Phương pháp phân lập nấm theo phương pháp cấy ựơn bào tử

Một phần của tài liệu Nghiên cứu bệnh đạo ôn (pyricularia cav ) hại lúa ở hải dương vụ xuân năm 2012 (Trang 48 - 49)

Thu mẫu bệnh: Nhổ cả khóm lúa bị bệnh ựem về trồng trong chậu riêng từng giống ựể trong nhà lưới râm mát, dùng nhãn bằng giấy ghi tên giống lúa,

ngày lấy mẫu, ựịa ựiểm lấy mẫu buộc vào từng khóm lúạ Phân lập nấm Pyricularia oryzae.

Lấy lá lúa tươi có vết bệnh, rửa sạch dưới vòi nước, cho 1ml nước sạch

vào ống nghiệm, cắm lá lúa vào trong ống nghiệm ựể 15 - 20 giờ bào tử sẽ ựược hình thành trên bề mặt vết bệnh, lấy lá lúa này ra khỏi ống.

Lấy ựĩa WA (Water agar) cầm úp mặt thạch, gấp ựoạn lá hoặc cổ bông có

vết bệnh theo hình tam giác, dùng panh cặp và dắnh nhẹ vết bệnh vào bề mặt

thạch ựể bào tử dắnh vào mặt ựĩa WA, dùng bút dạ khoanh khu vực ựặt vết bệnh ựể khi ựưa lên kắnh hiểm vi dễ quan sát bào tử. Dùng panh lấy một ắt bông thấp nước, nhúng vào cồn 96% rồi khử trùng kim thủy tinh.

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 37 đưa ựĩa WA có bào tử lên kắnh hiểm vi quan sát và nhẹ nhàng lấy bào tử vào ựầu kim thủy tinh (ựiều chỉnh kắnh và kim thủy tinh sao cho mỗi lần khêu lấy chắnh xác một bào tử cấy). Vặn cho vật kắnh lên cao, ựưa ựĩa WA và cho

ựĩa PSA vào theo chiều úp mặt thạch xuống phắa dưới, dùng bút dạ khoanh

tròn 4 khoanh ở 4 góc của ựĩa, rồi từ từ thả bào tử từ ựầu kim thủy tinh vào nơi có ựánh dấu khoanh tròn trên ựĩa PSẠ Mỗi khoanh tròn một bào tử (mỗi

ựĩa PSA thả 4 bào tử)

đưa ựĩa có nấm vào buồng cấy vô trùng, Dùng que cấy cắt một miếng WA ựã có một bào tử dắnh ở ựó, cấy vào môi trường PSA trong ống nghiệm,

ựể ở nhiệt ựộ 260C- 280C cho nấm phát triển. đây là nguồn nấm Pyricularia oryzae thuần dùng cho các nghiên cứu tiếp theọ

Một phần của tài liệu Nghiên cứu bệnh đạo ôn (pyricularia cav ) hại lúa ở hải dương vụ xuân năm 2012 (Trang 48 - 49)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(121 trang)