1. Tổng quan:
MPLC là buớc chuẩn bị cho HPLC. MPLC với áp suất và tỉ suất dòng chảy cao hơn, cho phép sử dụng cột C18 với kích thuớc hạt giảm để cho kết quả gần với hệ thống chuẩn bị HPLC.
2. So sánh ưu nhược điểm giữa MPLC và HPLC
2.1. Chuyển đổi dung môi:
HPLC: chỉ dùng đuợc cấu hình để chạy sắc ký pha đảo và pha thuờng
MPLC: có tính linh hoạt và dễ chuyển đổi hệ thống dung môi giữa pha đảo và pha thường
2.2. Cột nạp mẫu rắn
MPLC: cho phép sử dụng nhiều kỷ thuật nạp mẫu. Thuận lợi chính của MPLC về cơ chế tiêm mẫu là sự phục hồi mẫu cao. Hợp chất đuợc dễ dàng chuyển lên cột trong suốt thời gian nạp mẫu.
Có nhiều thuận lợi về tiêm mẫu lỏng. Nó giúp sử dụng tốt nhất khả năng tự động của hệ thống. Người sử dụng chỉ cần ấn nút Start và đi làm việc khác.
Hệ thống cân bằng cột, nạp cột, tái cân bằng cột mà không cần can thiệp khác.
Ngoài ra MPLC cho phép hợp chẩt tan giới hạn trong trong pha động, có thể nạp dễ dàng mà không cần tiêm một luợng dung môi mạnh, có thể gây giảm hiệu suất cột.
Hệ thống HPLC yêu cầu hợp chất tan hoàn toàn, do đó cần một luợng dung môi mạnh gây giảm khả năng gắn ban đầu vào cột
Có nhiều chọn lựa chất hấp phụ:hợp chất nạp lên cột C18 có thể hấp phụ lên Celite,.. Ngoài ra còn có thể nạp thẳng lên cột làm sẵn. Vật liệu đuợc hoà tan trong dung môi mạnh và khí sẽ đuợc thổi qua cột để làm đuổi dung môi bằng hệ thống chân không.
Nạp mẫu lỏng: mẫu đuợc tiêm thẳng lên cột hoặc qua val bằng một ống tiêm. Hợp chất đuợc tách tinh khiết cao
Lọc dung môi không cần lọc hay khử khí dung môi, giúp tiết kiệm thời gian cho việc tinh khiết. Đặc biệt bóng khí không làm mất nguyên tố của hệ thống.
3. Ứng dụng
Tinh khiết hợp chất chứa 5-5-benzyl-N-α-N-im-di-t-Boc-
L-His1 (hợp chất A), sử dụng cột C18, hệ dung môi 5-95% ACN:H2O, ở bước sóng 214nm