Nấm Fusarium oxysporum ựược phân lập, làm thuần ựược nuôi cấy trên môi trường CLA ựể nhân bào tử.
* Môi trường CLA:
- Agar: 20 g
- Lá cẩm chướng: 4 Ờ 5 mẫu
- Nước cất: 1 l
- Phương pháp ựiều chế: Lá cẩm chướng ựược lấy từ cây cẩm chướng sạch bệnh, cắt thành từng mẩu 5 Ờ 8 mm và sấy ở nhiệt ựộ 300C trong 3 Ờ 9 giờ (ựến khi khô giòn). Những mẫu lá cẩm chướng này ựược ựựng trong hộp nhựa và hấp khử trùng ở 1200C, 1.4 atm, trong vòng 40 phút. Môi trường thạch 0.2% cũng ựược hấp khử trùng ở 1200C, 1.4 atm, trong vòng 40 phút. Môi trường ựược khử
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 26 trùng ựể nguội dần ựến 60 -700C rồi ựổ ra các ựĩa petri nhỏ (ựường kắnh 6cm) ựã có chứa sẵn 4 -5 mẫu lá cẩm chướng khô, bố trắ mỗi ựĩa sao cho lá cẩm chướng dồn vào xung quanh ựĩa và nổi lên trên bề mặt thạch
Các mẫu nấm sau khi ựược cấy trên môi trường CLA ựể phát sinh bào tử ựược ựặt trong tủ ựịnh ôn 28 Ờ 300C, trong thời gian 10 ngày. Khi soi thấy bào tử ựã mọc kắn bề mặt ựĩa thì pha loãng với dung dịch huyền phù.
- Dung dịch huyền phù: 0.5 g Agar + 1l nước cất. Dung dịch cũng ựược hấp khử trùng ở nhiệt ựộ 1200C, 1.4 atm, trong 40 phút.
- Pha loãng dung dịch huyền phù với 10 ựĩa petri nuôi cấy bào tử nấm với nồng ựộ 10ml/ 1 ựĩa. Các ựĩa petri ựã chứa dung dịch huyền phù ựựơc lắc ựều và thu ựược 100ml dung dịch bào tử nấm. Số lưọng dung dịch bào tử nấm này ựược pha loãng với 3 l nước, rồi ựem nhỏ vào giá thể trồng cây mỗi cây 15ml dịch bào tử .
Giá thể bao gồm: 40% ựất + 30% bã nấm + 20% trấu hun + 10% NPK. Giá thể ựược khử trùng qua hai bước
+ Bước 1: sấy khử trùng ở 1210C trong 3 Ờ 5 h.
+ Bước 2: hấp khử trùng ở nhiệt ựộ 1200C, 1.4 atm, trong 40 phút.
Thắ nghiệm ựược bố trắ 10 cây trên 1 lần nhắc lại với 4 dòng: E1 ựã chọn lọc, E1 không chọn lọc, E16 ựã chọn lọc, E16 không chọn lọc.