3. NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.3.2 Phương pháp nghiên cứu
3.3.2.1 Phương pháp nghiên cứu ngoài ựồng
- điều tra diễn biến mật ựộ của sâu tơ trên cây bắp cải ựươc tiến hành theo phương pháp của Viện Bảo vệ thực vật [19] .
- Thu thập mẫu ựược tiến hành theo phương pháp của Viện Bảo vệ thực vật. - Phương pháp nuôi sâu: Tiến hành thu thập nhộng ở 3 ựịa ựiểm nghiên cứu, mỗi ựịa ựiểm thu từ 200-300 nhộng, nhộng ở mỗi ựịa ựiểm nghiên cứu ựược ựể riêng trong từng lồng có kắch thước 50x50x50cm, khi nhộng vũ hoá cho ăn thêm dung dịch mật ong 10%. Hàng ngày cho vào mỗi lồng 15-20 cây cải củ có 3-4 lá thật ựược gieo sẵn trong cốc ựể thu ựược các lứa sâu cùng tuổi, các cây cải ựược cho vào và lấy ra sau 24h. Khi sâu non ở ựộ tuổi cuối tuổi 1 ựầu tuổi 2 ựược sử dụng cho các thắ nghiệm ựánh giá mức ựộ mẫn cảm.
Trong quá trình nuôi sâu phải theo dõi thường xuyên, tránh các kẻ thù tiêu diệt sâu như thạch sùng, nhện, kiến...
Hình 3.3: Thu mẫu trên ựồng ruộng
- Phương pháp ựiều tra tình hình sử dụng thuốc trừ sâu trên rau bằng phỏng vấn trực tiếp nông dân và phát phiếu ựiều tra dựa trên mẫu các câu hỏi có sẵn nhằm thu thập các thông tin chắnh sau (chi tiết xem phụ lục):
+ Loại thuốc BVTV nông dân ựã và ựang thường sử dụng trên ruộng rau. + Liều lượng của từng loại thuốc BVTV
+ Phương pháp sử dụng thuốc BVTV của nông dân. + Tần suất sử dụng thuốc BVTV trên ựồng ruộng. + Số lần phun thuốc trong một vụ.
- Phương pháp ựánh giá hiệu lực của thuốc ựối với sâu tơ
+ Phương pháp ựánh giá hiệu lực của 5 thuốc thương mại trừ sâu tơ ngoài ựồng ruộng ựược tiến hành theo tiêu chuẩn 10 TCN 143 - 1990 về Quy phạm khảo nghiệm trên ựồng ruộng hiệu lực phòng trừ sâu tơ trên rau của các thuốc trừ sâu.
- Phương pháp bố trắ:
+ Thắ nghiệm diện hẹp, các ô ựược bố trắ theo khối ngẫu nhiên ựầy ựủ RCB. + Diện tắch ô công thức: 30 m2 Nhắc lại: 03 lần
- Thuốc ựược phun khi mật ựộ sâu tơ khoảng 1,2 Ờ 2,5 con/cây. - Lượng nước thuốc: 500 l/ha.
- Dụng cụ: Bình bơm tay ựeo vai.
3.3.3.2 Phương pháp nghiên cứu trong phòng
Xác ựịnh tắnh mẫn cảm của sâu tơ qua việc xác ựịnh LC50 và LC95: Dùng phương pháp nhúng lá của Tabashinik và Cushing (1987) [52], ựể xác ựịnh ựộ mẫn cảm với TTS của sâu tơ tuổi 2.
Hình 3.4 Thắ nghiệm xác ựịnh mức ựộ mẫn cảm
STT Tên thương mại và tên hoạt chất Liều lượng dùng
1 SHERPA 25 EC (Cypermethrin) 500 (ml/ha) 2 MATCH 050 ND (Lufenutron) 800 (ml/ha) 3 DELFIN 32 WG
(Bacillus thuringiensis BT.α -endotoxin) 1000 (g/ha) 4 PEGASUS 150 SC (Diafenthiuron) 500 (ml/ha) 5 AMMATE 150 SC (Indoxacab) 500 (ml/ha) 6 đỐI CHỨNG Phun nước lã
- Thắ nghiệm thăm dò tìm nồng ựộ thắch hợp: thử nghiệm một thang gồm 6 -7 nồng ựộ khác nhau. Sau ựó tìm ra 5 nồng ựộ ựể thắ nghiệm sao cho tỉ lệ sâu chết ở liều cao nhất là 90 - 95% , ở liều thấp nhất là 10 - 15%.
- Chuẩn bị: Lá bắp cải rửa sạch, lau khô, ựược cắt thành mảnh tròn ựường kắnh 3 Ờ 4cm.
Hộp lồng với ựường kắnh 5 cm, rửa sạch, lau khô.
Mỗi một loại thuốc pha 5 nồng ựộ. Dung dịch có nồng ựộ cao ựược dùng làm dung dịch mẹ (liều 1) muốn chuyển sang nồng ựộ thấp hơn (liều 2) dùng công thức:
C1V1 = C2V2
Trong ựó: C1 Ờ nồng ựộ liều thuốc 1. C2 Ờ nồng ựộ liều thuốc 2.
V1 Ờ thể tắch thuốc liều 1 dùng ựể pha chế. V2 Ờ thể tắch thuốc liều 2 dùng ựể pha chế.
Tiến hành: Nhúng lá bắp cải vào dung dịch thuốc 10 - 20 giây, ựể khô tự nhiên sau ựó cho vào hộp lồng. Mỗi thắ nghiệm ựược nhắc lại 03 lần với 30 cá thể/nồng ựộ thắ nghiệm, công thức ựối chứng (nhúng lá vào nước cất).
Theo dõi và ghi nhận tỉ lệ sâu chết 24h sau xử lý thuốc. Riêng với Delfin 32WG và Match 050ND theo dõi 72h.
Hình 3.6. Theo dõi tỷ lệ sâu chết
3.3.3.3 Xác ựịnh hiệu lực của thuốc trừ sâu:
+ Chỉ tiêu ựiều tra hiệu lực của thuốc trên ựồng ruộng
- Hiệu lực của các thuốc thử nghiệm ở 1, 3, 5 và 7 ngày sau phun thuốc. - Hiệu lực thuốc ựược hiệu ựắnh bằng công thức Henderson - Tilton. Ta x Cb
H (%) = (1 - ) x 100 Ca x Tb
Trong ựó:
- H : hiệu lực thuốc (%)
- Cb: Số sâu tơ sống ở công thức ựối chứng trước xử lý - Tb: Số sâu tơ sống ở công thức thắ nghiệm trước xử lý - Ca: Số sâu tơ sống ở công thức ựối chứng sau xử lý - Ta: Số sâu tơ sống ở công thức thắ nghiệm sau xử lý - Số liệu về hiệu lực thuốc ựược xử lý bằng phương pháp đa biên ựộ của Duncan với mức tin cậy 95% bằng chương trình IRRISTAT 4.0.
- Các số liệu khác và ựồ thị minh họa ựược xử lý theo chương trình Excel. - Số liệu về xác ựịnh giá trị LC50 và LC95 ựược xử lý bằng chương trình POLO PLUS do Viện nghiên cứu lúa Quốc tế IRRI cung cấp.