- Ông thuỷ tính dài 30cm, đường kính 0,7cm, có một lỗ đường kính 0, 3cm cách đầu đưới ống 22cm, ống được cắm quá lỗ của nút cao su 3cm. Giấy tâm HgC]ạ được đặt vào trong ống khoảng giữa nút và lỗ. Giấy lọc tâm chì axêtat được cuộn tròn lại và đặt phía trên lỗ.
- Giấy tâm HạG|›, nhúng ngập giấy tâm lọc (lx8cm) vào chì axêtat vớt ra, để khô, cuộn tròn giây thành ống hình trụ, cho vào đầu trên ống thuỷ tinh.
2.5.5.3. Tiến hành:
1. Chuẩn bị dung dịch thử:
Kĩ Dùng pipet lấy 100ml sữa cho vào capxun 250ml. Thêm vào capxun 1b
MgO và 10ml HNO; đậm đặc, khuấy đều.
lí Đặt capxun lên bếp cách cát, đun dung dịch trong capxun cho tới khô. Đưa capxun vào lò nung, nung ở nhệt độ t = 400 — 500°C, nung đến tro.
ĩ Để nguội, cho vào capxun 10ml HCI đậm đặc vào 20ml nước cất/
wĩ Đặt capxun lên bếop điện đun ho sôi dung dịch đến khi lớp tro tan hết. Để nguội, lọc lấy dung dịch từ capxun vào bình định mức 50ml, thêm nước cất
đến vạch định mức, lắc kỹ.
2. Xác định:
kĩ Dùng pipet hút lây 25nl dung dịch
Vĩ Dùng pipet hút lấy 25ml dung dịch trong binhd định mức, cho vào bình nón 100ml, thêm vào 5ml nước cất, cho tiếp vào bình nón 10ml HCI đậm đặc và 3g kẽm, nhanh chóng đậy nút lại.
kĩ Nút cao su có găn ông thuỷ tính chứa giấy tắm dung dịch HgCl; 5% đã sây khô và giấy tâm chì axêtat 3%. Để Asen phản ứng với hyổro mới sinh ra trong 30 phút (kế từ khi đậy nút). Trong quá trình này, giấy tắm HẠC]; sẽ có màu nâu nêu mẫu có Asen. Sau khi mở nút ra khỏi bình nón, lây giấy đem so màu với giẫy tắm HgC]; tiêu chuẩn. Tính kết quá theo lượng Asen
phi trên giấy tâm HgCl; tiêu chuẩn, nếu màu của giấy làm mẫu thử và giấy
tiêu chuẩn trùng nhau.
3. Chuẩn bị giấy tâm HgCl; tiêu chuẩn:
Kĩ Cân chính xác 1,32g As;O; tỉnh khiết loại IL cho vào bình định mức
1000ml. Thêm vào bình định mức 10ml H;SO¿ đậm đặc, thêm nước cất đến
vạch định mức, lắc kỹ.
Vĩ Dùng pipet hút lấy 10ml dung dịch đã pha trên, cho vào bìnhđịnh mức dung
tích 1000ml khác, thêm nước cất đến vạch định mức, lắc kỹ, Iml dung dịch
này chứa 10y As
Wĩ Lần lượt cho vào 10 bình nón dung tích 100ml:
+ Bình 1: 2ml dung dịch trên ứng với 20y As + Bình 1: 4ml dung dịch trên ứng với 40y As + Bình 1: 20ml dung dịch trên ứng với 200y As
Wĩ Sau đó thêm nước cất vào từng bình nón ch đủ 30ml và cho vào mỗi bình
10ml HCI đậm đặc và 3g kẽm. Đậy nút bình.
Vĩ Nút có gắn ống thuỷ tỉnh chứa giấy tâm HgC]; và giấy tâm chì axêtat rồi
làm như cách làm ở mẫu thử.
ĩ Sau 30 phút, các giấy tâm HạC]; hiện màu đầy đủ. Tháo nút, lấy các tắm giây ra, phi lượng As ứng với mỗi giấy lên từng giấy, được dãy màu tiêu chuẩn.
Vĩ Tuỳ lương Asen tăng dần mà các tấm giấy khi đó có cường độ màu tăng dần (từ vàng đến nâu và nâu đậm) và chiều dài đoạn màu tăng dần từ 0,5cm đến 5cm
2.5.5.4. Kết quả:
- Mẫu thử có màu trúng với màu nào của giấy tiêu chuẩn thì lượng Asen có
trong mẫu ở khoảng đó.
- Từ đó tính lượng Asen có trong 1 lít sữa.
Chương 4: PHÁN TÍCH VI SINH
1. Giới thiệu về phương pháp vi sinh:
Là phương pháp xác định hàm lượng vi sinh vật có trong sữa bằng cách nuôi cấy chúng trong môi trường và đếm số lượng.
# Một số môi trường sử dụng trong nuôi cây vi sinh vật:
Mĩ Môi trường Sabourand:
- Thạch: 20g - Pepton: 20g
- Glucoza (hoặc maltoza): 40g - Nước: 100ml
Đun cho tan hết, điềuchinh pH = 5,5 hấp tiệt khuẩn ở 120°C trong 20 phút.
MĨ Môi trường thạch thường:
- Pepton: l0g - Cao thịt: 3g - NaC]: 5g - Agar: 12g
Đun ta các hợp chất trên với 1 lit nước cất, pH = 7, hấp ở 121C trong 15 phút.
Ĩ Môi trường nước pepton:
- Pepton: l0g - NaC]l: 10g
Đun tan các hợp chất trên với 1lit nước cất, pH = 7,2 và hấp ở 121C trong 15 phút.
kMĨ Môi trường Wilson Blair Agar:
- NaC]: 5g - Pepton: 0g - Glucoza: 10g - Cao thịt: 3g - Agar: l0g
Đun tan các hợp chất trên với 1 lit nước cất, hấp ở 121°C trong 15 phút.
2. Tiên hành:
2.1. Xác định Coliforrms: 2.1.1. Nguyên tắc:
Mẫu đã được đồng nhất hoá được cây một lượng nhất định lên môi trường thạch chọn lọc thích hợp có chứa lactose. Trên môi trường Endo có chứa Natri sulfit và
fucsin, có khả năng ức chế các vi khuẩn Gram ( + ). Trong quá trình phát triển trên môi trường này, Coliforms lên men đường lactose tạo thành aldehyt và acid, aldehyt tác động đến phức chất fucsin — sulfit và giải phóng fucsin. Fucsin nhuộm các khuẩn lạc từ màu hồng đến màu đỏ cánh sen, tròn, bờ đều, có thể có ánh kim hoặc không .
2.1.2. Thiết bị, dụng cụ, hoá chất: