2. Phân lập và nhận dạng các hợp chất có trong các dịch chiết khác nhau của cây Dây thìa canh.
2.1. Stigmasterol (GyH3)
Cặn thô màu trắng thu được kết tinh lại trong dung môi n-hexan cho tinh thể hình kim, không màu, không mùi. Nóng chảy ở 155-157 0
C, []25D = - 430(c=0,05; CHCl3). Trong phổ EI-MS có thể thấy pic ion phân tử [M]+ (c=0,05; CHCl3). Trong phổ EI-MS có thể thấy pic ion phân tử [M]+
ở 412 m/z. Các phổ 1
H-NMR, 13C-NMR và FT-IR khẳng định sự có mặt của nhóm hydroxyl (OH) H3 = 3,49 ppm và C3 = 71,8 ppm và max = 3406cm-1, có 3 proton thuộc nhóm metin (CH) của 2 nối đôi không liên hợp (FT-IR: 1621cm-1
), 1
H-NMR: H6 = 5,33ppm, dd, J=5Hz và 2Hz; H22 = 5,11 ppm, dd, J=15Hz và 5Hz; H22 = 5,03 ppm; dd, J=15Hz và 5Hz; 13C-NMR: C-5 = 140,7 ppm, C6 = 121,6 ppm, C22 = 138,3 ppm, C23 = 129,2 ppm. Điểm chảy của hỗn hợp GyH3
và stigmast-5,22-dien-24R-3β-ol chuẩn không đổi. Các số liệu về phổ 1H-NMR và 13C-NMR của GyH3 hoàn toàn phù hợp với phổ của stigmast-5,22-dien-24R-
Số hóa bởi Trung tâm Học Liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
3β-ol chuẩn [53]. Do vậy, có thể khẳng định GyH3 chính là stigmast-5,22-dien- 24R-3β-ol. Xem hình 3.1.a
Bảng 3.1. Số liệu phổ 13C-NMR (CDCl3, 125MHz) của stigmasterol trong cây Dây thìa canh (Gymnema sylvestre (Retz.))
STT C Độ bội STT C Độ bội 1 36.5 t 16 29.7 t 2 29.1 t 17 56.0 d 3 71.7 d 18 11.8 q 4 42.2 t 19 19.4 q 5 140.7 s 20 40.5 d 6 121.7 d 21 18.8 q 7 37.2 t 22 138.3 d 8 31.8 d 23 129.2 d 9 51.2 d 24 50.1 d 10 36.1 s 25 31.6 d 11 24.3 t 26 21.2 q 12 42.2 t 27 21.0 q 13 39.7 s 28 18.9 t 14 56.8 d 29 12.0 q 15 25.4 t 2.2. Stigmasta-5,22-dien-3β-O-β-D-glucopyranosit (GyH4)
Các số liệu phổ của GyH4 đã trình bày ở mục 3.3.1.4 so sánh với số liệu phổ của chất chuẩn stigmasta-5,22-dien-3β-O-β-D-glucopyranosit [53] là hoàn toàn phù hợp. Các hằng số vật lý của nó cũng như điểm chảy của hỗn hợp GyH4 và stigmasta-5,22-dien-3β-O-β-D-glucopyranosit là không đổi. Do đó, có thể khẳng định hợp chất GyH4 thu được từ cây Dây thìa canh là stigmasta-5,22-
Số hóa bởi Trung tâm Học Liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Stigmasterol (GyH3) Stigmasta-5,22-dien-3β-O-β-D- glucopyranosit (GyH4)
Hình 3.1a. Cấu trúc hóa học của GyH3 và GyH4