Chỉ số axit của mỡ cá được xác định theo tiêu chuẩn AOCS Cd 3d-63 (1997) bằng phản ứng chuẩn độ mỡ cá với dung dịch KOH 0,1N, dung môi đồng thể tích isopropyl ancol và toluen, sử dụng chỉ thị phenolphtalein.
Hóa chất dùng trong phương pháp chuẩn độ gồm: dung dịch chuẩn KOH 0,1 N, hỗn hợp dung môi đồng thể tích isopropyl ancol và toluen, dung dịch chỉ thị phenolphtalein 1% trong isopropyl ancol.
Mỗi mẫu dầu được thử nghiệm 3 lần theo các bước sau:
Thêm dung dịch chỉ thị vào hỗn hợp dung môi đồng thể tích isopropyl ancol và toluen theo tỷ lệ (2 ml : 100 ml) rồi trung hòa bằng dung dịch KOH 0,1 N đến màu hồng bền trong 30 giây, được dung dịch A.
Cân lượng mẫu (đã được khuấy trộn đến đồng nhất) vào bình tam giác dung tích 250ml. Thêm 100 ml hỗn hợp dung môi trung hòa và hòa tan mẫu (nếu cần làm ấm để hòa tan).
Thêm vài giọt chỉ thị phenolphtalein và chuẩn độ bằng dung dịch KOH 0,1N đến màu hồng bền trong 30 giây thì ngưng chuẩn độ.
Trung bình sau 15 ngày, thì tiến hành xác định chỉ số axit của mỡ cá trong suốt quá trình làm thí nghiệm.
Khối lượng mỡ cá khi cho vào mỗi lần định phân dựa vào bảng 3.1.
Bảng 3.1: Lượng mẫu cần cân dựa vào chỉ số axit [2]
Chỉ số axit Lượng mẫu cân (g) Độ chính xác (g)
0÷1 20 0,05 1÷4 10 0,02 4÷15 2,5 0,01 15÷75 0,5 0,001 75 trở lên 0,1 0,0002 Cách tính chỉ số axit X (mg KOH/ g) = [ V x N x 56.1] / W N : nồng độ dung dịch KOH (N)
V : thể tích dung dịch KOH chuẩn mẫu, ml W : khối lượng mẫu, g
X : chỉ số axit, mg KOH/g
Kết quả cuối cùng là trung bình cộng của 3 kết quả thử song song được làm tròn đến 2 chữ số có nghĩa. Chênh lệch kết quả giữa 3 lần thử song song không được
quá 0,22 đối với mẫu có chỉ số axit nhỏ hơn 4 hoặc không quá 0.36 đối với mẫu có chỉ số axit lớn hơn 4.