2. Phương pháp nghiên cứu [5], [6], [7], [8], [9], [18]
2.1.4 Phương pháp xác định thành phần hóa học
- Phương pháp xác định hàm lượng protein:TCVN 3705:1990
- Phương pháp phân tích hàm lượng lipid bằng bộ chiết Soxhlet: TCVN 3703:2009
- Phương pháp phân tích hàm ẩm: TCVN 3700:1990 - Phương pháp phân tích hàm lượng tro: TCVN 5105:2009
2.2 Phương pháp xác định nhiệt độ biến tính của collagen bằng phương pháp đo độ nhớt Hình 2.2 Nhớt kế Ubbelohde T2 2 3 1 A T1 C B
Nguyên tắc
Trong lòng chất lỏng luôn tồn tại một lượng chất lỏng bên trong. Chất lỏng gồm các phân tử nằm chồng chất lên nhau. Khi có một lớp chuyển động sẽ lôi kéo các lớp kế cận nó chuyển động theo do một lực tương tác giữa phân tử của các lớp. Như vậy giữa các lớp sẽ tồn tại một gradient tốc độ có hướng vuông góc với tốc độ. Chính sự chênh lệch về tốc độ ấy mà có hiện tượng trượt trên bề mặt giữa các lớp, tạo nên lực ma sát bên trong dung dịch. Hệ số ma sát này gọi là độ nhớt dung dịch. Nhớt kế Ubbelohde khác với nhớt kế Ostwald là có thêm một nhánh thứ ba gắn liền với nhánh có mao quản qua một bầu chứa nhỏ. Nhánh thứ ba này có tác dụng ngắt dòng dung dịch cuối mao quản, cho nên thời gian dung dịch chảy qua mao quản không phụ thuộc vào lượng dung dịch trong bầu chứa. Nhớt kế Ubbelohde có nhiều ưu điểm hơn, dùng tiện lợi hơn, vì có thể pha loãng nồng độ dung dịch ngay trong bầu chứa bằng cách cho thêm vào một lượng dung môi tương ứng. Nhớt kế trước khi dùng phải rửa bằng hỗn hợp Sunfocromic, tráng lại bằng cồn hoặc ete, đem sấy khô trong tủ sấy.
Cách đo độ nhớt
Dung dịch collagen 0.3 % trong acetic acid 0.5 M, được khuấy đều cho tan hết. Tiến hành đo độ nhớt trong một bể điều nhiệt. Nhiệt độ được gia tăng chậm khoảng 2oC/phút. Bắt đầu đo ở 32oC và kết thúc ở 50oC. Hai phút lấy giá trị một lần. Độ nhớt của dung dịch collagen được xác định tương ứng ở các mức nhiệt độ. Độ nhớt tương đối được tính như sau:
Độ nhớt tương đối = Trong đó:
ηt : độ nhớt đo được tại mỗi mức nhiệt độ ηmax: độ nhớt tối đa
ηmin: độ nhớt tối thiểu
Đường cong biến tính nhiệt được xây dựng bằng cách vẽ đồ thị độ nhớt tương đối theo nhiệt độ. Nhiệt độ biến tính (Td) là nhiệt độ của dung dịch collagen được đo khi độ nhớt của nó giảm xuống một nửa.