Nghiờn cứu biện phỏp phũng, trị bệnh giun đũa bờ, nghộ

2.3.3.1. Xỏc định tỏc dụng của một số chất sỏt trựng đối với trứng giun đũa và trứng cú sức gõy bệnh.

2.3.3.2. Xỏc định cụng thức thức ủ phõn cú khả năng sinh nhiệt cao để diệt trứng giun đũa bờ nghộ.

2.3.3.3. Xỏc định hiệu lực của một số thuốc tẩy giun đũa bờ, nghộ. 2.3.3.4. Đề xuất quy trỡnh phũng, trị bệnh giun đũa cho bờ, nghộ.

2.4. Bố trớ thớ nghiệm và phương phỏp nghiờn cứu

2.4.1. Bụ́ trớ điều tra và phương phỏp nghiờn cứu đặc điểm dịch tễ bệnh giun đũa bờ, nghộ ở hai huyện của tỉnh Thanh Húa

2.4.1.1. Bố trớ điều tra và phương phỏp nghiờn cứu tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ nghộ dưới 3 thỏng tuổi.

* Bụ́ trớ điều tra:

Mẫu được thu thập theo phương phỏp lấy mẫu chựm nhiều bậc. Chỳng tụi đã thu thập và xột nghiệm phõn của 888 bờ, nghộ dưới 3 thỏng tuổi tại 2 huyện của tỉnh Thanh Húa.

+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa bờ, nghộ tại 2 huyện của tỉnh Thanh Húa.

Việc thu thập, xột nghiệm mẫu phõn bờ, nghộ ở 2 huyện đã được bố trớ cụ thể như sau:

Địa phương (Huyện, xó) Số bờ nghộ xột nghiệm phõn (con)

Đụng Sơn Đụng KhờĐụng Ninh 155143

Đụng Minh 134

Triệu Sơn Dõn LýDõn Quyền 163139

Hợp Thắng 154

Tớnh chung 888

+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo địa hỡnh.

Địa hỡnh được đỏnh giỏ theo 2 loại - Địa hỡnh bằng phẳng, cao rỏo.

- Địa hỡnh xen kẽ đồi nỳi và ruộng nước. Sơ đồ bố trớ lấy mẫu như sau:

Địa hỡnh Địa phương

Đụng Sơn (con)

Triệu Sơn (con)

Địa hỡnh cao rỏo bằng phẳng 214 226

Địa hỡnh xen kẽ với đồi nỳi và ruộng nước 218 230

Tớnh chung 432 456

+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo mựa vụ.

Mựa vụ trong năm được theo dừi gồm:

- Vụ Đụng - Xuõn : Từ thỏng 10 - thỏng 3 năm sau. - Vụ Hố - Thu: Từ thỏng 4 - thỏng 9.

Chỳng tụi đã theo dừi ở hai mựa vụ, bờ nghộ tương đối đồng đều về tuổi, tớnh biệt, điều kiện chăm súc nuụi dưỡng.

Mựa vụ Địa phương

Đụng Sơn (Con) Triệu Sơn (Con)

Đụng - Xuõn 210 225

Hố - Thu 222 231

Tớnh chung 432 456

+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo tỡnh trạng vệ sinh chuồng nuụi.

Số mẫu đã được thu thập như sau:

Tỡnh trạng vệ sinh Địa phương

Đụng Sơn (Con) Triệu Sơn (Con) Tốt 128 150 Trung bỡnh 164 152 Kộm 140 154 Tớnh chung 432 456

+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo tuổi.

Chỳng tụi đã theo dừi bờ, nghộ ở 5 lứa tuổi và lặp lại 2 lần tại 2 huyện Đụng Sơn và Triệu Sơn. Bờ, nghộ cỏc lứa tuổi tương đối đồng đều về tớnh biệt, điều kiện chăm súc nuụi dưỡng, trong cựng một mựa vụ, được bố trớ theo sơ đồ sau:

Tuổi bờ, nghộ Địa phương

Đụng Sơn (Con) Triệu Sơn (Con) <15 84 84 >15-30 86 95 >30-45 81 86 >45-60 94 98 >60-90 87 93 Tớnh chung 432 456

+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ theo tớnh biệt.

Tớnh biệt Địa phương

Đụng Sơn (Con) Triệu Sơn (Con) Đực 218 224 Cỏi 214 232 Tớnh chung 432 456

+ Bố trớ điều tra tỡnh hỡnh nhiễm giun đũa theo loại gia sỳc.

