An toàn là chỉ tiêu quan trọng của một vacxin. Một vacxin khi sử dụng phòng bệnh cho ựộng vật phải ựạt chỉ tiêu này. Một vacxin ựược ựánh giá là an toàn
khi tiêm cho bản ựộng vật hay ựộng vật thay thế trong phòng thắ nghiệm với liều cao hơn liều sử dụng, các ựộng vật này vẫn sống, hoạt ựộng bình thường.
Không những vậy, kiểm tra chỉ tiêu an toàn sẽ cho biết có hay không có sự tăng ựộc lực của vi khuẩn nhược ựộc. Hơn nữa, chỉ tiêu an toàn còn cho biết ngưỡng liều sử dụng lớn nhất mà ở ựó không làm nguy hại sức khỏe ựộng vật ựược tiêm phòng. Kiểm tra chỉ tiêu an toàn của vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc theo (TCN: 194-94), sử dụng phương pháp thay thế dùng thỏ và chuột bạch ựể ựánh giá mức ựộ an toàn của vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc. Thỏ và chuột bạch rất mẫn cảm với ựộc lực của vi khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc. Theo Nguyễn Văn Lãm 1986, thử an toàn trên thỏ có thể phát hiện ra sự tăng ựộc lực của vi khuẩn THT ở tần số 10-8. Chỉ 1 hoặc 2 CFU vi khuẩn THT cường ựộc cũng có thể làm chết thỏ sau khi tiêm 24-48 giờ với các bệnh tắch lồng ngực chứa ựầy nước, lách sưng, phổi xuất huyết, khắ quản chứa ựầy bọt, xuất huyết dọc theo bề mặt niêm mạc. Thử nghiệm trên chuột bạch cho thấy, cả vi khuẩn THT và đD lợn cường ựộc ựều gây chết cho chuột bạch chỉ với số lượng nhỏ vi khuẩn. Với 15-20 CFU vi khuẩn THT cường ựộc có thể gây chết 100% chuột bạch (Nguyễn Văn Lãm, 1986). Năm 1876 Kock ựã mô tả vi khuẩn đD lợn (Erysipelothrix rhusiopathiae) như là một trực khuẩn gây bại huyết trên chuột Ộbacillus of mouse septicaemiaỢ (Brooke và Riley, 1999). Vi khuẩn đD gây chết chuột bạch với các bệnh tắch phổi sưng, tụ máu, lách to, tụ huyết rìa lách, gan nhạt màu.
Liệu có hay không sự tăng ựộc lực của chủng vi khuẩn nhược ựộc THT AvPS-3 và chủng vi khuẩn nhược ựộc đD lợn VR2 trong quá trình chế tạo canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc. Canh khuẩn vacxin có hay không có các chất gây nguy hiểm cho sức khỏe ựộng vật.
Tiến hành kiểm tra 3 lô vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc với 9 mẫu nghiên cứu. Thử nghiệm an toàn ựược tiến hành trên thỏ và chuột bạch theo phương pháp thay thế. Mỗi mẫu tiêm cho hai thỏ (1,5-2 kg), mỗi con 2 liều vacxin sử dụng và 5 chuột bạch (18-20 gr), mỗi con 1/5 liều vacxin sử dụng, ựường tiêm dưới da. Theo dõi
Bảng 3.4. Kết quả kiểm tra an toàn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc Thỏ (1,5-2 kg) Chuột bạch (18-20 gr) Lô vacxin Mẫu kiểm tra Số con TN Liều tiêm vacxin Vị trắ tiêm Thời gian theo dõi (ngày) Số sống khỏe mạnh Số con TN Liều tiêm vacxin Vị trắ tiêm Thời gian theo dõi (ngày) Số sống khỏe mạnh Kết quả 1 2 2 Dưới da 10 2 5 1/5 Dưới da 4 5 đạt 2 2 2 Dưới da 10 2 5 1/5 Dưới da 4 5 đạt I 3 2 2 Dưới da 10 2 5 1/5 Dưới da 4 5 đạt 1 2 2 Dưới da 10 2 5 1/5 Dưới da 4 5 đạt 2 2 2 Dưới da 10 2 5 1/5 Dưới da 4 5 đạt II 3 2 2 Dưới da 10 2 5 1/5 Dưới da 4 5 đạt 1 2 2 Dưới da 10 2 5 1/5 Dưới da 4 5 đạt 2 2 2 Dưới da 10 2 5 1/5 Dưới da 4 5 đạt III 3 2 2 Dưới da 10 2 5 1/5 Dưới da 4 5 đạt Tổng hợp 9 18 18 45 45 đạt
trong 10 ngày ựối với thỏ và 4 ngày ựối với chuột. Vacxin ựạt chỉ tiêu an toàn khi các ựộng vật thắ nghiệm phải sống khỏe. Kết quả thu ựược, ựược trình bày ở bảng 3.4.
