lên khả năng tạo biofilm của các chủng vi khuẩn
3.1.1.1. Ảnh hưởng của pH lên khả năng tạo biofilm của các chủng vi khuẩn chọn lựa
Các chủng vi khuẩn B2, B8, B15 và B16 có khả năng phân hủy các hợp chất PAH, phenol hoặc dầu diesel và tạo màng sinh học tốt, đã được tiến hành phân loại và định tên. Các chủng này đã được tiến hành đánh giá ảnh hưởng của pH lên khả năng tạo biofilm với các giá trị pH6 đến 9, kết quả như sau (Hình 3.1):
Hình 3.1. Ảnh hưởng của các giá trị pH lên khả năng tạo màng của các chủng vi khuẩn lựa chọn
Trong đó, giá trị hấp thụ được quy đổi từ giá trị đo OD ở bước sóng 570nm theo công thức đã được trình bày ở phần phương pháp.
Kết quả trên hình 1 cho thấy, các chủng B2, B8 và B15 tạo màng tốt nhất ở giá trị pH7, còn chủng B16 tạo màng tốt nhất ở pH9 (Hình 3.2, 3.3, 3.4 và 3.5):
Hình 3.2. Biofilm của chủng B2 ở pH khác nhau (48h)
pH=6 pH=7 pH=8 pH=9 K
31
Hình 3.3. Biofilm của chủng B8 ở pH khác nhau (48h)
Hình 3.4.Biofilm của chủng B15 ở pH khác nhau (48h)
Hình 3.5.Biofilm của chủng B16 ở pH khác nhau (48h)
3.1.1.2. Ảnh hưởng của NaCl lên khả năng tạo biofilm của các chủng vi khuẩn chọn lựa
Tiến hành đánh giá ảnh hưởng của NaCl lên khả năng tạo biofilm của các chủng vi khuẩn chọn lựa. Chúng tôi đã lựa chọn các nồng độ NaCl gồm: 0; 0,5; 1 và 1,5%. Kết quả được thể hiện ở hình 3.6:
K pH=6 pH=7 pH=8 pH=9
K pH=6 pH=7 pH=8 pH=9
32
Hình 3.6. Ảnh hưởng của NaCl lên khả năng tạo biofilm của các chủng VK Kết quả trên hình 3.6 cho thấy, chủng B2 và B8 có khả năng tạo màng tốt nhất khi được nuôi cấy với nồng độ NaCl 0,5%; trong khi chủng B15 lại có khả năng thích nghi được với tất cả các nồng độ NaCl từ 0 đến 1,5%; còn chủng B16 tạo màng tốt nhất ở nồng độ NaCl là 0% (Hình 3.7, 3.8, 3.9 và 3.10).
Hình 3.7.Biofilm của chủng B2 ở các nồng độ NaCl khác nhau (48h)
Hình 3.8. Biofilm của chủng B8 ở các nồng độ NaCl khác nhau (48h)
NaCl 0% NaCl 0,5% NaCl 1% NaCl 1,5% K NaCl 0% NaCl 0,5% NaCl 1% NaCl 1,5% K
33
Hình 3.9. Biofilm của chủng B15 ở các nồng độ NaCl khác nhau (48h)
Hình 3.10. Biofilmcủa chủng B16 ở các nồng độ NaCl khác nhau (48 h)
3.1.1.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ lên khả năng tạo biofilm của các chủng vi khuẩn chọn lựa
Nhằm định hướng ứng dụng trong các môi trường khác nhau, chúng tôi đã tiến hành đánh giá ảnh hưởng của nhiệt độ lên khả năng tạo biofilm của các chủng vi khuẩn chọn lựa. Chúng tôi đã chọn các giá trị nhiệt độ 4, 20, 25, 30, 35, 40 và 50oC để thí nghiệm. Kết quả được trình bày trong hình 3.11.
Hình 3.11. Ảnh hưởng của nhiệt độ lên khả năng tạo biofilm của các chủng vi khuẩn Kết quả cho thấy, các chủng B15 và B16 đều tạo biofilm tốt nhất ở nhiệt độ 30oC; chủng B8 tạo biofilm tốt trong dải nhiệt độ từ 25 - 35oC; còn chủng B2 có khả
NaCl 0% NaCl 0,5% NaCl 1% NaCl 1,5% K NaCl 0% NaCl 0.5% NaCl 1% NaCl 1.5% K
34
năng tạo biofilm tốt cả ở giải nhiệt độ từ 30 - 50oC. Kết quả này cho phép chúng tôi tiến hành thử nghiệm chủng B2 ở điều kiện nhiệt độ cao hơn.