Loại gia sỳc Địa phương

Đụng Sơn (Con) Triệu Sơn (Con) Bờ 219 231 Nghộ 213 225 Tớnh chung 432 456

* Phương phỏp xột nghiệm mẫu.

Xột nghiệm mẫu bằng phương phỏp Fulleborn.

Sử dụng dung dịch NaCl bóo hoà để làm nổi trứng giun đũa bờ, nghộ. Soi trứng giun đũa trờn kính hiờ̉n vi có đụ̣ phóng đại 100 lõ̀n.

* Phương pháp đờ́m trứng giun đũa bằng buụ̀ng đờ́m McMaster: .

Cường độ nhiễm giun đũa Neoascaris vitulorum được đỏnh giỏ bằng số lượng trứng /gam phõn:

< 500 trứng /gam phõn : nhiễm nhẹ (+)

500 - 800 trứng /gam phõn : nhiễm trung bỡnh (++) 800 - 1200 trứng /gam phõn : nhiễm nặng (+++) > 1200 trứng /gam phõn : nhiễm rṍt nặng (++++)

Số trứng /gam phõn được đếm bằng phương phỏp Mc Master: Cõn 4 gam phõn cho vào cốc thuỷ tinh, thờm 56 ml dung dịch nước muối bóo hoà, khuấy đều cho tan phõn. Lọc qua lưới thộp vào một cốc khỏc và khuấy đều.

Trong khi đang khuấy dừng lại đụ̣t ngụ̣t và lấy cụng tơ gỳt hỳt dung dịch phõn nhỏ đầy cả hai buồng đếm Mc Master (mỗi buồng đếm cú dung tớch 0,5 ml), để yờn 5 phỳt rồi kiểm tra dư ới kớnh hiển vi quang học (độ phúng đại 100 lõ̀n). Đếm toàn bộ số trứng trong những ụ của 2 buồng đếm.

Số trứng /1 gam phõn =

(Tổng số trứng ở hai buồng đếm là số trứng cú trong 1,0 ml dung dịch phõn).

2.4.1.2. Bố trớ điều tra và phương phỏp nghiờn cứu sự phỏt triển của trứng giun đũa bờ, nghộ và khả năng sống của trứng cú sức gõy bệnh ở ngoại cảnh.

+ Bố trớ điều tra và phương phỏp nghiờn cứu tỡnh trạng ụ nhiễm trứng giun đũa bờ, nghộ ở chuồng nuụi, khu vực xung quanh chuồng nuụi.

* Phương phỏp thu thập mẫu:

- Mẫu đất hoặc cặn nền chuồng nuụi bờ, nghộ: tại mỗi ụ chuồng, lấy mẫu đất (cặn) ở 4 gúc chuồng và ở giữa chuồng, trộn đều được một mẫu xột nghiệm (khoảng 80 - 100 gam/mẫu). Mỗi mẫu được để riờng trong tỳi nilon cú nhón ghi: loại mẫu, địa điểm và thời gian lấy mẫu.

- Mẫu đất bề mặt khu vực xung quanh chuồng: lấy mẫu đất bề mặt tương tự như cỏch lấy mẫu cặn nền chuồng.

∑ số trứng ở hai buồng đếm x 60

* Sụ́ mẫu đã thu thập:

Địa phương ( Huyện-Xó) Số mẫu thu thập

Nền chuồng Xung quanh nền chuồng Đụng Sơn Đụng Khờ 31 30 Đụng Ninh 33 29 Đụng Minh 28 28 Triệu Sơn Dõn Lý 29 30 Dõn Quyền 28 29 Hợp Thắng 31 33

* Phương phỏp xột nghiệm mẫu:

Xột nghiệm bằng phương phỏp Fulleborn để phỏt hiện trứng giun đũa bờ nghộ .

+ Bố trớ điều tra và phương phỏp nghiờn cứu sự tồn tại trứng giun đũa bờ, nghộ ở khu vực bói chăn thả.

* Phương phỏp thu thập mẫu ở khu vực bãi chăn thả:

- Mẫu đất bề mặt ở khu vực bói chăn thả bờ, nghộ: tại mỗi khu vực chăn thả, cứ khoảng 20-30 m2 lấy ngẩu nhiờn ở vị trớ 4 gúc và giữa trộn đều được một mẫu xột nghiệm (khối lượng khoảng 80 - 100 g/mẫu). Mỗi mẫu được để riờng trong tỳi nilon cú nhón ghi: loại mẫu, địa điểm và thời gian lấy mẫu.

