1. SƠ ĐỒ QUY TRÌNH CƠNG NGHỆ SẢN XUẤT ENZYME THEO PHƯƠNG
1.1. Theo Phương Pháp Nuơi Cấy Bề Mặt
Nguyên liệu Xử lý nguyên liệu Hấp thanh trùng Làm nguội Trộn giống vi sinh vật Nuơi cấy
Thu nhận chế phẩm enzyme thơ Chế phẩm enzyme thơ đem tinh chế
Nghiền mịn Trích ly
Lọc Kết tủa
Chế phẩm enzyme tinh khiết Cồn hoặc sulfat amon
Bã
Dùng trong chăn nuơi
Chế phẩm enzyme thơ đem sử dụng Giống cho sản xuất
Nhân giống Giống vi sinh vật
Thuyết minh quy trình
Hấp thanh trùng: dưới áp suất hơi 1-1,5 atm trong thời gian 45-60 phút.
Trộn giống vi sinh vật: Sau khi làm nguội, tiến hành cấy giống hoặc rắc bào tử vào mơi trường đã thanh trùng, ủ thành đống vài giờ. Khi cấy vào mơi trường dinh dưỡng, bào tử sẽ phát triển thành tế bào nấm mốc và tạo ra các loại enzyme mà ta mong muốn.
Kỹ thuật nuơi cấy: Sau khi đã trộn giống, mơi trường được trải đều ra các khay với chiều dài 2-3cm, rồi được đưa vào phịng nuơi cấy ở 28-32oC, khơng cần điều chỉnh pH. Thời gian nuơi nấm sợi thu nhận enzyme vào khoảng 36-60 giờ. Quá trình phát triển của nấm mốc trong mơi trường bán rắn khi nuơi bằng phương pháp bề mặt này trải qua các giai đoạn sau:
• Giai đoạn 1 : giai đoạn này kéo dài 10-14 giờ kể từ thời gian bắt đầu nuơi cấy.
o Nhiệt độ tăng rất chậm.
o Thành phần dinh dưỡng bắt đầu cĩ sự thay đổi.
o Khối mơi trường cịn rời rạc.
o Enzyme mới bắt đầu đươc hình thành.
• Giai đoạn 2: giai đoạn này kéo dài 14-18 giờ.
o Tồn bộ bào tử đã phát triển thành sợi nấm cĩ màu trắng xám
o Mơi trường được kết lại khá chặt.
o Độ ẩm mơi trường giảm dần.
o Nhiệt độ mơi trường sẽ tăng nhanh cĩ thể lên tới 40-45oC.
o Các chất dinh dưỡng bắt đầu giảm nhanh do sự đồng hố mạnh của nấm sợi.
o Enzyme amylase được tổng hợp mạnh.
o Lượng O2 trong khơng khí giảm và CO2 sẽ tăng dần
• Giai đoạn 3 : giai đoạn này kéo dài 10-20 giờ.
o Quá trình trao đổi chất yếu dần, do đĩ mức độ giảm chất dinh dưỡng sẽ chậm lại.
o Nhiệt độ của khối mơi trường giảm, do đĩ làm giảm lượng khơng khí mơi trường xuống 20-25 thể tích khơng khí /thể tích phịng nuơi cấy/ 1giờ.