3.1.2. Ảnh hưởng của các điều kiện hóa lý như pH, nồng độ NaCl, nhiệt độ, … lên khả năng tạo biofilm của các chủng nấm men lên khả năng tạo biofilm của các chủng nấm men
3.1.2.1. Ảnh hưởng của pH lên khả năng tạo biofilm của các chủng nấm men chọn lựa
Các chủng vi khuẩn TH1 và TH4 có khả năng phân hủy dầu diesel và tạo màng sinh học tốt, đã được tiến hành phân loại và định tên. Các chủng này đã được tiến hành đánh giá ảnh hưởng của pH lên khả năng tạo biofilm với các giá trị pH3 đến 7. Sở dĩ chúng tôi chọn các giá trị pH từ 3 đến 7 vì theo các tài liệu nghiên cứu, nấm men thường sinh trưởng và phát triển tốt ở pH5 hoặc 5,5. Kết quả chúng tôi thu được như sau (Hình 3.12):
Hình 3.12. Ảnh hưởng của pH lên khả năng tạo biofilm của các chủng NM
Từ kết quả trên hình 3.12, chúng tôi nhận thấy, chủng TH4 có thể tạo biofilm tốt ở tất cả các giá trị pH đã thử nghiệm. Tuy nhiên, khi pH môi trường bằng 7, khả năng tạo biofilm đã giảm đi rõ rệt. Còn chủng TH1 lại có khả năng tạo biofilm tốt ở các giá trị pH 5, 6 và 7 (Hình 3.13 và 3.14). Các kết quả này sẽ được chúng tôi sử dụng cho các nghiên cứu tiếp theo.
Hình 3.13.Biofilm của chủng TH1 ở pH khác nhau (48h)
35
Hình 3.14. Biofilm của chủng TH4 ở pH khác nhau (48h)
3.1.2.2. Ảnh hưởng của nồng độ NaCl lên khả năng tạo biofilm của các chủng nấm men chọn lựa
Tiến hành đánh giá ảnh hưởng của NaCl lên khả năng tạo biofilm của các chủng nấm men chọn lựa. Chúng tôi đã lựa chọn các nồng độ NaCl gồm: 0; 0,5; 1; 1,5 và 2%. Kết quả được thể hiện ở hình 3.15:
Hình 3.15. Ảnh hưởng của nồng độ NaCl lên khả năng tạo biofilm của các chủng nấm men
Kết quả trên hình 3.15 cho thấy, chủng TH1 có khả năng tạo màng tốt nhất khi được nuôi cấy với nồng độ NaCl 1,5%; trong khi chủng TH4 lại có khả năng thích nghi được với tất cả các nồng độ NaCl từ 0,5 đến 1,5%. Sở dĩ các chủng này có khả năng tạo biofilm tốt ở nồng độ NaCl lên tới 1,5% là do các chủng nấm men này được phân lập từ các mẫu lấy từ vùng biển Nghi Sơn, Thanh Hóa, nên chúng có thể chịu được nồng độ NaCl cao.
36
3.1.2.3. Ảnh hưởng của nhiệt độ lên khả năng tạo biofilm của các chủng nấm men chọn lựa
Chúng tôi cũng lựa chọn các giá trị nhiệt độ 4; 20, 25, 30, 35, 40 và 50oC để kiểm tra ảnh hưởng của nhiệt độ lên khả năng tạo biofilm của hai chủng nấm men TH1 và TH4. Kết quả được thể hiện trong hình 3.16:
Hình 3.16. Ảnh hưởng của nồng độ NaCl lên khả năng tạo biofilm của các chủng nấm men
Kết quả cho thấy, chủng TH1 tạo màng tốt ở nhiệt độ 30 - 35oC còn chủng TH4 tạo màng ở 30oC.
KẾT LUẬN
Từ các chủng vi khuẩn đã lựa chọn ở các chuyên đề trước, chúng tôi đã xác định được ảnh hưởng của một số yếu tố như pH, nồng độ NaCl và nhiệt độ lên khả năng tạo biofilm như sau:
- Chủng B2 tạo biofilm tốt ở pH 7 với nồng độ NaCl là 0,5% và ở giải nhiệt độ từ 30 - 50oC.
- Chủng B8 tạo biofilm tốt ở pH 7 với nồng độ NaCl là 0,5% và ở giải nhiệt độ 25 - 35oC.
- Chủng B15 tạo biofilm tốt ở pH 7 với nồng độ NaCl là 1,5% và ở nhiệt độ 30oC.
- Chủng B16 tạo biofilm tốt ở pH 9 với nồng độ NaCl là 0% và ở nhiệt độ 30oC. Chúng tôi cũng đã xác định được ảnh hưởng của một số yếu tố như pH, nồng độ NaCl và nhiệt độ lên khả năng tạo biofilm của các chủng nấm men lựa chọn như sau:
- Chủng TH1 tạo biofilm tốt ở pH 5, 6 và 7; với nồng độ NaCl là 1,5% và ở nhiệt độ từ 30 - 35o
37
- Chủng TH4 tạo biofilm tốt ở tất cả các giá trị pH thử nghiệm nhỏ hơn 7, với nồng độ NaCl từ 0,5 đến 1,5% và ở nhiệt độ 30oC.
38