- Mẫu nước ở những vũng nước trờn khu vực bói chăn thả: dựng que khuấy đều vũng nước, lấy cốc thuỷ tinh mỳc khoảng 150 - 200 ml/vũng, cho vào tỳi nilon nhỏ, cú nhón ghi loại mẫu, địa điểm và thời gian lấy mẫu.

* Số mẫu đã thu thập:

Địa phương Số mẫu thu thập

Đất bề mặt Vũng nước đọng

Đụng Sơn Đụng KhờĐụng Ninh 3227 3227

Đụng Minh 29 29

Triệu Sơn Dõn LýDõn Quyền 2329 2329

Hợp Thắng 34 34

* Phương phỏp xột nghiệm mẫu:

Xột nghiệm mẫu bằng phương phỏp Fulleborn để phỏt hiện trứng giun

đũa bờ, nghộ.

+ Bố trớ điều tra và nghiờn cứu sự phỏt triển của trứng , khả năng sống của trứng cú sức gõy bệnh trong phõn.

* Phương phỏp thu thập mẫu:

Thu thập mẫu phõn của những bờ, nghộ nhiễm giun đũa cường độ nhiễm nặng (mỗi mẫu 300 - 400 gam)

* Phương phỏp bố trớ thớ nghiệm:

- Lụ 1: Cho phõn bờ nghộ nhiễm giun đũa nặng vào 5 chậu nhựa đường kớnh 20 cm, cao 10 cm (mỗi chậu 300 - 400 gam, cú dỏn nhón ghi ngày thỏng theo dừi ) để tự nhiờn ở điều kiện nhiệt độ và ẩm độ khụng khớ bỡnh thường.

- Lụ 2: cũng bố trớ như lụ 1, Nhưng khỏc là: hàng ngày bổ sung nước để duy trỡ mẫu phõn luụn trong trạng thỏi ướt nhóo.

* Phương phỏp theo dừi sự phỏt triển của trứng giun đũa bờ ghộ:

5gam phõn, xột nghiệm bằng phương phỏp Fulleborn để kiểm tra sự phỏt triển trứng giun đũa bờ nghộ. Đếm số trứng /vi trường/mẫu, đếm số trứng cú sức gõy bệnh/vi trường/mẫu. Từ đú xỏc định được thời gian phỏt triển của trứng và xỏc định được thời gian sống của trứng cú sức gõy bệnh ở ngoại cảnh. Mụ tả sự phỏt triển của trứng trong quỏ trỡnh theo dừi.

2.4.2. Phương phỏp nghiờn cứu bệnh lý và lõm sàng của bờ, nghộ bị bệnh giun đũa.

2 . 4 . 2 . 1. Bố trớ xỏc định vai trũ của giun đũa trong hội chứng tiờu chảy ở bờ, nghộ..

 Phương phỏp bố trớ

Chỳng tụi đã thu thập mẫu phõn bờ, nghộ khỏe và bờ, nghộ tiờu chảy tương đương nhau về lứa tuổi, cựng mựa vụ, ở cỏc địa phương cú địa hỡnh tương tự nhau.

* Phương phỏp xỏc định:

Xột nghiệm phõn bằng phương phỏp Fulleborn để xỏc định tỷ lệ và cường độ nhiễm giun đũa bờ, nghộ. Từ đú xỏc định được tỷ lệ bờ, nghộ khoẻ và bờ, nghộ tiờu chảy bị nhiễm giun đũa và cường độ nhiễm ở bờ nghộ cú trạng thỏi phõn khỏc nhau, từ đó đỏnh giỏ được vai trũ của giun đũa trong hụ̣i chứngtiờu chảy của bờ nghộ.

2.4.2.2. Bố trớ theo dừi triệu ch ứnglõm sàng của bờ, nghộ bị bệnh giun đũa

* Phương phỏp bố trớ

Trong quỏ trỡnh xột nghiệm phõn, đó phỏt hiện được những bờ, nghộ nhiễm giun đũa. Chọn những bờ, nghộ chỉ nhiễm giun đũa, khụng nhiễm bất cứ loại giun sỏn và bệnh truyền nhiễm nào khỏc, theo dừi cỏc biểu hiện lõm sàng của những bờ, nghộ này.

* Phương phỏp theo dừi

nhiệt kế 430C, quan sỏt thể trạng, lụng, da; quan sỏt màu sắc cỏc niờm mạc; theo dừi màu sắc, trạng thỏi và mựi phõn, số lần đi ỉa trong ngày; tỡnh trạng ăn uống...

