CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
3.1. Đặc điểm chung, lâm sàng, cận lâm sàng của nhóm nghiên cứu
3.3.3. Đánh giá mối liên quan đặc điểm di truyền và một/đa yếu tố lâm sàng liên quan đến động kinh kháng thuốc
3.3.3.1. Mối liên quan giữa đặc điểm di truyền và tuổi khởi phát động kinh đến khả năng kháng thuốc
Bảng 3.26. Mối liên quan các biến thể gen SCN1A, ABCB1 và GABRA1 và tình trạng kháng thuốc trong nhóm có tuổi khởi phát > 12 tháng
Gen Biến thể
Nhóm đáp ứng
thuốc n %
Nhóm kháng thuốc n %
OR 95% CI
p
SCN1A
rs2298771
AA 59 36 ref
GA 9 9 1,163 0,577-4,619 0,336
GG 1 1
GG+GA/AA 10 10 1,631 0,540-4,201 0,336 GA+AA/GG 68 45 0,664 0,016-26,358 0,415
A 127 81 0,639 0,236-1,725
G 11 11 1,564 0,579-4,226 0,357
rs3812718
CC 6 8 ref
CT 36 (53,73) 14 (42,42) 0,299 0,082-1,032 0,042
TT 26 23 0,671 0,189-2,260 0,5
CC+CT/TT 42 22 0,897 0,450-1,696
CT+TT/CC 62 37 1,136 0,589-2,219 0,697
C 48 30 0,918 0,519-1,609 0,761
T 88 60 1,089 0,621-1,925
rs10188577
AA 46 30 ref
Gen Biến thể
Nhóm đáp ứng
thuốc n %
Nhóm kháng thuốc n %
OR 95% CI
p
AG 21 14 1,024 0,443-2,325 0,975
GG 1 1 1,524 0,038-61,020 0,763
AA+AG/GG 67 44 1,04 0,477-2,222 0,922 GG+AG/AA 22 15 0,961 0,450-2,092 0,922 A 113 74 0,939 0,465-1,932 0,866
G 23 16 1,064 0,517-2,146 0,866
ABCB1
rs1128503
TT 31 18 0,81 0,219-3,192 0,752
TC 30 22 1,019 0,279-3,968 0,967
CC 7 5 ref
TT+TC/CC 61 40 0,898 0,474-1,709 0,741 TC+CC/TT 37 27 1,112 0,584-2,108 0,741
T 92 58 0,866 0,493-1,528 0,617
C 44 32 1,153 0,654-2,025
rs1045642
TT 11 (16,42) 3 (9,09) 0,275 0,056-1,034 0,05 TC 34 18 0,512 0,224-1,148 0,098
CC 23 24 ref
TT+TC/CC 45 21 0,636 0,326-1,219 0,169 TC+CC/TT 57 42 1,571 0,820-3,064 0,169 T 56 (41,79) 24 (36,36) 0,522 0,288-0,925 0,025 C 80 (58,21) 66 (63,64) 1,914 1,079-3,464 0,025
GABRA1
rs2279020
GG 14 9 ref
GA 37 27 1,128 0,425-3,108 0,798
AA 17 9 0,827 0,250-2,716 0,743
GG+GA/AA 51 36 1,058 0,578-1,936 0,851 GA+AA/GG 54 36 0,944 0,516-1,727 0,815
G 65 45 1,091 0,639-1,856 0,745
A 71 45 0,915 0,535-1,564 0,745
Trong nhóm trẻ mắc động kinh khởi phát sớm ( ≤ 12 tháng), chúng tôi không tìm thấy sự khác biệt có ý nghĩa thống kê nào giữa hai nhóm kháng
thuốc và nhóm đáp ứng khi so sánh tần số kiểu gen/allele cũng như mô hình di truyền của 06 biến thể thuộc các gen SCN1A (rs2298771, rs3812718, rs10188577), ABCB1 (rs1128503, rs1045642) và GABRA1 (rs2279020) (Phụ lục 6, trang XXI).
