới đây là hinh ảnh SKLM minh họa (với N1 và N2 là nguyên liệu ban đầu và sh2 là hỗn hợp phản ứng):
Hình 3.8. Hình ảnh theo dõi phản ứng bằng SKLM của phản ứng tạo chất III
Xử lý hỗn hợp phản ứng: Sau khi phản ứng kết thúc, bình cầu được để nguội về
nhiệt độ phòng, lọc lấy dịch, để trong tủ lạnh qua đêm, sau đó tiến hành lọc lấy tủa bằng phễu Buchner có nối sẵn với bộ phận hút chân không, sau đó hòa tan trong cồn 960C để kết tinh lại và them 5,0ml nước cất và để trong tủ lạnh 2h, lọc lấy tủa và rửa tủa bằng nước cất với thể tích vừa đủ. Sấy khô dưới đèn hồng ngoại và đem cân.
Kết quả:
- Thu được 9g sản phẩm. - Cảm quan : Bột màu trắng.
- Độ tan: Không tan trong nước và dichloromethan, tan trong ethanol 960 và aceton.
- Nhiệt độ nóng chảy: 1610C- 1640C. - Hiệu suất: 85,71 %.
- Độ tinh khiết: Kiểm tra bằng SKLM với hệ dung môi khai triển là n-buthanol: acid acetic: nước (9: 2: 2,5) thì cho một vết gọn, rõ, Rf = 0,89.