2.4.3. Bụ́ trớ thớ nghiệm và phương phỏp nghiờn cứu biện phỏp phũng trị bệnh giun đũa bờ, nghộ.

2.4.3.1. Phương phỏp xỏc định khả năng diệt trứng và trứng cú sức gõy bệnh

của chất sỏt trựng Virkon S 2% và Ominicide 1%.

* Bố trớ thớ nghiệm:

Những mẫu phõn nhiễm giun đũa bờ, nghộ nặng được dàn mỏng rong 5 khay men thành lớp dày 0,3 - 0,5cm. Phun thuốc sỏt trựng theo liờ̀u

khuyờ́n cáo lờn lớp phõn trong khay men.

* Phương phỏp theo dừi:

Mỗi ngày lấy khoảng 3 - 5 gam phõn trong khay men, xột nghiệm tỡm trứng để xỏc định khả năng diệt trứng của chất sỏt trựng.

Cũng làm như vậy với mẫu phõn đó nuụi để trứng phỏt triển thành trứng cú sức gõy bệnh.

2.4.3.2. Phương phỏp xỏc định cụng thức ủ phõn cú khả năng sinh nhiệt tốt nhất để diệt trứng giun đũa bờ nghộ.

* Bố trớ thớ nghiệm:

- Chuẩn bị nguyờn liệu ủ, bố trớ ủ theo 3 cụng thức, mỗi cụng thức ủ vụi bột và tro bếp sử dụng.

+ Cụng thức 1: Cỏc nguyờn liệu ủ được chuẩn bị theo tỷ lệ: - Phõn chuồng: 800 - 1000 kg.

- Lỏ xanh băm nhỏ: 200 kg. - Tro bếp: 80 kg.

+ Cụng thức 2: Cỏc nguyờn liệu ủ được bố trớ theo tỷ lệ: - Phõn chuồng: 800 - 1000 kg.

- Lỏ xanh băm nhỏ: 200 kg. - Tro bếp: 0 kg.

- Vụi bột: 60 kg.

+ Cụng thức 3: Cỏc nguyờn liệu ủ được bố trớ theo tỷ lệ: - Phõn chuồng: 800 - 1000 kg.

- Lỏ xanh băm nhỏ: 200 kg. - Tro bếp: 30 kg.

- Vụi bột: 40 kg.

- Cỏch ủ phõn: trộn đều cỏc nguyờn liệu trong mỗi cụng thức ủ, cho vào mỗi bao nilon 20 kg hỗn hợp nguyờn liệu đó trộn của mỗi cụng thức trờn.

Trộn 5kg phõn của bờ, nghộ nhiễm giun đũa nặng với cỏc nguyờn liệu khỏc (lỏ xanh băm nhỏ, tro bếp, vụi bột) theo tỷ lệ Như 3 cụng thức, sau đú chia vào cỏc tỳi vải nhỏ (mỗi tỳi 10 - 15 g), đặt vào trong cỏc bao phõn ủ (ở cỏc vị trớ khỏc nhau). Buộc kớn miệng bao để tạo mụi trường yếm khớ trong bao.

* Phương phỏp theo dừi:

Hàng ngày dựng nhiệt kế 1000C đo nhiệt độ phõn ủ, đồng thời lấy ra 3 tỳi vải để xột nghiệm trứng giun đũa bờ nghộ. Từ đú xỏc định được khả năng sinh nhiệt của mỗi cụng thức ủ và tỏc dụng diệt trứng giun đũa bờ, nghộ.

2.4.3.3. Phương phỏp sử dụng thuốc tẩy giun đũa bờ, nghộ

* Bố trớ thớ nghiệm:

Sau khi xột nghiệm phõn, phỏt hiện được những bờ, nghộ bị nhiễm giun đũa, chỳng tụi chọn ra những bờ, nghộ nhiễm với cường độ nặng và rất nặng để sử dụng một số thuốc tẩy giun đũa. Liều lượng sử dụng được dựng

theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Lụ thớ nghiệm Tờn thuốc Thành phần của thuốc Số bờ nghộ dựng thuốc (Con) Thời gian xột nghiệm phõn bờ nghộ sau tẩy (Con) LụI Bivermectin 1% Ivermectin 15 8

LụII Levavet Levamisol 15 8

LụIII Dectomax Doramectin 14 8

* Phương phỏp theo dừi:

Trước khi dựng thuốc, xỏc định cường độ nhiễm bằng cỏch đếm số trứng giun/gam phõn. Sau khi dựng thuốc 15 ngày, xỏc định hiệu lực thuốc bằng phương phỏp xột nghiệm lại phõn bờ, nghộ tỡm trứng giun và đếm số trứng giun/gam phõn.

