Sử dụng máy đo phân bố KTTP và thế zeta Zetasizer Nano ZS90. Mẫu NTN được pha loãng 100 lần trước khi đo, nhiệt độ đo 25oC.
2.3.4. Phương pháp định lượng dược chất
Dược chất có trong mẫu NTN AD được định lượng bằng phương pháp sắc kí lỏng hiệu năng cao – HPLC với detector mảng diod (DAD).
Điều kiện
Pha tĩnh: Cột C8 kích thước 150 mm × 4,6 mm (Octyl silica gel; 5 µm). Pha động: hỗn hợp MeOH và dung dịch đệm phosphat pH 2,5 với tỷ lệ
75/25, lọc qua màng cellulose acetat 0,45 µm, rồi siêu âm 15 phút. Tốc độ dòng pha động: 1 mL/phút.
Thể tích tiêm mẫu: 20 µL.
Detector UV bước sóng: 276 nm. Mẫu chuẩn
Cân chính xác một lượng DC khoảng 25 mg, hòa tan hoàn toàn bằng methanol trong bình định mức 25 mL, bổ sung thể tích vừa đủ, thu được dung dịch gốc nồng
độ 1 mg/mL. Tiếp tục pha loãng dung dịch gốc 20 lần bằng pha động để thu được mẫu chuẩn có nồng độ khoảng 50 µg/mL, lọc qua màng lọc 0,45 µm.
Mẫu thử
Định lượng DC có trong mẫu NTN: pha loãng mẫu NTN 20 lần (làm tương tự mẫu chuẩn) bằng pha động, lọc qua màng lọc 0,45 µm.
Công thức tính
Nồng độ DC trong mẫu thử được tính theo công thức sau:
= . 25
Phần trăm DC có trong mẫu NTN được tính theo công thức:
= .100
Trong đó: H: phần trăm DC chứa trong mẫu NTN (%)
C0: Nồng độ lý thuyết của DC trong NTN bào chế (mg/mL). Ct: Nồng độ DC trong mẫu thử (mg/mL).
mc: Khối lượng DC cân ban đầu để pha mẫu chuẩn (mg) St: Diện tích pic chính của mẫu thử (mAU.giây)
Sc: Diện tích pic của mẫu chuẩn (mAU.giây).
2.3.5. Đánh giá sinh khả dụng