III. THỰC NGHIỆM
3.6. Quy trình phàn tích đổng thời PCB vàTTS cơ clo trong mẫu sinh học
Mẫu trắng được tiến hành song song với mẫu thêm chuẩn và được lặp lại sau 10 mẫu thật. Mẫu trắng cũng được thực hiện theo các bước như trong quy trình phân tích đé ra trên nền muối Na2S 0 4.
3.6.2. Chuẩn bị mẫu giả
Cân chính xác 50 g mẫu sinh học ướt đã được đổng hoá vào trong lọ thuý tinh có năp đậy. Thêm 100 ml dung môi axeton vào. Thêm tiếp 500 Ịil hỗn hợp chất chuẩn PCB nồng độ 10 ppm (mg/1), 1 ml hỗn hợp 10 TTS cơ clo nồng độ 1 ppm. Tiên hành lắc qua đêm trên thiết bị lắc tự động. Sau đó, mẫu được bay hơi dung môi tại nhiệt độ phòng. Tiẽp tục lãc trên thiết bị lắc qua đêm. Bay hơi dung môi tại nhiệt độ phòng dưới dòng khí nitơ. Khi đó, ta được mẫu sinh học thêm chuẩn có nồng độ PCB tổng là 100 ppb (ne/g) và các TTS cơ clo là 20 ppb (ng/g) dùng để xác định hiệu suất thu hổi của quá trình phân tích.
3.6.3. Quy trình xử ly mẫu
Cân chính xác 5 g mẫu sinh học (ướt) đã được đổng hoá cho vào cối nghién mẫu đã có
sẩn k h o ả n g Ỉ 0 g N a i S O . ị k h a n . D ù n g c h à y t r ộ n , n g h i ề n đ ề u đ ê n k h i t ạ o t h à n h m ộ t h ỗ n h ợ p
các hạt rắn. Chuyển toàn bộ sang ông ly tủm teflon dung tích 50 ml. Thêm 30 ml axeton và tiến hành chiết tách các hợp chất cần phân tích trên máy siêu âm khoảng 10 phút. Sau đó ly tâm trong thời gian 5 phút tại tốc độ 3500 vòng/phút. Quá trình chiết được thực hiện 3 lán. Toàn bộ dịch chiết được thu thập vào trong bình cầu 250 ml và được cãt quay chân không vể 3 ml.
Dịch chiết của mẫu sinh học rất phức tạp, chứa rất nhiều các chất hữu cơ khác như: lipit, axit béo, amin, rượu... trong nền mẫu. Vì vậy, cần phải có bước làm sạch để loại bỏ các tạp chất này. ở đây, chúng tôi dùng phương pháp sắc ký thẩm thấu qua gel để làm sạch. Khi cho dịch chiết qua cột sắc ký thẩm thấu gel, với lượng dung môi rửa giải phù hợp chúng ta sẽ loại bỏ được lipit, các chất béo, cũng như các tạp chất có kích thước lớn hơn và nho hơn kích thước của các hợp chất PCB và TTS cơ clo.
Dịch chiết sau khi đã loai bỏ lipit, axit béo và một sô chất hữu cơ khác được làm sạch tiếp và tách phân đoạn các PCB và TTS cơ clo trẽn cột florisil. Quá trình chuẩn bị cột nhôi florisil, cũng như việc chọn loại dung môi rửa giải, thể tích dung môi rửa giải tương tự như đối với mẫu nước và trầm tích. Phàn đoạn F1 được rửa giải bằng 40 ml dung môi n-hexan và phân đoạn F2 được rửa giải bằng 120 ml hỗn hợp dung môi hexan:diclometan (4:1). Sau đó cô dịch rửa giải về 1 ml. Cuối cùng, bơm 2 ^i.1 lẽn thiết bị GC/ECD đẽ đinh lượng.
H ình 6. Q u y trình phân tích PCBs và TT S c ơ c lo trong mẩu sinh học
