Giai đoạn 1: Chuẩn bị mẫucây làm vật liệu gốc. cây làm vật liệu gốc.
• Chọn cây mẹ để lấy mẫu, thường là
cây ưu việt, khỏe, có giá trị kinh tế
cao.
• Chọn cơ quan để lấy mẫu thường làchồi non, đoạn thân có chồi ngủ, hoa chồi non, đoạn thân có chồi ngủ, hoa non, lá non v.v…
• Mô chọn để nuôi cấy thường là các mô có khả năng tái sinh cao, sạch mô có khả năng tái sinh cao, sạch bệnh, giữ được các đặc tính sinh học quý của cây mẹ và ổn định. Tùy điều kiện, giai đoạn này có thể kéo dài 3 - 6 tháng.
Giai đoạn 2: Khử trùng mẫu, thiếtlập hệ thống nuôi cấy vô trùng. lập hệ thống nuôi cấy vô trùng.
• Khửtrùng bềmặt mẫu vật và chuẩn bị môi trường nuôi cấy.
• Cấy mẫu vô trùng vào môi trường nhân tạo trong ống nghiệm hoặc bình nuôi. Giai đoạn nuôi cấy này gọi là cấy mẫu in vitro.
• Các mẫu nuôi cấy nếu không bịnhiễm khuẩn, nấm hoặc virussẽ được lưu giữtrong phòng với điều kiện nhiệt độ, ánh sáng phù hợp. Sau một thời gian nhất định, từmẫu nuôi cấy bắt đầu xuất hiện các cụm tế bào hoặc cơ quan (chồi, cụm chồi, rễ) hoặc phôi vô tính có đặc tính gần như phôi hữu tính.
• Giai đoạn 2 thường yêu cầu 2 - 12 tháng hoặc ít nhất 4 lần cấy chuyển.
Giai đoạn 3: nhân nhanh chồi
• Thành phần vàđiều kiện môi trường phải
được tối ưuhóa nhằm đạt mục đích nhânnhanh. nhanh.
• Quy trình cấy chuyển để nhân nhanh chồi
khoảng 1- 2 tháng tùy loại cây. Hệsốnhânnhanh là 2 - 8 lần/ 1 lần cấy chuyển. nhanh là 2 - 8 lần/ 1 lần cấy chuyển.
• Giai đoạn 3 thường yêu cầu 10- 36 tháng và
cũng không nên kéo dài quá lâu (sau 7 - 8
lần cấy chuyểnđể tránh biến dị sôma).
Giai đoạn 4: Tạo rễ
- Các chồi hình thành trong quá trình nuôi
cấy có thể phát sinh rễ tự nhiên, nhưng
thông thường các chồi này cần phải cấy
chuyển sang một môi trường khác để
kích thích tạo rễ.
- Ở một số loài khác, các chồi sẽ tạo rễ khiđược chuyển trực tiếp ra đất.