Tiến hành thủy phân 5 mẫu từ đầu cá Ngừ đã xây nhuyễn, mỗi mẫu 100g nguyên liệu.
Hình 2.8. Sơ đồ bố trí thí nghiệm xác định nhiệt độ thủy phân thích hợp đối với Protamex
- Giai đoạn đầu: Thủy phân với các nhiệt độ thủy phân là: 400C, 450C, 500C, 550C, 600C. Thủy phân ở pH tự nhiên của cá, với các thông số cố định cho quá trình
Thủy phân bằng enzyme Protamex (N/NL = 1/1, E/NLopt, pH tự nhiên, τ = 2 giờ,)
Mẫu 1 (400C)
Mẫu 3 (500C)
Lọc
Xác định hiệu suất thu hồi Nitơ, Nitơ acid amin, Nitơ ammoniac
Mẫu 5 (600C) Mẫu 2 (450C) Mẫu 4 (550C)
Chọn nhiệt độ thủy phân thích hợp
Dầu
Bã li tâm Dịch thủy phân
Thủy phân bằng enzyme Flavourzyme (E/NL = 0,3%, t =500C, pH tự nhiên, τ = 2 giờ) Bất hoạt enzyme Li tâm Bã lọc Nguyên liệu Rã đông
thủy phân bằng enzyme Protamex: tỷ lệ enzyme/nguyên liệu đã xác định, thời gian thủy phân là 2h, tỷ lệ nước/nguyên liệu là 1:1. Mẫu sau khi thủy phân làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong thời gian 15 phút. Sau đó để nguội đến nhiệt độ khoảng 500C.
- Giai đoạn sau: Tiếp tục thủy phân bằng enzyme Flavourzyme với các thông số cố định (tỷ lệ enzyme/nguyên liệu: 0,3%, nhiệt độ thủy phân 500C, thời gian thủy phân 2 giờ, pH tự nhiên). Sau khi thủy phân, làm bất hoạt enzyme ở nhiệt độ 900C trong 15 phút, để nguội rồi tiếp tục lọc bỏ xương, hỗn hợp được ly tâm tách riêng thành 3 phần: dầu, dịch thủy phân, và phần cặn, dịch thủy phân được đem đi xác định Nitơ tổng số, Nitơ acid amin, Nitơ amoniac, hiệu suất thu hồi Nitơ.
Từ đó chọn nhiệt độ thủy phân thích hợp đối với enzyme Protamex