- Định tính: sau 24 – 48 giờ nuôi ủ, chọn tất cả những ống lên men chuyển sang mày vàng, cấy ria chuyển sang môi trường chọn lcọ BP ủ
c)Môi trường
Môi trường Colistine Polymyxin Broth Cao nấm men 3g.
Tryptone 10g.
NaCl 20g.
Nước cất 1000ml.
− Tiến hành: hòa tan các thành phần trong nước cất, không làm nóng môi trường. Điều chỉnh về pH= 7,4. Trước khi sử dụng thêm polymyxin E vào để đạt nồng độ 500 µ/ml. Giữ ở nhiệt độ dưới 50C.
Môi trường Thiosulfate-Citrate-Bile Salts-Sucrose Agar ( TCBS ): Môi trường pha sẵn: cân 8,8g TCBS vào bình tam giác có chứa 100ml nước cất vô trùng. Đun sôi cho tan đều (không hấp thanh trùng). Làm nguội khoảng 450C. Đỗ đĩa petri 20ml/đĩa, để nguội. Bảo quản trong tủ lạnh.
Môi trường tự pha:
− Cao nấm men 5g. − Peptone 10g. − Sucrose 20g. − Sodium thiosulfate.75H2O 10g. − Sodium citrate.72H2O 10g. − Sodium cholate 3g. − Oxagall 5g. − NaCl 10g. − Ferric citrate 1g. − Bromothymol blue 0,04g. − Thymol blue 0,04g. − Agar 15g. − Nước cất 1000ml.
− Tiến hành: chuẩn bị trong erlen có thể tích lớn hơn ít nhất 3 lần so với thể tích cần dùng. Cho các chất vào nước cất đã làm ấm và đun nóng để hòa tan. Chỉ để vừa sôi rồi nhắc ra ngay. Không hấp khử trùng. Để nguội đến 500C rồi đổ đĩa.
d) Tiến hành phân tích
Chuẩn bị mẫu: cân 25g mẫu cho vào bao dập mẫu vô trùng, thêm 255ml canh Colistine, đồng nhất mẫu bằng máy dập mẫu, phân phối 10ml dung dịch này vào ống nghiệm vô trùng ủ ở 420+10C/6 – 8 giờ.
Phân lập: chọn những ống sau ủ có kết tủa trắng như những sợi tơ lơ lửng cấy ria lên mặt thạch chọn lọc TCBS, ủ 370+10C/18 – 24 giờ. Khuẩn lạc Vibrio parahaemolyticus điển hình trên môi trường thạch TCBS lớn, đường kính khoảng 3 – 4mm, có màu từ xanh đến xanh dương. Khi gặp khuẩn lạc nghi ngờ thì gửi mẫu sang viện Pasteur thực hiện tiếp các test sinh hóa, kháng huyết thanh và kết luận.