để kiểm tra hiệu lực của vacxin, chúng tôi ựã bố trắ thắ nghiệm như sau: Lô miễn dịch sử dụng 350 gà 7 ngày tuổi, khỏa mạnh, chưa sử dụng vacxin Newcastlẹ
Lô ựối chứng sử dụng 100 gà cùng lứa tuổi và nguồn gốc.
Vacxin ựược hoàn nguyên trở lại bằng nước muối sinh lý hoặc dung dịch PBS vô trùng.
Ở lô miễn dịch, mỗi con ựược sử dụng 1 liều vacxin theo quy ựịnh bằng phương pháp nhỏ mắt, nhỏ mũị
Lô ựối chứng gà không ựược sử dụng vacxin, ựược nhốt riêng. Theo dõi 28 ngàỵ Mỗi ngày quan sát 2 lần.
Ở các thời ựiểm 14, 21, 28 ngày sau khi sử dụng vacxin, chúng tôi lấy mẫu máu ngẫu nhiên 100 gà ở lô miễn dịch và 50 gà ở lô ựối chứng. Mỗi con lấy 1ml máu ở tĩnh mạch, chiết lấy huyết thanh dùng ựể xét nghiệm bằng phản ứng HỊ
Kết quả kiểm tra hiệu lực của vacxin ựược trình bày ở bảng 3.13.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 64
Bảng 3.13. Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể của ựàn gà sau khi nhỏ vacxin Avipro ND Lasota (HGKTTB ≥ 4 log2)
Hiệu giá kháng thể (log2)
0 < 4log2 4log2 Ờ 8log2 >8log2
Giai ựoạn sau miễn dịch Số lượng mẫu kiểm tra (n) n % n % n % n % HGKTTB (log2) Mẫu bảo hộ (n) Tỷ lệ bảo hộ (%) đC 50 41 82 9 18 0 0 0 0 0,26 0 0 14 ngày MD 100 0 0 7 7 93 93 0 0 4,54 93 93 đC 50 46 92 4 8 0 0 0 0 0,12 0 0 21 ngày MD 100 0 0 2 2 92 92 6 6 5,4 98 98 đC 50 50 100 0 0 0 0 0 0 0 0 0 28 ngày MD 100 0 0 6 6 90 90 4 4 4,93 94 94 Ghi chú: đC : đối chứng MD: Miễn dịch
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 65 Qua bảng 3.13 cho thấy, ựàn gà chúng tôi khảo nghiệm có ựáp ứng miễn dịch khá tốt sau khi ựược nhỏ vacxin.
Ở thời ựiểm 14 ngày sau khi nhỏ vacxin hiệu giá kháng thể trung bình của ựàn gà miễn dịch ựạt 4,54 log2 trong ựó có 93 mẫu hiệu giá kháng thể ựạt từ 4 log2 Ờ 8 log2 chiếm tỷ lệ 93% ựây cũng chắnh là tỷ lệ bảo hộ của ựàn gà ở thời ựiểm nàỵ 7 mẫu có hiệu giá kháng thể <4 log2 chiếm 7% và không có mẫu nào ựạt hiệu giá kháng thể > 8 log2. Gà ựối chứng có hiệu giá kháng thể trung bình ựạt 0,26 log2 trong ựó 41 mẫu âm tắnh chiếm 82% và chỉ có 9 mẫu cho hiệu giá kháng thể < 4 log2 chiếm 18% nhưng vẫn không ựủ bảo hộ cho ựàn gà.
Tại thời ựiểm 21 ngày sau khi nhỏ vacxin hiệu giá kháng thể trung bình của ựàn gà miễn dịch ựạt 5,4 log2 trong ựó có 92 mẫu có hiệu giá kháng thể ựạt từ 4 log2 Ờ 8 log2 chiếm tỷ lệ 92%. 2 mẫu có hiệu giá kháng thể < 4 log2 chiếm 2% và có 6 mẫu hiệu giá kháng thể ựạt > 8 log2 chiếm tỷ lệ 6% trên tổng số mẫu kiểm trạ Trong 100 mẫu huyết thanh kiểm tra có Tỷ lệ bảo hộ là 98% . Gà ựối chứng có hiệu giá kháng thể trung bình ựạt 0,12 log2 trong ựó 46 mẫu âm tắnh chiếm 92% và chỉ có 4 mẫu cho hiệu giá kháng thể < 4 log2 chiếm 8%.
Ở thời ựiểm 28 ngày sau khi nhỏ vacxin hiệu giá kháng thể trung bình của ựàn gà miễn dịch giảm từ 5,4 log2 Ờ 4,93 log2. Mặc dù hiệu giá kháng thể của ựàn gà giảm nhưng vẫn ựủ khả năng bảo hộ chống bệnh Newcastlẹ Trong ựó có 90 mẫu ựạt hiệu giá kháng thể từ 4 log2 Ờ 8 log2 chiếm tỷ lệ 90%. 4 mẫu ựạt hiệu giá kháng thể > 8 log2 chiếm tỷ lệ 4% trên tổng số mẫu kiểm trạ Tỷ lệ bảo hộ giảm còn 93%. Gà ựối chứng 50/50 mẫu cho hiệu giá kháng thể âm tắnh (0 log2) chiếm tỷ lệ 100%.
Qua ựây cho thấy ở lô gà ựối chứng không sử dụng vacxin hiệu giá kháng thể gần như cho kết quả âm tắnh. Chỉ một số mẫu ở 14, 21 ngày cho kết quả hiệu giá kháng thể ựạt < 4 log2 nhưng vẫn không ựủ khả năng bảo hộ cho gà. Nguyên nhân có thể do lượng kháng thể từ mẹ truyền cho con và ựến thời
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 66 ựiểm 28 ngày sau thì lượng kháng thể ựã hoàn toàn hết. Còn ở gà miễn dịch sau khi nhỏ vacxin chúng tôi thấy rằng ựàn gà có ựáp ứng miễn dịch khá tốt với vacxin Avipro ND Lasota nhược ựộc ựông khô, cho ựàn gà khả năng bảo hộ chống bệnh Newcastle cao 93% - 98%.
Diễn biến hiệu giá kháng thể của ựàn gà sau khi nhỏ vacxin Avipro ND Lasota của Lohmann ở các thời ựiểm khác nhau ựược thể hiện ở hình 3.20:
Ghi chú: đC: đối chứng; MD: Miễn dịch
Qua hình 3.20 cho thấy, hiệu giá kháng thể trung bình của ựàn gà ở lô miễn dịch tăng dần, cao nhất ở thời ựiểm 21 ngày sau khi nhỏ vacxin ựạt 5,4 log2. Sau ựó ở thời ựiểm 28 ngày hiệu giá kháng thể trung bình lại giảm dần xuống còn 4,93 log2. Trong khi ựó ựường biều diễn ở lô gà ựối chứng không sử dụng vacxin HGKTTB rất thấp, không ựủ khả năng bảo hộ cho ựàn gà và ựến 28 ngày cho kết quả 100% âm tắnh (0 log2).
Hình 3.20: Biến ựộng HGKTTB của ựàn gà sau khi nhỏ vacxin Avipro ND Lasota
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 67
CHƯƠNG IV
KẾT LUẬN VÀ đỀ NGHỊ