Các kỹ thuật phát hiện virut Rota

Một phần của tài liệu Nghiên cứu đặc tính virut rota lưu hành gây bệnh tiêu chảy trẻ em vào Bệnh viện Nhi Khánh Hòa năm 2010 (Trang 34)

- Kỹ thuật miễn dịch gắn enzym (ELISA) xác định kháng nguyên virut rota

Phƣơng pháp này dựa trên nguyên tắc sử dụng kháng thể đơn dòng để tìm ra kháng nguyên virut Rota có trong mẫu phân ngƣời [28]. Kỹ thuật miễn dịch enzym là một phƣơng pháp đơn giản, có độ nhạy cao dùng cho việc xác định kháng nguyên virut rota, và rất phù hợp cho việc phân tích một lƣợng mẫu lớn [6].

- Kỹ thuật RT-PCR xác định týp virut rota

PCR đƣợc sử dụng để xác định kiểu gen của virut rota dựa trên các ARN đƣợc tách chiết từ các mẫu phân có virut rota dƣơng tính, nhằm xác định đặc điểm của các protein capsit lớp ngoài G và P [6].

- Kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang xác định kháng nguyên virut rota

Để xác định hiệu giá của virut nhóm A, có 2 phƣơng pháp xác định đó là phƣơng pháp miễn dịch enzym (EIA) với kết quả là chỉ số OD, chỉ số này không có ý nghĩa quyết định liều gây nhiễm của virut. Phƣơng pháp miễm dịch huỳnh quang là phƣơng pháp tối ƣu xác định hiệu giá virut Rota nhóm A, đơn vị xác định hiệu giá là đơn vị huỳnh quang phát sáng của tế bào gây nhiễm trên ml hỗn dịch virut. Đây là phƣơng pháp đơn giản, dễ thực hiện, cho kết quả nhanh trong vòng 24 giờ và chính xác [6]

- Kỹ thuật kính hiển vi điện tử

Đây là phƣơng pháp phát hiện trực tiếp virut trong bệnh phẩm và là kỹ thuật chẩn đoán nhanh, đặc hiệu, tuy nhiên độ nhạy không cao và khá đắt tiền, rất khó thực hiện khi có nhiều bệnh phẩm [6].

Luận văn Thạc sĩ Nguyễn Phương Thuý

- Kỹ thuật ngưng kết hạt Latex

Hạt latex đƣợc gắn với kháng thể kháng virut Rota để chẩn đoán kháng nguyên của virut. Đây là kỹ thuật chẩn đoán nhanh, không cần nhiều trang thiết bị [27].

- Kỹ thuật điện di

Nguyên lý các mảnh kép phân tử ARN của virut rota có trọng lƣợng phân tử khác nhau nên dễ dàng tách ra khi điện di trên gel polyacrylamid hoặc agarose. Kỹ thuật này có độ nhạy, đặc hiệu cao, dễ áp dụng trên nhiều bệnh phẩm.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu đặc tính virut rota lưu hành gây bệnh tiêu chảy trẻ em vào Bệnh viện Nhi Khánh Hòa năm 2010 (Trang 34)