VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng và phạm vi nghiên cứu
3.3.1.Phương pháp xác định hình thá
Quan sát chủng giống qua khuẩn lạc:
Lấy chủng đã thuần khiết nuôi ở trong môi trường Hansen thạch đứng pha loãng đến 10-4,10-5,10-6. Từ các độ pha loãng này dùng pipet vô trùng lấy chính xác 0,1 ml dịch nhỏ vào đĩa peptri có chứa môi trường phân lập. Dùng que gạt thuỷ tinh cụ trựng gạt đều dịch chứa vi sinh vật trên khắp mặt đĩa, mỗi độ pha loãng cấy từ 3 đến 4 đĩa. Đặt ngược các đĩa thạch đã cấy vào tủ ấm 30oC. Sau 48 h nuôi cấy quan sát hình thái khuẩn lạc và miêu tả chúng.
Quan sát chủng giống qua kính hiển vi:
Làm tiêu bản sống: Dùng que cấy vô trùng lấy tế bào vi sinh vật từ ống giống dàn đều trong một giọt nước cất vô trùng đã nhỏ sẵn trên một phiến kính. Đặt một mộp lỏ kớnh sỏt với mép của giọt canh trường, sau đó nghiờng lỏ kớnh một góc 600 và từ từ hạ xuống sao cho giọt canh trường bị ép giữa lỏ kớnh và phiến kính. Quan sát tiêu bản dưới kính hiển vi quang học có độ phóng đại 400 lần.
Chuẩn bị phiến kính và lá kính
Lấy micropipet hút dịch nấm men
Hơ trên ngọn lửa đèn cồn rồi để nguội
Chuẩn bị mẫu nấm men ở môi trường lỏng
Nhỏ một giọt dịch nấm mên lên trên phiến kính
Chụp ảnh sau khi quan sát thấy tế bào nấm men
Quan sát dưới kính hiển vi với độ phóng đại 40X
Ép lá kính lên giọt dịch sao cho không có bọt khí
3.3.2. Đếm số lượng tế bào nấm men trong dịch nuôi cấy dùng buụụngđờờ́m hồng cầu. đờờ́m hồng cầu.
Dùng que cấy vô trùng lấy tế bào vi sinh vật từ ống giống dàn đều trong một giọt nước cất vô trùng đã nhỏ sẵn trên buồng đếm. Đặt một mộp lỏ kớnh sỏt với mép của giọt canh trường, sau đó nghiờng lỏ kớnh một góc 600 và từ từ hạ xuống sao cho giọt canh trường bị ép giữa lỏ kớnh và buồng đếm. Quan sát tiêu bản dưới kính hiển vi quang học có độ phóng đại 400 lần.