- Môi trường được phân vào bình tam giác 1lit (độ thoáng khí là 1/5) và
3.2.2.Nghiên cứu ảnh hưởng của p H:
CHƯƠNG III: KẾT QUẢ
3.2.2.Nghiên cứu ảnh hưởng của p H:
Trong thí nghiệm nghiên cứu ảnh hưởng của pH môi trường lên khả
năng sinh trưởng và sinh polysaccharide của chủng nấm men Lipomyces PT 5.1, chúng tôi đã khảo sát ở các độ pH 4, 5, 6, 7 và 8. Thí nghiệm được tiến hành trong các bình tam giác 250ml có chứa 50ml môi trường, nuôi lắc 220 v/p ở 28 – 30oC (tỷ lệ thoáng khí 1/5 v:v), thời gian nuôi cấy là 168h. Kết quả
Khoa Công nghệ Sinh Học Vi29 ện Đại Học Mở Hà Nội
A: pH = 4,0 B: pH = 5,0 C: pH = 6,0 D: pH = 7,0
Hình 3a: Ảnh hưởng của độ pH lên khả năng sinh polysaccharide của chủng nấm men L. starkeyi PT 5.1
E: pH = 8,0 F: Môi trường Hansen
Hình 3b: Ảnh hưởng của độ pH lên khả năng sinh polysaccharide của chủng nấm men L. starkeyi PT 5.1
Kết quả cho thấy, ở dải pH từ 4 đến 7, chủng nấm men này đều có khả
năng sinh trưởng và sinh màng nhầy. Đặc biệt, trong quá trình phát triển, nó còn làm giảm pH môi trường. Điều đó chứng tỏ rằng, trong quá trình nuôi
Khoa Công nghệ Sinh Học Vi30 ện Đại Học Mở Hà Nội cấy, môi trường bị axit hoá, làm khả năng nhiễm tạp vi khuẩn thấp nên rất thuận lợi cho nuôi cấy ở quy mô sản xuất lớn. Ở môi trường có pH=7 hàm lượng polysaccharide được sinh ra là cao nhất: 9,27 g/l . Riêng ở môi trường có độ pH=8, chủng nấm men này sinh trưởng rất yếu (nhìn bằng mắt thường -hình 3b- môi trường sau khi nuôi cấy so với môi trường ban đầu không có sự
thay đổi – dịch nuôi cấy trong), lượng sinh khối tế bào sau khi sấy khô chỉ
bằng khoảng 1/10 lượng sinh khối tế bào ở các pH khác. Điều này phù hợp với nghiên cứu của Babieva và Gorin năm 1978 rằng Lipomyces sinh trưởng
được ở pH từ 4 đến 7 [1]. Vì vậy, chúng tôi chọn pH môi trường ban đầu bằng 7 cho các nghiên cứu tiếp theo.
Bảng 2: Ảnh hưởng của độ pH lên khả năng sinh trưởng và sinh polysaccharide của chủng nấm men L.starkeyi PT 5.1
pHMT ban đầu Chỉ tiêu phân tích.
4 5 6 7 8
pH sau lên men
3 3,5 4 4,5 8 Polysaccharide sấy khô 80oC (g/l) 6,21 6,32 7,57 9,27 0 Sinh khối (tế bào đã loại bỏ màng nhầy) sấy khô 105oC (g/l) 8,42 9,21 9,31 9,07 1,08
Khoa Công nghệ Sinh Học Vi31 ện Đại Học Mở Hà Nội 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 4 5 6 7 8
pH môi trường ban đầu
g /l Polysaccharide sấy khô 80oC (g/l) Sinh khối (tế bào đã loại bỏ màng nhầy) sấy khô 105oC (g/l)
Hình 3c: Ảnh hưởng của độ pH lên khả năng sinh polysaccharide của chủng nấm men L. starkeyi PT 5.1