3. NUÔI CẤY TÉ BÀO TRÊN MÔI TRƯỜNG LỎNG
3.5. Ảnh hưởng của nầng độ nitơ lên sự tăng trưởng sinh khối và sản phẩm ginsenosỉdes
phẩm ginsenosỉdes
Anh hưởng của nồng độ nitơ ban đầu lên sự tăng trường sinh khối và sự tổng hợp sản phẩm ginsenosides đã được nghiên cứu trong nuôi cấy tế bào lỏng Panax vỉeừiamensis. Nồng độ nitơ được sử dụng trong thí nghiệm này là 10, 30, 60, 90 và 120 mM. Kết quả (Bảng 9) cho thấy với nồng độ nitơ cao đã ức chế sự sinh trưởng của tế bào và kìm hãm sự tổng hợp, tích lũy sản phẩm ginsenoside. Trọng lượng khô thu được lớn nhất (10.2 g/L) và sản phẩm ginsenoside (7.35 mg/g TL khô) ở nồng độ nitơ ban đầu 30 mM sau 4 tuần nuôi cấy.
Bảng 9. Ảnh hưởng của nồng độ nitơ lên sự tăng trưởng sinh khối và sản phẩm gỉnsenosỉdes Nồng độ nitơ (mM) TL tưoi (g/L) TL khô (g/L) Sản phấm ginsenoside (mg/g DW) Rg Rb Tổng 0 79cz 5.2c 1.47 2.81 4.28 10 122b 8.1b 2.25 4.33 6.58 30 176a 10.2a 2.81 4.54 7.35 60 156a 10.la 2.52 4.59 7.11 90 119b 7.9b 1.95 4.02 5.97 120 86c 5.4c 1.21 3.34 4.55
zKhông khác biệt hoặc khác biệt ở mức p < 0.05 xử lí DUNCAN hai yếu tố.
Trong nuôi cấy tế bào của Panax quinquefolium, Zhong và Wang (1998) đã tìm thấy sinh khối khô thu được có liên hệ chặt chẽ với liều lượng nitơ bổ sung vào môi trường ở nồng độ thấp. Sinh khối khô lớn nhất thu
được (15 g/L) ở nồng độ 40 mM, và tốc độ sinh trưởng của tế bào bị ức chế ờ nồng độ 80 mM. Tương tự, nồng độ nitơ bổ sung ban đầu vào môi trường nuôi cấy cũng ảnh hưởng sự tích lũy và tổng hợp sản phẩm trao đổi thứ cấp (saponin và polysaccharide, V . V . ) . Saponin tổng số và polysaccharide thu được lớn nhất là (1.5 g/L và 2.19 g/L) ở nồng độ nitơ bổ sung ban đầu 40 mM (Zhong và Wang, 1998). Sự tích lũy sản phẩm trao đổi chất thứ cấp saponin và polysaccharide trong nuôi cấy tế bào lỏng của Nhân sâm (Panax
ginseng), Liu và Zhong (1997) đã chứng minh rằng vai trò của nitơ rất quan
trọng trong sự sinh tổng hợp sản phẩm ginsenoside và polysaccharide. Kết quả này gợi rằng nồng độ nitơ thấp là tối ưu cho sự tích lũy và tổng họp saponin tổng số. Từ thí nghiệm này, chúng tôi rút ra kết luận ở nồng độ 30 mM là tối ưu cho sự sinh trưởng tế bào và sự tổng hợp sản phẩm ginsenoside của Sâm Ngọc Linh (p. vỉetnamensis).
