* Bố trắ thắ nghiệm:
Sử dụng 500 gà Lương phượng 7 ngày tuổi và chia làm 3 lô ở bảng 2.1.
Bảng 2.1. Bố trắ thắ nghiệm khảo nghiệm vacxin Avipro ND Lasota
Lô thắ nghiệm
Số con mỗi lô
Liều vắc xin và
ựường cấp thuốc Ghi chú
Lô 1 100 Không dùng vắc xin đối chứng
Lô 2 50 10 liều quy ựịnh; nhỏ mắt An toàn
Lô 3 350 1 liều quy ựịnh; nhỏ mắt Miễn dịch
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 36 Trước khi gà ựược nhỏ vacxin, lấy mẫu máu ngẫu nhiên 50 gà (lúc 7 ngày tuổi). Mỗi con lấy 1ml máu ở tĩnh mạch, chiết lấy huyết thanh dùng ựể xét nghiệm bằng phản ứng HỊ Nếu kết quả ựạt yêu cầu thắ nghiệm sẽ tiến hành nhỏ vacxin.
* Phương pháp kiểm tra an toàn
Sử dụng 50 gà 7 ngày tuổi, khỏe mạnh, chưa sử dụng vacxin Newcastlẹ Mỗi con ựược sử dụng 10 liều vacxin theo ựường nhỏ mắt, nhỏ mũị Gà ựối chứng không sử dụng vacxin ựược nhốt riêng. Quan sát gà trong 28 ngàỵ Quan sát theo dõi các chỉ tiêu về tỷ lệ chết, kiểm tra phản ứng bất lợi, triệu chứng lâm sàng và phản ứng cục bộ tại vị trắ tiêm và thể trọng của gà trong suốt quá trình khảo nghiệm.
Tắnh an toàn của vacxin là ựạt yêu cầu khi không có các triệu chứng lâm sàng và phản ứng bất lợi do vacxin ảnh hưởng ựến tỷ lệ sống và sự phát triển bình thường của gà.
* Phương pháp kiểm tra hiệu lực
Sử dụng 350 gà 7 ngày tuổi, khỏe mạnh, không có kháng thể phòng bệnh Newcastlẹ Mỗi gà ựược sử dụng 1 liều vacxin theo ựường nhỏ mắt, nhỏ mũị 100 gà ựối chứng không sử dụng vacxin ựược ựánh dấu và nhốt riêng. đàn gà ựược theo dõi 28 ngày, mỗi ngày quan sát 2 lần.
để ựánh giá hiệu lực của vacxin sử dụng 2 phương pháp sau:
+ Phương pháp huyết thanh học (bằng phản ứng HI): Tại thời ựiểm
14, 21 và 28 ngày sau khi sử dụng vacxin, lấy máu ngẫu nhiên 100 gà ở lô miễn dịch và 50 gà ở lô ựối chứng. Mỗi con lấy 1ml máu ở tĩnh mạch, chiết lấy huyết thanh và làm phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu (HI).
Phương pháp tiến hành phản ứng HA, HI ựược mô tả chi tiết trong giáo trình Vi vật thú y của trường đại học Nông nghiệp I Ờ Hà Nội (Nguyễn Như Thanh và cộng sự, 2001).
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 37
+ Phương pháp công cường ựộc: tại thời ựiểm 14 ngày sau miễn dịch,
bắt ngẫu nhiên 20 gà miễn dịch và 10 gà ựối chứng, mỗi con ựược thử thách với chủng virus Newcastle cường ựộc VN91 với liều 106ELD50/con. Theo dõi 10 ngàỵ Phương pháp công cường ựộc theo tiêu chuẩn 10 TCN 181 Ờ 93 và khuyến cáo của OIE 2008.
Yêu cầu: Gà miễn dịch sống khỏe ≥ 80%
Gà ựối chứng chết ≥ 80% vì bệnh Newcastle