3. đỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.3.2.Phương pháp ựánh giá các chỉ tiêu số lượng, chất lượng tinh dịch
+ Thể tắch tinh dịch: Bằng quan sát trên ống ựong có chia vạch ml và ghi chép vào sổ sách. Thể tắch tinh dịch ựạt tiêu chuẩn là những lần khai thác tinh phải có thể tắch tinh dịch lớn hơn hoặc bằng 3ml/ lần khai thác.
+ Nồng ựộ tinh trùng: được ựo bằng máy so màu Photomaster SDM5 của hãng MINITUB bằng cách dùng micropipét hút 0,02 ml tinh dịch pha loãng trong 4 ml nước muối sinh lý 0,9%, hơi lắc nhẹ cho ựều và ựưa vào máy Photomaster SDM5. Chỉ số hiện trên máy là nồng ựộ tinh trùng (tỷ/ml). Nồng ựộ tinh trùng ựạt tiêu chuẩn là những mẫu tinh dịch có nồng ựộ tinh trùng lớn hơn hoặc bằng 0,8 tỷ/ml tinh dịch.
+ Hoạt lực tinh trùng: đánh giá bằng kắnh hiển vi có kết nối với màn hình theo phương pháp của Nhật Bản: dùng micropipét hút 0,01 ml tinh dịch + 0,09 ml môi trường A rồi nhỏ lên phiến kắnh chuyên dụng, ựậy lại men lên sau ựó ựưa lên kắnh hiển vi có gắn camera phóng ựại 100 lần và ựánh giá hoạt lực theo thang ựiểm 10 của Milovanov, cụ thể như sau:
Bảng 3.1: Thang ựiểm ựánh giá hoạt lực tinh trùng
Ăựiểm) 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0
Ă%) 5-15 15-25 25-35 35-45 45-55 55-65 65-75 75-85 85-95 95-100
Hoạt lực tinh trùng ựạt tiêu chuẩn là những mẫu tinh dịch có hoạt lực tinh trùng lớn hơn hoặc bằng 70%.
+ pH tinh dịch: đo pH tinh dịch bằng giấy ựo pH của hãng Merck - đức. pH ựạt tiêu chuẩn là nhứng mẫu tinh dịch có pH lớn hơn 6,5 và nhỏ hơn 7 (6,5 ≤ pH ≤ 7)
+ Tỷ lệ tinh trùng sống: Theo phương pháp của Milovanov là nhỏ 1 giọt tinh dịch lên lam kắnh lõm + 2 giọt Eosin 5%, ựảo nhẹ rồi sau ựó nhỏ 4 giọt Nogrosin 10%. đảo nhẹ nhàng, ựể ấm 37oC trong 30 giâỵ Lấy 1 giọt phết kắnh dàn mỏng ựều ựưa lên kắnh hiển vi với ựộ phóng ựại 400 lần ựếm tổng số 500 tinh trùng rồi tắnh tỷ lệ %, bằng phép số học thông thường. Tinh trùng chết là những tinh trùng bắt màu ựỏ Eosin.
Số lượng tinh trùng sống Tỷ lệ tinh
trùng sống (%) = Tổng số tinh trùng ựếm ựược x 100
Tỷ lệ tinh trùng sống ựạt tiêu chuẩn là những lần lấy tinh có tỷ lệ tinh trùng sống lớn hơn hoặc bằng 80%.
+ Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình (K): Bằng phương pháp nhuộm xanh methylen 5% khoảng 5 - 7 phút hoặc ựỏ Fucsin 5% khoảng 5 - 7 phút và ựếm tinh trùng kỳ hình và tinh trùng bình thường trên kắnh hiển vi 500 tinh trùng rồi tắnh toán bằng phép tắnh số học thông thường.
Số lượng tinh trùng kỳ hình
K (%) =
Tổng số tinh trùng ựếm ựược x 100
Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình ựạt tiêu chuẩn là những lần lấy tinh có tỷ lệ tinh trùng kỳ hình nhỏ hơn hoặc bằng 20%.
+ Tổng số tinh trùng tiến thẳng trong tinh dịch/lần khai thác (VAC): Bằng cách nhân tắch số của V, A và C. VAC ựạt tiêu chuẩn là những mẫu tinh
dịch có VAC phải thoả mãn ựồng thời cả 3 chỉ tiêu tạo nên nó: V≥ 3ml; A≥70%, C≥0,8 tỷ/ml.