Theo bảng 30 thì nồng độ 103 cĩ hệ số là 8.81 khi đĩ nồng độ 107 cĩ hệ số là 6.81 Như vậy, hệ số biến thiên cao nhất của phản ứng real-time RT-PCR HCV là
1.5.6. So sánh kit HCV định lượng với kit Bayer Versant HC
Chúng tơi tiến hành trên 20 mẫu huyết thanh và kết quả được trình bày trong bảng 35.
Bảng 35. Kết quả định lượng trên 20 bệnh phẩm bằng kit HCV định lượng và kit Versant bDNA
Bệnh phẩm Kit Versant HCV (bản sao/ml) Kit HCV định lượng (bản sao/ml) 1 12.921.664 5.640.000 2 571.580 742.000 3 505.799 419.000 4 2.793.335 2.790.000 5 3.214.227 4.980.000 6 467.278 449.000 7 13.257.142 21.800.000 8 2.357.943 3.260.000 9 4.756.803 3.190.000 10 610.046 177.000 11 147.029 63.300 12 999.677 738.000 13 682.133 694.000 14 3.228.902 1.920.000 15 19.245.820 19.600.000 16 3.316.638 5.840.000 17 1.832.821 636.000 18 4.115.851 1.940.000 19 <3.200 N/A 20 <3.200 N/A
Hình 19. Độ tương quan giữa kết quả định lượng HCV với kit Versant HCV và kit HCV định lượng
Hệ số tương quan 0,8778 (bảng 35, hình 19) cho thấy kết quả thu được với kit HCV định lượng phù hợp với kết quả thu được với kit Bayer Versant HCV. Trong cơng trình của Martell và cộng sự (1997), hai phương pháp real-time RT- PCR và NGI cĩ hệ số tuyến tính là 0,819 ; cịn giữa hai phương pháp real-time RT-PCR và bDNA hệ số này là 0,725. Trong một cơng trình khác, Barbeau (2004) cho thấy hệ số tương quan giữa hai phương pháp real-time RT-PCR và PCR ELISA (Amplicor monitor HCV test – Roche Diagnostics) là 0,8898. White (2002) cho thấy hệ số tuyến tính giữa real-time RT-PCR và “Amplicor monitor HCV test” là 0,876. Nhìn chung, các kết quả chúng tơi nhận được phù hợp với các cơng bố trước đây và cĩ thể chấp nhận được.
1.5.7. Độ nhạy lâm sàng
Chúng tơi định lượng HCV-RNA trên 76 huyết thanh cĩ anti HCV (+). Kết quả cho thấy cả 76 mẫu đều cĩ HCV-RNA (+) với hàm lượng dao động trong khoảng 103 đến 108 bản sao/ml, tập trung nhiều nhất ở các nồng độ 105, 106, 107. Trong số 76 bệnh phẩm khảo sát, cĩ 70 bệnh phẩm cĩ chỉ tiêu AST/ALT khơng bình thường (>40) và 6 mẫu cĩ chỉ số AST/ALT bình thường. Kết quả khảo sát tương quan giữa giá trị AST/ALT với hàm lượng virus (phụ lục 5) cho thấy khơng cĩ tương quan giữa 2 giá trị này. Nhiều cơng trình đã cơng bố cũng cho thấy khơng thể sử dụng chỉ số AST/ALT để xác định tình trạng nhiễm HCV.
Bên cạnh đĩ, chúng tơi định lượng HCV-RNA trên 39 mẫu trước và sau điều trị. Nhĩm mẫu này được chia thành 2 nhĩm nhỏ : (1) 32 mẫu điều trị 8 tuần, (2) 7 mẫu điều trị 24 tuần.
- Kết quả trên nhĩm (1) cho thấy trong 32 mẫu cĩ hàm lượng HCV-RNA ban đầu dao động trong khoảng 102 đến 109 bản sao/ml, sau 8 tuần điều trị, cĩ 29 mẫu cĩ hàm lượng HCV-RNA khơng phát hiện được với test kit thử nghiệm, 2 mẫu cĩ hàm lượng HCV-RNA <102 và 1 mẫu cĩ hàm lượng khơng đổi là 104 bản sao/ml. Giá trị AST/ALT bình thường được tìm thấy ở 1 mẫu trước điều trị và ở 22 mẫu sau điều trị.
- Kết quả trên nhĩm (2) gồm 7 mẫu cĩ hàm lượng HCV-RNA trong khoảng 103 đến 109 bản sao/ml trước điều trị, sau 24 tuần điều trị cĩ 2 mẫu khơng cho thấy sự giảm hàm lượng HCV-RNA, 5 mẫu cĩ hàm lượng HCV-RNA giảm nhẹ. Giá trị AST/ALT bình thường được tìm thấy ở 5 mẫu sau điều trị.