Kết quả ở bảng 3.4 cho thấy.
- Lô vacxin I, kiểm tra 3 mẫu vacxin:
+ Với thỏ: Mỗi mẫu vacxin kiểm tra tiêm dưới da cho 2 con thỏ (1,5-2 kg) với 2 liều sử dụng vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc cho một con. Sau khi tiêm vacxin, theo dõi thỏ trong 10 ngày, 6 thỏ thử nghiệm của 3 mẫu kiểm tra vẫn sống khỏe, hoạt ựộng bình thường.
+ Với chuột bạch: Mỗi mẫu vacxin kiểm tra ựược tiêm dưới da cho 5 chuột bạch (18-20 gr) với 1/5 liều sử dụng vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc cho một con. Sau khi tiêm, theo dõi liên tục trong 4 ngày cho thấy, 15 chuột thử nghiệm của 3 mẫu kiểm tra vẫn sống khỏe, hoạt ựộng bình thường.
Như vậy, lô vacxin I, qua kiểm tra 3 mẫu vacxin, cả 3 mẫu vacxin ựều ựạt chỉ tiêu an toàn.
- Lô vacxin II, kiểm tra 3 mẫu vacxin:
+ Với thỏ: Mỗi mẫu vacxin kiểm tra tiêm dưới da cho 2 con thỏ (1,5-2 kg) với 2 liều sử dụng vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc cho một con. Sau khi tiêm vacxin, theo dõi thỏ trong 10 ngày, 6 thỏ thử nghiệm của 3 mẫu kiểm tra vẫn sống khỏe, hoạt ựộng bình thường.
+ Với chuột bạch: Mỗi mẫu vacxin kiểm tra ựược tiêm dưới da cho 5 chuột bạch (18-20 gr) với 1/5 liều sử dụng vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc cho một con. Sau khi tiêm, theo dõi liên tục trong 4 ngày cho thấy, 15 chuột thử nghiệm của 3 mẫu kiểm tra vẫn sống khỏe, hoạt ựộng bình thường.
Như vậy, lô vacxin II, qua kiểm tra 3 mẫu vacxin, cả 3 mẫu vacxin ựều ựạt chỉ tiêu an toàn.
+ Với thỏ: Mỗi mẫu vacxin kiểm tra tiêm dưới da cho 2 con thỏ (1,5-2 kg) với 2 liều sử dụng vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc cho một con. Sau khi tiêm vacxin, theo dõi thỏ trong 10 ngày, 6 thỏ thử nghiệm của 3 mẫu kiểm tra vẫn sống khỏe, hoạt ựộng bình thường.
+ Với chuột bạch: Mỗi mẫu vacxin kiểm tra ựược tiêm dưới da cho 5 chuột (18-20 gr) với 1/5 liều sử dụng vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc cho một con. Sau khi tiêm, theo dõi liên tục trong 4 ngày cho thấy, 15 chuột thử nghiệm của 3 mẫu kiểm tra vẫn sống khỏe, hoạt ựộng bình thường.
Lô vacxin III, qua kiểm tra 3 mẫu vacxin, cả 3 mẫu vacxin ựều ựạt chỉ tiêu an toàn. Như vậy, vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc sản xuất tại Xắ nghiệp thuốc Thú y Trung ương, qua kiểm tra an toàn của 3 lô vacxin, cả 3 lô vacxin ựều ựạt chỉ tiêu an toàn.