Chỉ tiêu theo dõ
4.3.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của BAP ựến khả năng nhân nhanh và chất lượng chồi.
Chỉ tiêu theo dõi Công thức KIN (mg/l) Hệ số nhân chồi (lần) Chiều cao TB chồi (cm) Chất lượng chồi 1(đ/c) 0 0,87 2,56 + 2 0,5 2,42 2,02 + 3 1,0 3,38 2,68 ++ 4 1,5 2,70 2,23 ++ 5 2,0 2,35 1,55 ++ CV (%) 3,6 4,6 LSD (5%) 0,15 0,27
Ghi chú: + : chồi sinh trưởng kém
++: chồi sinh trưởng ở mức trung bình
Kết quả trên bảng 4.5 cho thấy: ở các công thức thắ nghiệm với KIN khi nồng ựộ KIN bổ sung tăng dần từ 0-1 mg/l, hệ số nhân chồi tăng dần từ 0,87 lần ở công thức ựối chứng (không bổ sung KIN) lên 3,38 lần ở công thức bổ sung 1,0 mg/l KIN, nhưng khi nồng ựộ KIN bổ sung tăng lên 1,5-2,0 mg/l thì lại ức chế nhân chồi, hệ số nhân chồi chỉ ựạt 2,35 lần. Hệ số nhân cao nhất là 3,38 lần với 1,0 mg/l KIN nhưng chất lượng chồi ở các công thức ựều không tốt. Các chồi hình thành ựều giòn, lá có hiện tượng ngả sang màu vàng, dễ rụng và có thể bị chết. Như vậy, ở thắ nghiệm này KIN có tác dụng không nhiều ựến hệ số nhân của ba kắch.
4.3.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của BAP ựến khả năng nhân nhanh và chất lượng chồi. lượng chồi.
BAP (benzyl amino puryl) là chất ựiều tiết sinh trưởng có tác dụng tắch cực trong việc kắch thắch phân chia tế bào, kéo dài thời gian sinh trưởng của
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 42
mô phân sinh và làm hạn chế sự già hoá của tế bào.Trong nhân giống in vitro, BAP có vai trò ựặc biệt quan trọng trong việc kắch thắch mạnh mẽ sự hình thành chồi non, quyết ựịnh hệ số nhân và chất lượng chồi hình thành [22].
để tìm hiểu ảnh hưởng của BAP ựến khả năng nhân và phát triển của chồi ba kắch tôi tiến hành bố trắ thắ nghiệm theo như sơ ựồ ở nghiệm thức 6. Kết quả nghiên cứu ựược thể hiện ở bảng 4.6.
Bảng 4.6: Ảnh hưởng của BAP ựến hệ số nhân chồi Chỉ tiêu theo dõi
Công thức BAP (mg/l) Hệ số nhân chồi (lần) Chiều cao TB chồi (cm) Chất lượng chồi 1(đ/c) 0 0,87 1,56 + 2 0,5 2,37 2,10 ++ 3 1,0 3,27 2,72 ++ 4 1,5 5,11 2,35 ++ 5 2,0 5,59 2,06 +++ 6 2,5 7,80 1,95 +++ 7 3,0 9,53 1,83 +++ 8 3,5 9,86 1,21 ++ 9 4,0 7,63 0,73 + CV (%) 2,3 4,6 LSD (5%) 0,23 0,18
Ghi chú: + : Chồi sinh trưởng kém
++ : Chồi sinh trưởng ở mức trung bình +++: Chồi sinh trưởng tốt
Kết quả nghiên cứu cho thấy:
Ở công thức ựối chứng không bổ sung BAP không hình thành cụm chồi do ựó không có ý nghĩa trong tăng hệ số nhân. Khi bổ sung BAP, ở tất
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 43
cả các công thức ựều hình thành cụm chồi (có hệ số nhân so với công thức ựối chứng). Kết quả cũng cho thấy khi bổ sung nồng ựộ BAP càng cao thì hệ số nhân chồi càng lớn từ 0,87 lần ở công thức ựối chứng không bổ sung BAP lên 9,86 lần ở công thức có bổ sung 3,5 mg/l BAP. Nhưng khi bổ sung BAP nồng ựộ 4,0 mg/l thì lại ức chế khả năng nhân chồi, hệ số nhân chồi chỉ ựạt 7,63 lần; các chỉ tiêu như chiều cao trung bình chồi, chất lượng chồi ựều giảm.
Công thức bổ sung 3,5mg/l BAP cho hệ số nhân cao nhất ựạt 9,86 lần, tiếp ựó là ựến các công thức bổ sung 3,0 mg/l ựạt 9,53 lần. Tuy nhiên, khi ta xét ựến các chỉ tiêu chất lượng của chồi tái sinh như: chiều cao chồi, cũng như qua quan sát hình thái thì rõ ràng ở công thức bổ sung 3,5 mg/l BAP cho chất lượng chồi trung bình.
Công thức bổ sung 3,0 mg/l BAP cho số hệ số nhân chồi ựạt 9,53 lần. đây là hệ số tái sinh khá cao và quan trọng hơn là chồi tái sinh lại có chất lượng tốt.
Hình 4.2: Cụm chồi ba kắch trên môi trường MS + 3,0 mg/l BAP sau 45 ngày
* Nghiên cứu ảnh hưởng phối hợp các chất ựiều hoà sinh trưởng thuộc nhóm cytokinin và auxin ựến khả năng nhân nhanh và chất lượng chồi.
Có thể ựiều khiển sự phát sinh hình thái thông qua tỷ lệ giữa cytokinin/auxin. Về nguyên tắc thì tỷ lệ cytokinin/auxin cao sẽ kắch thắch mẫu cấy phát sinh theo
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 44
hướng tạo chồi. để tìm ựược môi trường tối ưu hơn nữa cho nhân nhanh chồi, tôi nghiên cứu ảnh hưởng của tổ hợp cytokinin/auxin trong quá trình nhân nhanh. Dựa trên kết quả nghiên cứu của các thắ nghiệm trước và một số tài liệu tham khảo, trong thắ nghiệm tiếp theo tôi tập trung xem xét tác ựộng của KIN+IBA; KIN+α - NAA ; BAP +α -NAA + và BAP + IBA ựến quá trình nhân nhanh chồi.