vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc sau khi nuôi cấy 48 giờ
Hiệu lực vacxin phụ thuộc nhiều yếu tố, trong ựó số lượng kháng nguyên ựặc hiệu có trong một liều vacxin là một trong những yếu tố quyết ựịnh. Số lượng kháng nguyên trong một liều vacxin quá nhỏ hay quá lớn ựều không ựáp ứng yêu cầu miễn dịch bảo hộ (Goldsby và cộng sự, 2002). Do ựó, việc xác ựịnh số lượng các thành phần kháng nguyên trong canh khuẩn vacxin có ý nghĩa rất lớn, nhằm xác ựịnh cơ bản chất lượng vacxin trong suốt quá trình sản xuất.
Môi trường Tụ Dấu sau khi ựược cấy giống vi khuẩn THT và đD lợn nhược ựộc, ủ bồi dưỡng ở nhiệt ựộ 370C trong vòng 48 giờ. Thời ựiểm canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc ựạt thời gian 48 giờ, tiến hành lấy mẫu ựể xác ựịnh số lượng vi khuẩn bằng phương pháp gián tiếp dựa vào số khuẩn lạc khi nuôi cấy trên môi trường ựặc.
Kiểm tra 3 lô vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc, mỗi lô kiểm tra 3 mẫu canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc 48 giờ. Số lượng vi khuẩn THT và đD lợn trong mẫu canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc 48 giờ ựược xác ựịnh theo cách pha loãng 1ml mẫu theo chuỗi nồng ựộ cơ số 10, từ nồng ựộ 10-1 cho tới nồng ựộ 10-6, tại nồng ựộ 10-6 hút huyễn dịch ria cấy hai ựĩa thạch máu, mỗi ựĩa 0,1ml. Sau 24-48 giờ ủ ở nhiệt ựộ 370C mang ra soi, ựếm số lượng khuẩn lạc mọc trên mặt thạch mỗi ựĩa, tắnh kết quả CFU/1 ml. Kết quả thu ựược, ựược trình bày ở bảng 3.2.
Kết quả bảng 3.2 cho thấy.
- Lô vacxin I, kiểm tra 3 mẫu canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc 48 giờ, mỗi mẫu kiểm tra ựược ria cấy trên 2 ựĩa thạch máu ở nồng ựộ 10-6 theo phương pháp gián tiếp. Kết quả cả 3 mẫu kiểm tra, số lượng vi khuẩn THT nhược ựộc ựạt 210ừ106 CFU/ml, số lượng vi khuẩn đD lợn nhược ựộc ựạt 220ừ106 CFU/ml.
Bảng 3.2. Kết quả xác ựịnh số lượng vi khuẩn THT và đD trong canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc 48 giờ
Lô vacxin Mẫu kiểm tra Số ựĩa ria cấy THT (CFU/ml)ừ106 đD (CFU/ml)ừ106
1 2 210 220 2 2 210 220 I 3 2 210 220 1 2 200 230 2 2 200 230 II 3 2 200 230 1 2 210 240 2 2 210 240 III 3 2 210 240 Trung bình 206,7 230
- Lô vacxin II, kiểm tra 3 mẫu canh khuẩn vacxin Tụ Dấu 48 giờ, mỗi mẫu kiểm tra ựược ria cấy trên 2 ựĩa thạch máu ở nồng ựộ 10-6 theo phương pháp gián tiếp. Kết quả cả 3 mẫu kiểm tra, số lượng vi khuẩn THT nhược ựộc ựạt 200ừ106 CFU/ml, số lượng vi khuẩn đD lợn nhược ựộc ựạt 230ừ106 CFU/ml.
- Lô vacxin III, kiểm tra 3 mẫu canh khuẩn vacxin Tụ Dấu 48 giờ, mỗi mẫu kiểm tra ựược ria cấy trên 2 ựĩa thạch máu ở nồng ựộ 10-6 theo phương pháp gián tiếp. Kết quả cả 3 mẫu kiểm tra, số lượng vi khuẩn THT nhược ựộc ựạt 210ừ106 CFU/ml, số lượng vi khuẩn đD lợn nhược ựộc ựạt 240ừ106 CFU/ml.
Theo Nguyễn Văn Lãm 1986, sau 48 giờ nuôi cấy, canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc chứa 140ừ106 CFU/ml vi khuẩn THT nhược ựộc và 166ừ106 CFU/ml vi khuẩn đD lợn nhược ựộc. đối chiếu với kết quả nghiên cứu của chúng tôi cho thấy, mật ựộ vi khuẩn THT và đD lợn trong các lô vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc kiểm tra có số lượng lớn hơn.
Như vậy, trên môi trường Tụ Dấu ựã khảo sát, cả hai vi khuẩn nhược ựộc THT và đD lợn ựều phát triển tốt. Canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ựộc 48 giờ