Xác định dung môi chiết thích hợp
Tiến hành chiết rút enzyme bằng các dung môi: nước cất, nước muối sinh lý, đệm phosphate pH=7,0, tỷ lệ 1/1, giữ ở 0-40C trong 40 phút bằng đá vụn, lọc lấy dịch, đem đi ly tâm lạnh ở 40C với tốc độ 7000 vòng/phút trong 900 giây, thu DC, sau đó xác định hoạt độ enzyme, so sánh và chọn dung môi chiết thích hợp.
Sơ đồ bố trí thí nghiệm:
Sơ đồ 2.2 Bố trí thí nghiệm xác định dung môi chiết thích hợp.
Nước muối sinh lý Đầu tôm thẻ chân trắng
Xay, nghiền
Chiết rút bằng các dung môi
Xác định hoạt độ của enzyme
Chọn dung môi chiết thích hợp
Nước cất Đệm phosphate
Xác định tỷ lệ dung môi chiết/nguyên liệu thích hợp
Sau khi chọn được dung môi chiết thích hợp, tiếp tục nghiên cứu xác định tỷ lệ dung môi chiết và nguyên liệu (NL) với các tỷ lệ dung môi/NL lần lượt là 1:1; 2:1; 3:1; 4:1 trong thời gian 40 phút rồi tiến hành lọc và xác định hoạt độ của enzyme với các bước như ở phần xác định dung môi chiết thích hợp (như trên) để chọn ra được tỷ lệ dung môi chiết/NL thích hợp.
Sơ đồ bố trí thí nghiệm
Sơ đồ 2.3 Bố trí thí nghiệm xác định tỷ lệ dung môi chiết thích hợp
Đầu tôm thẻ chân trắng
Xay, nghiền
Chiết rút bằng dung môi với các tỷ lệ
Xác định hoạt độ của enzyme
Chọn tỷ lệ dung môi chiết thích hợp
Xác định thời gian chiết rút thích hợp
Sau khi chọn được dung môi và tỷ lệ dung môi/NL thích hợp, tiếp tục nghiên cứu xác định thời gian chiết thích hợp với các thời gian chiết lần lượt là 20; 30; 40; 50; 60; 70; 80 phút rồi tiến hành lọc và xác định hoạt độ của enzyme để chọn ra thời gian chiết thích hợp.
Sơ đồ bố trí thí nghiệm:
Sơ đồ 2.4 Bố trí thí nghiệm xác định thời gian chiết thích hợp
Đầu tôm thẻ chân trắng
Xay, nghiền
Chiết rút bằng dung môi với các thời gian (phút)
Xác định hoạt độ của enzyme
Chọn tỷ lệ dung môi chiết thích hợp