b) Xỏc định hoạt tớnh AChE theo phƣơng phỏp đo quang phổ huỳnh quang.
3.5.3.3.Ảnh hƣởng của thuốc diệt ốc bƣơu vàng Dioto 250EC đến hoạt độ AChE.
Tuy nhiờn, vấn đề này được làm rừ hơn qua nghiờn cứu khả năng giải độc hay đào thải Secsaigon ra khỏi cơ thể của ốc bươu vàng.
Sự ức chế AChE lõu dài của Secsaigon lờn ốc bươu vàng cú thể xem là một chỉ thị sinh học để giỏm định mụi trường cú tồn tại hoỏ chất như Secsaigon và một số loại thuốc trừ sõu họ phospho hữu cơ. Hoạt độ AChE cú thể dựng để chỉ thị mụi trường cú tồn tại hoỏ chất bảo vệ thực vật gốc lõn hữu cơ, carbamate và phospho hữu cơ được nhiều người đồng tỡnh. Tuy nhiờn, muốn ứng dụng vấn đề này cần phải lựa chọn sinh vật thớch hợp cho từng khu vực. Sinh vật được lựa chọn cần đỏp ứng được một số tiờu chớ như phõn bố rộng, dễ thu mẫu, nhạy cảm.
3.5.3.3. Ảnh hƣởng của thuốc diệt ốc bƣơu vàngDioto 250EC đến hoạt độ AChE. AChE.
Thuốc diệt ốc bươu vàng Dioto 250EC chứa hoạt chất Nichlosamide, là thuốc trừ sõu cú tỏc dụng rộng, được sử dụng từ lõu và tương đối phổ biến, thuốc cú độc tớnh tương đối cao, cú thể gõy nhiễm độc qua đường hụ hấp, tiờu hoỏ và qua da gõy nhiễm độc thần kinh. Dioto 250EC tan nhiều trong cỏc dung mụi hữu cơ, ớt tan trong nước. Thuốc Dioto 250EC cú bản chất là chlorine hữu cơ đó bị cấm sử dụng ở Việt Nam (do rất độc với cỏ và động vật thủy sinh) nhưng vẫn được nụng dõn sử dụng nhiều nhất do giỏ rẻ lại diệt trừ được cả một số loại sõu hại khỏc.
Thớ nghiệm xỏc định ảnh hưởng của thuốc trừ sõu Dioto 250EC đến hoạt độ AChE trong dịch chiết ốc bươu vàng được tiến hành như sau:
* Lấy 10 ống nghiệm sạch, cho vào từng ống lượng enzyme nhất định, sau đú thờm vào mỗi ống lượng thuốc trừ sõu cú nồng độ tăng dần từ 1,0 đến 10,0 mg/l.
* Lắc nhẹ cho đều, để 30 giõy đến 1 phỳt. Sau đú tiến hành phản ứng xỏc định hoạt độ AChE.
Từ những kết quả nghiờn cứu thực nghiệm cho thấy: hoạt độ AChE bằng 82,59% hoạt độ AChE của dịch gốc khi nồng độ thuốc trừ sõu Dioto 250EC là 1,0 mg/l. Nếu tăng nồng độ của thuốc trừ sõu lờn 3 lần (3,0 mg/l) thỡ hoạt độ enzyme bằng 69,44% so với dịch gốc. Cú nghĩa là nồng độ thuốc trừ sõu càng tăng thỡ hoạt độ enzyme càng giảm. Khi nồng độ Dioto 250EC bằng 0,007 g/l (7,0 mg/l) thỡ hoạt độ enzyme bằng 3,33 U/g (= 1,54% so với hoạt độ của dịch enzyme gốc). Nghĩa là enzyme bị ức chế hoạt động tới 98,46% hoạt độ so với dịch gốc ở nồng độ thuốc trừ sõu bằng 7,0 mg/l (Hỡnh 3.18).