Để đỏnh giỏ độ an toàn của thuốc, chỳng tụi xỏc định một số chỉ tiờu sinh lý trước và sau khi dựng thuốc 1 giờ.

2.5. PHƯƠNG PHÁP XỬ Lí SỐ LIỆU

Số liệu thu thập được xử lý trờn phần mềm Excel 2003 theo phương phỏp nghiờn cứu trong chăn nuụi (Nguyễn Văn Thiện, 1997) để tớnh cỏc tham số thống kờ.

2.5.1. Đụ́i với cỏc tớnh trạng định tớnh như: tỷ lệ nhiễm, cường độ nhiễm giun đũa được tớnh theo cụng thức:

2.5.2. Đụ́i với cỏc tớnh trạng định lượng như sụ́ lượng trứng và sụ́ lượng trứng cú sức gõy bệnh giun đũa bờ nghé được tớnh theo cụng

thức:

2.5.3 So sỏnh mức độ sai khỏc giữa sai số trung bỡnh - Đối với cỏc tớnh trạng định lượng cỏc bước tiến hành như sau:

- Bước 1: Tớnh tTN

- Bước 2: tỡm tά ứngvới độ tự do γ và cỏc mức xỏc suất khỏc nhau: 0,05; 0,01 và 0,001.

- Bước 3: So sỏnh tTN với tά để tỡm xỏc suất xuất hiện giỏ trị tTN hoàn toàn do ngẫu nhiờn sinh ra.

- Bước 4: Xỏc định mức độ sai khỏc nhau giữa hai số trung bỡnh

* Đối với tớnh trạng định tớnh như tỷ lệ nhiễm, cường độ nhiễm giun đũa cụng

thức tớnh tTN là:

Trong đú: p1 và p2: tỷ lệ nhiễm giun của nhúm 1 và 2. mp1 và mp2: sai số của P1 và P2.

Trong đú: n1 và n2 là dung lượng mẫu của nhúm 1 và 2. Cỏc bước tiếp theo cũng tiến hành như đối với tớnh trạng định lượng.

KẾT QUẢ NGHIấN CỨU VÀ THẢO LUẬN

3.1. Nghiờn cứu một sụ́ đặc điểm dịch tễ bệnh giun đũa bờ, nghộ ở hai huyện thuộc tỉnh Thanh

Húa.

3.1.1. Nghiờn cứu tình hình nhiễm giun đũa bờ, nghộ.

3.1.1.1. Tỷ lệ và cường độ nhiễm giun đũa bờ, nghộ tại một số địa phương.

Để đỏnh giỏ cụ thể tỡnh hỡnh bờ nghộ dưới 3 thỏng tuổi nhiờ̃m giun đũa Neoascaris vitulorum ở 2 huyện của tỉnh Thanh Húa, chỳng tụi đó kiểm tra 888 bờ nghộ ở 6 xó. Kết quả về tỷ lệ bờ nghộ nhiờ̃m giun đũa ở cỏc địa phương được trỡnh bày ở bảng 3.1.

Bảng 3.1. Tỷ lệ và cường độ nhiễm giun đũa ở bờ, nghộ tại hai huyợ̀n Đụng sơn và Triệu Sơn. Địa điểm, huyện xó Số bờ nghộ kiểm tra (con) Số bờ nghộ nhiễm (con) Tỷ lệ

(%) Cường độ nhiễm (số trứng/gam phõn)

< 500 500-800 800-1200 >1200 n % n % n % n % Đụng Sơn 432 134 31,02 74 55,22 44 32,83 15 11,19 1 0,74 Đụng Khờ 155 47 30,32 28 59,57 14 29,78 5 10,63 0 0,00 Đụng Ninh 143 44 30,77 24 54,54 15 34,09 4 9,09 1 2,27 Đụng Minh 134 43 32,09 22 51,16 15 34,88 6 13,95 0 0,00 Triệu Sơn 456 175 38,37 83 47,42 69 39,42 20 11,43 4 2,28 Dõn Lý 163 56 34,35 26 46,42 21 37,50 8 14,28 1 1,78 Dõn Quyền 139 53 38,13 25 47,16 22 41,51 5 9,43 1 1,88 Hợp Thắng 154 66 42,85 32 48,48 26 39,39 7 10,60 2 3,03 Tớnh chung 888 309 34,79 157 50,81 113 36,56 35 11,32 5 1,61