IV. BÀN LUẬN
4.4.3. Quy trình thực hiện thử nghiệm
Toàn bộ quy trình thực hiện trong đề tài này là một phần công việc của
dự án SISEA, một dự án có sự tham gia của nhiều đơn vị bao gồm Viện Vệ
sinh Dịch tễ Trung ương, Viện Pasteur Thành phố Hồ Chí Minh, Viện Pasteur
Thượng Hải và đều được thẩm định và xác nhận của từng viện khu vực. Các quy trình chẩn đoán cúm do Viện Pasteur Paris, Cộng hòa Pháp xây dựng,
được thẩm định và sử dụng ngay tại Viện Pasteur Paris, được xác nhận và sử
dụng bởi tất cả các Viện thành viên [61],[85],[123],[150]. Những quy trình này cũng đã được chuẩn hóa và được công bố trên các tạp chí khoa học uy tín
quốc tế [123],[150]. Một ưu điểm khác của các quy trình real-time chẩn đoán và xác định phân típ cúm A/H1N1pdm09 và A/H5N1 là các phản ứng đơn
mồi đều có cùng chu kỳ nhiệt nên có thể xác định cúm và phân típ cúm A trong cùng một lần thử nghiệm, trên cùng một tấm nhựa phản ứng, vẫn đảm
bảo độ nhạy mà lại thuận tiện và rất tiết kiệm thời gian. Ngoài ra, một số mồi và đầu dò sử dụng trong chẩn đoán cúm được thiết kế bằng kỹ thuật thoái hóa
mồi để phát hiện tối đa các chủng cúm do virus này có hiện tượng thay đổi
kháng nguyên từ từ mà nguyên nhân của nó là do hiện tượng đột biến [47]. Riêng với sởi, có rất nhiều quy trình trên thế giới phát hiện khu vực ổn định
nhất gen N và đều công bố độ nhạy và độ đặc hiệu rất cao. Phòng thí nghiệm
virus sởi của CDC tại Atlanta, Hoa Kỳ đã tiến hành một nghiên cứu thẩm định và xác nhận đồng thời độ nhạy và độ đặc hiệu của tất cả các cặp mồi và
đầu dò đã được công bố trên toàn thế giới để tìm ra cặp mồi và đầu dò tốt nhất
[121]. Cặp mồi và đầu dò của nghiên cứu này được lựa chọn theo kết quả
nghiên cứu thẩm định và xác nhận của CDC Hoa Kỳ. Đây là một trong số các
bằng chứng chứng minh tính tin cậy của tất cả các cặp mồi và đầu dò đặc hiệu
sử dụng trong nghiên cứu. Độ đặc hiệu của phản ứng được đánh giá bằng các
nghiên cứu trước đây, độ nhạy của phản ứng được đánh giá qua gam chuẩn
ngoài và các công bố của Viện Pasteur Paris và các Viện nghiên cứu thành viên tham gia dự án SISEA [61],[85],[121],[123],[150]. Năng lực của đội ngũ
tham gia nghiên cứu một phần được khẳng định thông qua kết quả EQA NAT phát hiện đồng thời 18 tác nhân gây bệnh đường hô hấp, phòng thí nghiệm
thực hiện đề tài nghiên cứu này là đơn vị duy nhất đạt 100% kết quả đúng
trong quá trình tham gia nghiên cứu (02 vòng EQA) (kết quả không được chỉ
ra ở nghiên cứu này).