1. SƠ ĐỒ QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT ENZYME THEO PHƯƠNG
1.2. Theo Phương Pháp Nuơi Cấy Bề Sâu
Quy trình cơng nghệ Vi Sinh Vật Dịch nuơi cấy (mật rỉ) Hấp thanh trùng Trộn giống vi sinh vật Nuơi cấy Amylase thơ
Thuyết minh quy trình
Hấp khử trùng ở nhiệt độ 118 – 125 0C, thời gian 40 – 60 phút, để nguội dến nhiệt độ bình thường và tiếp giống vi sinh vật vào mơi trường, tỷ lệ giống đưa vào là 2 – 2,5 %. Sau đĩ quá trình nuơi cấy được thực hiện theo 2 phương pháp: nuơi cấy theo chu kỳ hay nuơi cấy liên tục.
• Nuơi cấy theo chu kỳ là phương pháp nuơi cấy trong 1 thiết bị lên men. Sau 1 chu kỳ nuơi từ 2 – 4 ngày ở 28 – 320C người ta thu nhận tồn bộ dịch nuơi cấy như là 1 loại chế phẩm enzyme thơ. Phương pháp này khơng địi hỏi kỹ thuật cao nhưng năng suất thấp.
• Nuơi cấy liên tục là để khắc phục tình trạng trên. Quá trình nuơi cấy liên tục cĩ thể nuơi cấy trong 1 thiết bị, cũng cĩ thể thực hiện trong nhiều thiết bị. Phương pháp này cĩ lợi là nếu chất lượng sản phẩm ra cuối cùng ra ta thu nhận đuợc chưa đạt yêu cầu đặt ra ta cĩ thể khắc phục bằng hai cách.
o Cách thứ nhất: làm cho thời gian lưu của dung dịch và tế bào vi sinh vật trong thiết bị lâu hơn.
o Cách thứ hai là: ta tiến hành hồn lưu dịch lên men hịa chung với dịng mơi trường để tái lên men.
1.2.1 Thu nhận sản phẩm
Dung dịch sau khi nuơi cấy theo phương pháp bề sâu được tách khỏi sinh khối và các thành phần khơng hịa tan bằng phương pháp ly tâm. Dịch thu thường chứa 2 –
3% chất khơ hịa tan. Hàm lượng chất này rất nhỏ, do đĩ ta cần phải cơ đặc chúng cho đến khi khối lượng dịch giảm đi 5 – 10 lần ở điều kiện chân khơng.
1.2.2 Ưu và nhược điểm
Ưu điểm:
Phương pháp nuơi cấy hiện đại dễ cơ khí hố, tự động hố, năng suất cao
Cĩ thể nuơi cấy dễ dàng các chủng vi sinh vật đột biến cĩ khả năng sinh tổng hợp enzyme cao và lựa chọn tối ưu thành phần mơi trường, các điều kiện nuơi cấy, enzyme thu được tinh khiết hơn, đảm bảo vơ trùng.
Nhược điểm:
Địi hỏi phải được vơ trùng tuyệt đối ở các khâu vệ sinh tổng hợp, thanh trùng mơi trường dinh dưỡng, thao tác nuơi cấy, khơng khí cung cấp cho quá trình nuơi cấy.
Tốn điện năng cho khuấy trộn, nếu khơng bảo đảm vơ trùng sẽ bị nhiễm hàng loạt, tồn bộ gây tổn thương lớn và thu hồi enzyme sẽ cĩ giá thành cao.