Hoỏ chất:
- Hoỏ chất, cỏc dung mụi dựng cho cỏc nghiờn cứu tỏch chiết và tinh sạch carotenoid: loại tinh khiết (Pure), của cỏc hóng Sigma, Merck, Fluka, Prolab, Trung Quốc... đảm bảo độ tin cậy cho cỏc thớ nghiệm. Với cỏc thớ nghiệm phõn tớch chỳng
30
tụi sử dụng cỏc húa chất đạt độ tinh khiết phõn tớch (PA). Cỏc chất chuẩn đƣợc mua từ cỏc hóng uy tớn nhƣ Lutein (Sigma 95507-5MG), β-carotene (Sigma C4582- 5MG), lycopene (Sigma 36275-5G), Sắc ký lớp mỏng đế nhụm trỏng sẵn Merck, Silicagel sắc ký cột của Merck (60756-50G), silicagel HPLC 100 C18 pha đảo
(60759-50G).
Bảng 2.2. Cỏc hệ dung mụi sử dụng trong cỏc thớ nghiệm tỏch chiết và tinh sạch carotenoid
STT Tờn Thành phần, nồng độ
1 Hệ dung mụi 1 (sắc ký lớp mỏng) Toluen:Ethyl acetate:acetone:formic acid~ 5:2:2:1(v/v/v/v)
2 Hệ dung mụi 2 (sắc ký lớp mỏng) n-hexane:ether dầu hỏa:acetone~2:1:1(v/v/v) 3 Hệ dung mụi 3 (sắc ký lớp mỏng) n-hexane:ether dầu hỏa :acetone~20:19:1(v/v/v) 4 Hệ dung mụi 4 (sắc ký cột lọc gel) ether dầu hỏa: acetone~9:1(v/v)
5 Hệ dung mụi 5(HPLC) acetonitrine:methanol:chloroform~
55:23:22 (v/v/v)
- Húa chất sử dụng cho cỏc thớ nghiệm thử hoạt tớnh sinh học: CCl4 (Sigma), curcumin (Sigma), ellipticine (Sigma), H2O2 (Fluka), NADH (Sigma), mụi trƣờng nuụi cấy tế bào DMEM (Gibco, Mỹ)...và cỏc húa chất pha đệm đạt độ tinh khiết đảm bảo độ tin cậy cho cỏc kết quả nghiờn cứu.
Bảng 2.3. Thành phần cỏc loại đệm, dung dịch sử dụng trong cỏc nghiờn cứu hoạt tớnh sinh học
STT Tờn Thành phần, nồng độ
1 CCl4 CCl4: dầu lạc ~ 1:10(v/v)
2 Dung dịch muối sinh lý NaCl 0,9%
3 Đệm acetate Natri acetate 0,2N, pH 4,7
4 Đệm phosphate 100nM Na2HPO4, 100mM NaH2PO4, pH 7,4
31
Cỏc dung dịch, hệ đệm, hệ dung mụi đƣợc pha đỳng quy cỏch, theo đỳng quy trỡnh của từng thớ nghiệm yờu cầu từ cỏc húa chất tinh khiết ở trờn.
Thiết bị:
Bảng 2.4. Cỏc thiết bị sử dụng trong nghiờn cứu
STT Tờn thiết bị Hóng
Thiết bị chiết xuất và tinh chế carotenoid
1 Bỡnh chiết Đức, Việt nam
2 Cột sắc ký Pharmacia Biotech (Mỹ)
3 Mỏy sắc ký hiệu năng cao HPLC LC 10Av Shimazu (Nhật)
4 Mỏy đo phổ cộng hƣởng từ 500MHz AVANCE
VARIAN
Bruker (Đức)
5 Mỏy đo phổ khối MS-Engine-5989-HP HP(Mỹ) (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Tủ hỳt OPEP OPEP (Đức)
Thiết bị cho cỏc thớ nghiệm hoạt tớnh sinh học
6 Mỏy đo pH Horiba F-51BW Horiba (Nhật)
7 Cõn phõn tớch, cõn Satorius (Đức)
8 Mỏy đo quang phổ Bionet-3, (Mỹ)
9 Tủ sấy, tủ ấm Memmert (Đức)
10 Tủ lạnh, tủ lạnh sõu Sanyo (Nhật)
11 Kớnh hiển vi ngƣợc Olympus (Nhật)
12 Mỏy phõn tớch húa sinh mỏu Olympus (Nhật)
13 Buồng đếm tế bào Fisher (Mỹ)