- Salbutamol:
2.2. Tổng quan các phương pháp phân tích Clenbuterol, Salbutamol trong thức
ăn nuơi heo, thịt heo, gan heo bằng phương pháp sắc ký khí ghép khối phổđã
đăng báo:
* Phương pháp phân tích hàm lượng vết Clenbuterol trong các mẫu nước tiểu và mẫu gan: [13]
- Xử lý mẫu gan: mẫu + acetonitril, ly tâm, đuổi khơ dung mơi, hịa tan cặn với đệm phosphate. Clean up bằng cột SPE C18.
- Dẫn xuất: BSTFA + 1% hay 10% TMCS hoặc MSTFA + 1% hay 10% TMCS
- Sử dụng máy: Trace GC 2000 series ghép với đầu dị MS (EI) Finnigan Polaris (Thermo Quest).
- Các ion xác nhận m/z: 243, 262, 264, 333
- Hiệu suất thu hồi: 83-94%
- Giới hạn phát hiện: 0,5 ng/g
* Phương pháp phân tích hàm lượng Clenbuterol trong thịt, gan, thận, phổi heo sử dụng kỹ thuật thủy phân acid và clean up mẫu bằng cột SCX [12]
- Xử lý mẫu: mẫu + acid perchloric, đánh siêu âm. Lọc. Chỉnh pH với sodium
hydroxide. Thêm vào mẫu sodium chloride, isopropanol, ethyl acetate. Đuổi khơ dung mơi. Hịa tan cặn với đệm phosphate. Clean up mẫu bằng cột SCX.
- Dẫn xuất: 1% TMCS + BSTFA hoặc HFBA hoặc BBA
- Sử dụng máy: GC-SIMMS
- Các ion xác nhận m/z: cho BSTFA: 86, 243, 262, 277
cho HFBA: 363, 398, 439, 456
cho BBA: 243, 245, 327, 329
- Hiệu suất thu hồi: > 73,4%
* Phương pháp phân tích ractopamin và clenbuterol trong thức ăn gia súc bằng kỹ thuật sắc ký khí ghép khối phổ. [30]
- Xử lý mẫu: mẫu + perchloric acid, lắc, ly tâm. Chỉnh pH mẫu với ammonium
hydroxide. Thêm vào ethyl acetate, isopropyl alcohol. Đuổi khơ dung mơi. Hịa tan cặn bằng đệm ammonium acetate, clean up mẫu bằng cột SCX.
- Dẫn xuất: BSTFA + TMS
- Sử dụng máy: Perkin Elmer GC ghép Perkin Elmer Turbomass MS
- Các ion xác nhận m/z: 86, 243, 262, 277
- Hiệu suất thu hồi: 64,6-83,8 %
- Giới hạn phát hiện: 4 ppb
* Phương pháp phân tích Clenbuterol, salbutamol trong nước tiểu heo bằng kỹ thuật sắc ký khí ghép khối phổ: [36]
- Xử lý mẫu: mẫu + đệm phosphate, ly tâm, clean up SPE NARC-2.
- Dẫn xuất: BSTFA + 1% TMCS
- Sử dụng máy: Trace GC 2000 series ghép với đầu dị MS (EI) Finnigan Polaris (Thermo Quest).
- Các ion xác nhận m/z: 262, 188, 225, 227
- Hiệu suất thu hồi: 70%
- Giới hạn phát hiện: 0,022 ppb (Clenbuterol), 0,024 ppb (salbutamol)
* Phương pháp phân tích Clenbuterol trong nước tiểu người bằng kỹ thuật sắc ký khí ghép khối phổ: [37]
- Xử lý mẫu: mẫu + nội chuẩn methyltestosterone cho qua cột C18 Sep-Pak. Hĩa hơi dung dịch rửa giải methanol. Thủy phân bằng enzyme bằng cách thêm vào mẫu đệm
phosphate và ß-glucoronidase từ E.Coli, ủ mẫu ở nhiệt độ 50oC trong 1 giờ. Chỉnh pH mẫu về 9,2 với đệm carbonate, đem tạo dẫn xuất. - Dẫn xuất: MSTFA-NH4I-DTE - Sử dụng máy: GC/MS/MS/MS - Các ion xác nhận m/z: 335- 337 —300 - Giới hạn phát hiện: 0,2 ppb 2.3. Sơ lược về kỹ thuật sắc ký khí:
Sắc ký khí là phương pháp phân tích phổ biến hiện nay. Nguyên tắc hoạt động của nó có thể được thể hiện qua sơ đồ sau:
Hình 2.1: Sơ đồ hệ thống sắc ký khí
Mẫu được bơm vào trong và theo dòng khí mang (khí mang thường là N2) đưa đến
cột sắc ký mao quản. Cột sắc ký mao quản là một cuộn ống nhỏ, đường kính khoảng 0.25- 0.53 mm, phía trong được áo lên một lớp mỏng pha tĩnh. Mẫu khi qua cột này sẽ được hấp phụ lên trên pha tĩnh đó. Sau đó, các chất lần lượt tách khỏi cột theo dòng khí ra ngoài và được ghi nhận bởi đầu dò. Từ các tín hiệu nhận được máy tính sẽ xử lý và biểu hiện kết quả bằng sắc ký đồ. Với cột ít phân cực, đa số các chất tách ra khỏi cột theo độ bay hơi của từng chất. Và các chất được xác định bởi
giá trị thời gian lưu trên sắc ký đồ. Nhưng điểm hạn chế của sắc ký khí này là đôi khi ta không thể phát hiện nếu các chất chập trong một mũi.
Trong sắc ký khí cĩ nhiều lọai đầu dị FID, ECD (electron capture detector), NPD,
PDFP, sắc ký khí ghép với khối phổ GC/MS.