Qui trỡnh chiết xuất anthranoid và acid chrysophanic từ Đại hoàng.
*Quy trỡnh 1: Chiết xuất anthraglycosid bằng dung dịch NaOH. Thuỷ
phõn anthraglycosid bằng acid sulfuric, chiết anthranoid tự do bằng cloroform, tỏch riờng acid và cỏc anthranoid khỏc.
+ Giai đoạn 1: Chiết anthraglycosid toàn phần:
Bột dược liệu cho vào bỡnh cầu, thờm dung dịch NaOH 2%, đun cỏch thuỷ 1h, lọc lấy dịch chiết 1. Thờm dung dịch NaOH 2% vào bó và đun 30 phỳt, lọc lấy dịch chiết 2. Thờm dung dịch NaOH 2% vào bó và đun 30phỳt, lọc lấy dịch chiết 3. Gộp cả 3 dịch chiết, acid hoỏ bằng acid sulfuric 10%, cỏc anthraglycosid tủa, gạn lọc lấy tủa.
+ Giai đoạn 2: Thuỷ phõn:
Lấy tủa chứa anthraglycosid cho vào bỡnh cầu, thờm acid sulfuric đặc vào cho nồng độ acid sulfuric đạt 20%. Đun sụi 1h. Để nguội lọc lấy tủa, sấy khụ. Trong tủa này chứa cỏc anthranoid dạng tự do và tạp chất.
+ Giai đoạn 3: Chiết anthranoid dạng tự do từ tủa thuỷ phõn.
Tủa khụ được chiết xuất bằng cloroform 3 lần, mỗi lần 50ml (sụi trờn cỏch thuỷ 30 phỳt cú ống sinh hàn ngược). Thu được dịch chiết cloroform cú chứa anthranoid dạng tự do tương đối tinh khiết.
+ Giai đoạn 4: Chiết xuất riờng acid chrysophanic và cỏc anthranoid khỏc:
Dịch chiết cloroform loại cỏc anthranoid dạng tự do khỏc bằng dung dịch amoniac, dịch cloroform cũn lại (cú chứa chủ yếu là acid chrysophanic). Thu hồi cloroform, cặn hoà trong dung dịch NaOH 5%, lọc. Dịch lọc được acid hoỏ bằng acid sulfuric 10%, acid chrysophanic tủa, lọc lấy tủa rửa tủa và sấy khụ ở 50oC.
*Qui trỡnh 2: Chiết xuất bằng cồn 90o và 45o:
Bột dược liệu làm ẩm bằng cồn 90o rồi cho vào bỡnh ngấm kiệt, cho cồn tới ngập dược liệu. Ngõm 72h, rỳt dịch chiết . Lượng dịch chiết thu được bằng 4 lần dược liệu (10kg thu được 40 lớt dịch chiết).
Thu hồi dung mụi đến cao đặc.
+ Giai đoạn 2: Thuỷ phừn cỏc anthraglycosid:
Dạng cao đặc cú khối lượng tương đương với khối lượng dược liệu ban đầu, thờm acid sulfuric đặc để đạt được nồng độ acid sulfuric khoảng 10%. Đun sụi trong 1giờ, lấy ra, thờm nước, lọc lấy tủa, rửa hết acid, sấy khụ ở 60-70oC.
+ Giai đoạn 3: Chiết cỏc anthranoid dạng tự do từ tủa thuỷ phõn:
Tủa khụ được chiết xuất bằng cloroform 3 lần, mỗi lần 50ml (sụi trờn cỏch thuỷ 30 phỳt cú ống sinh hàn ngược). Thu được dịch chiết cloroform cú chứa anthranoid dạng tự do tương đối tinh khiết.
+ Giai đoạn 4: Chiết xuất riờng acid chrysophanic và cỏc anthranoid khỏc: Dịch chiết cloroform loại cỏc anthranoid dạng tự do khỏc và cỏc tạp chất bằng dung dịch amoniac đến hết màu đỏ, dịch cloroform cũn lại (cú chứa chủ yếu là acid chrysophanic). Thu hồi cloroform, cặn hoà trong dung dịch NaOH 5%, lọc. Dịch lọc được acid hoỏ bằng acid sulfuric10%, acid chrysophanic tủa, lọc lấy tủa sấy khụ ở 50oC.
SƠ ĐỒ QUY TRèNH CHIẾT XUẤT Bột dược liệu (Bột Đại hoàng khụ) Dịch chiếtcồn Dịch chiết kiềm Tủa thụ Cao cồn Tủa thụ Tủa thụ khụ Dịch chiết cloroform
Dịch chiết cloroform chứa acid chrysophanic Tủa Bột tinh thể acid Chrysophanic Cỏc anthranoid tự do khỏc Chiết NaOH Chiết cồn 90o Thu hồi cồn Thờm H 2SO 4 đặc đến nồng độ 10%, thuỷ phõn 1h (cỏch thuỷ) Thờm H 2SO 4 đặc đến nồng độ 20%, thuỷ phõn 2h (cỏch thuỷ) Sấy khụ ở 50 - 600 60oC Chiết bằng cloroform Amoniac
Thu hồi cloroform