PHẦN 6: TÀI LIỆU THAM KHẢO PHẦN I: Tài liệu tiếng Việt
TỔNG QUAN TÀI LIỆU 4 2.1 Nhiên liệu sinh học
2.1. Nhiên liệu sinh học...4 2.1.1. Cồn sinh họcơ [17]...4 2.1.1. Lịch sử hình thành cồn sinh học...4 2.1.1.1. Lịch sử...4 2.1.1.2. Sản xuất công nghiệp...5 2.1.1.3 Sản xuất trong sinh học...5 2.2.1. Tình hình sử dụng nhiên liệu sinh học trên thế giới.[19]...7 2.2.2. Sản xuất nhiên liệu sinh học ở Việt Nam...9 2.2.3. Các loài cõy nụng, lâm nghiệp cung cấp nguyên liệu sản xuất nhiên liệu sinh học. ...10 2.3.1. Nấm men [1] [10]...11 2.3.1.1 Cấu tạo tế bào...12 2.3.1.2. Sinh sản...14 2.3.2. Nấm mốc [1]...16 2.3.2.1. Nguồn nguyên liệu...17 2.3.2.1.1. Lá cây...17 2.3.2.1.1.1 Một số mẫu lá...17 PHẦN 3...21 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU...21 3.1. Đối tượng và phạm vi nghiên cứu...21 3.1.1. Đối tượng nghiên cứu...21 3.1.2. Phạm vi nghiên cứu...21 3.1.3.1. Hóa chất và môi trường...21 3.1.3.2. Môi trường...21 3.1.4. Thiết bị :...22 3.2. Phương pháp nghiên cứu...23 3.2.1. Phương pháp phân lập nấm men và thuần khiết...23 3.2.2. Bảo quản và giữ giống...25 3.2.2.1 Bảo quản trên thạch đứng...25 3.2.2.2. Bảo quản trong dung dịch 30% glixerin...25 3.3.1. Phương pháp xác định hình thái...26 3.3.2. Đếm số lượng tế bào nấm men trong dịch nuôi cấy dùng buụụng đờờ́m hồng cầu...27 3.3.3. Xác định năng lực lên men của các chủng giống nấm men trờn ụờ́ng dunham...27 3.3.4. Xác định khả năng phát triển của nấm men...28 3.3.5. Xác định khả năng sống của nấm men...28 3.3.6. Xác định hàm lượng cồn bằng dụng cụ cất cồn...28 3.3.7. Quan sát khuẩn ty giả...29 3.3.8. Quan sát bào tử bắn, túi...29 3.3.9. Xác định nồng độ cồn theo phương pháp chưng cất...30 3.3.9.1. Xác định nồng độ chất khô bằng Chiết quang kế [9]...30 3.3.9.2. Đo hàm lượng đường sót trong giấm chín (phương pháp Graxianop)...30 PHẦN 4...32 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN...32 4.1. Kết quả phân lập...32 4.2. Định danh sơ bộ...33
4.74.1.Tối ưu điều kiện sinh trưởng và phát triển chủng Saccharomyces cerevisiae LC7...38 4.74.1.1Khả năng sử dụng nguồn carbon (đường glucose)...38 4.47.1..2Khhỏt triển là 3%.visiae ối thích cho...41 4.7.1.4.3Ảnh hưởng của nhiệt độ...43 4.5 8 Xác định đường cong sinh trưởng của chủng Saccharomyces cerevisiae LC7...47 PHẦN 5...50 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ...50 5.1. K1. LUẬN...50 5.2. Đ2. g c...50 PHẦN 6: TÀI LIỆU THAM KHẢO...51
Hình 2. Nấm men...16 Hình 3: Nấm mốc...17 Hình 4. Cõy kinh giới núi...18 Hình 5. Cõy cam thảo đất...19 Hình 6. Cõy hồi...20 Bảng 1. Môi trường phân lập và giữ giống nấm men < hansen >...21 Bảng 2: Môi trường giữ giống nấm men: Môi trường này có nồng độ chất khô là : 6.5Bx và pH = 5,6...22 Bảng 3. Thành phần của 1 lit môi trường cao nấm men – pepton – glucose...22 Hinh 3.1 Thử khả năng lên men đường các chủng nấm men...27 Bảng 4.1. Đặc điểm hình thái khuẩn lạc sau 3 ngày nuôi cấy...32 Hình 4.1 Khuẩn lạc trên đĩa peptri...33 Bảng 4.2. Kết quả quan sát khuẩn ty giả...34 Hình 4.2 Nấm men và bào tử...34 Hình 4.3 Ống dunham cao 5cm...35 Bảng 4.3. Kết quả thử khả năng lên men Glucose...36 Bảng 4.4. Kết quả thử khả năng lên men đường saccarozơ...36 Bảng 4.5. Kết quả xác định hàm lượng cồn trong dịch giấm chín...38 Bảng 4.6. Ảnh hưởng của nồng độ đường tới sự phát triển của nấm men...38 Hình 4.4. Ảnh hưởng của nồng độ đường tới sự phát triển của nấm men...39 Kết luận: Nồng độ đường tối thích cho chủng Saccharomyces cerevisiae LC7 phát triển là 3%...39 Bảng 4.7. Ảnh hưởng của hàm lượng pepton tới sự phát triển của nấm men...41 Hình 4.5. Ảnh hưởng của hàm lượng pepton đếnsự phát triển của lớp men...42 Kết luận: hàm lượng Pepton thích hợp nhất cho chủng Saccharomyces cerevisiae LC7 phát triển 10g/l môi trường...42 Bảng 4.8. Ảnh hưởng của nhiệt độ tới sự phát triển của nấm men...44 ...45 Hình 4.6. Ảnh hưởng của nhiệt độ tới sự phát triển của lớp men...45 Kết luận: Ngưỡng nhiệt phù hợp nhất đối với sự phát triển của chủng Saccharomyces cerevisiae LC7 là 320C...45 Hình 4.7 Ảnh hưởng của pH đến sự phát triển của nấm men...46 Kết luận: Dải pH tối thích cho chủng Saccharomyces cerevisiae LC7 là 5,5...46 Bảng 4.10. giá trị OD khảo sát mật độ chủng nấm men...47 Saccharomyces cerevisiae CBLC8...47 Hình 4.8 Đồ thị khảo sát đường cong sinh trưởng của chủng nầm men Saccharomyces cerevisiae LC7...48
thi nghiem toi uu glucose