Ngược lại, ở nhóm trẻ mắc động kinh khởi phát > 12 tháng, kết quả cho thấy có sự khác biệt có ý nghĩa thống kê trong phân bố kiểu gen SCN1A rs3812718CT (OR = 0,299; p = 0,042), ABCB1 rs1045642TT (OR = 0,275; p
= 0,05) và hai allele T (OR = 0,522; p = 0,025), allele C (OR = 1,914; p = 0,025) biến thể ABCB1 rs1045642 (Bảng 3.24). Như vậy, hai kiểu gen SCN1A rs3812718CT, ABCB1 rs1045642TT và allele T ABCB1 rs1045642 có thể là những yếu tố giúp làm giảm nguy cơ kháng thuốc (OR < 1); trong khi allele C ABCB1 rs1045642 làm tăng nguy cơ kháng thuốc (OR > 1) ở trẻ mắc động kinh khởi phát sau 1 tuổi. Ngoài hai kiểu gen và hai allele trên, chúng tôi không tìm thấy sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa hai nhóm kháng thuốc và đáp ứng khởi phát sau 1 tuổi ở các biến thể gen còn lại. Chi tiết kết quả đánh giá đặc điểm di truyền các biến thể gen SCN1A, ABCB1 và GABRA1 được trình bày trong Bảng 3.26.
3.3.3.2 Mối liên quan đặc điểm di truyền và biểu hiện sốt co giật đến khả năng kháng thuốc
Bảng 3.27. Mối liên quan các biến thể gen SCN1A, ABCB1 và GABRA1 và tình trạng kháng thuốc trong nhóm không có tiền sử co giật do sốt
Gen Biến thể
Nhóm đáp ứng
n (%)
Nhóm kháng thuốc n (%)
OR 95% CI p
SCN1A
rs2298771
AA 68 51 ref
GA 14 20 1,891 0.873-4.193 0,099
GG 1 1
Gen Biến thể
Nhóm đáp ứng
n (%)
Nhóm kháng thuốc n (%)
OR 95% CI p
GG+GA/AA 15 21 1,891 0.873-4.193 0,099 GA+AA/GG 82 71 0,868 0.021-34.279 0,92
A 150 122 0,573 0.271-1.180 0,125
G 16 22 1,742 0.847-3.678
rs3812718
CC 9 19 ref
CT 42 (50,6) 24 (33,33) 0,276 0.103-0.696 0,005
TT 32 29 0,436 0.162-1.102 0,074
CC+CT/TT 51 43 1,176 0.685-2.019 0,551 CT+TT/CC 74 53 0,85 0.495-1.459
C 60 (36,14) 62 (43,02) 1,762 1.097-2.840 0,018 T 106 82 0,749 0.473-1.184 0,214
rs10188577
AA 57 48 ref
AG 22 23 1,239 0.612-2.515 0,544
GG 4 1 0,329 0.011-2.476 0,258
AA+AG/GG 79 71 1,027 0.537-1.958 0,934 GG+AG/AA 26 24 0,973 0.510-1.860
A 136 119 1,048 0,583-1,899 0,87
G 30 25 0,953 0,526-1,714
ABCB1
rs1128503
TT 37 29 ref
TC 35 32 1,164 0,586-2,321 0,658
CC 11 11 1,271 0,474-3,416 0,621
TT+TC/CC 72 61 0,906 0,528-1,556 0,719 TC+CC/TT 46 43 1,102 0,642-1,893 0,719 T 109 90 0,871 0,546-1,391 0,562
C 57 54 1,146 0,718-1,829 0,562
rs1045642
Gen Biến thể
Nhóm đáp ứng
n (%)
Nhóm kháng thuốc n (%)
OR 95% CI p
TT 13 7 0,457 0,148-1,309 0,134
TC 45 35 0,65 0,323-1,3 0,217
CC 25 30 ref
TT+TC/CC 58 42 0,606 0,309-1,177 0,134 TC+CC/TT 70 65 1,702 0,647-4,853 0,271
T 71 49 0,691 0,433-1,096 0,114
C 95 95 1,446 0,911-2,305
GABRA1
rs2279020
GG 19 17 ref
GA 46 41 0,991 0,453-2,194 0,992
AA 18 14 0,781 0,328-2,295 0,774
GG+GA/AA 65 58 1,038 0,625-1,724 0,883 GA+AA/GG 64 55 0,963 0,579-1,599 0,883
G 84 75 1,06 0,677-1,661 0,794
A 82 69 0,942 0,602-1,475 0,794
Trong nghiên cứu, chúng tôi khảo sát mối liên quan giữa đặc điểm di truyền và tiền sử co giật do sốt ở trẻ mắc động kinh với tình trạng kháng thuốc chống động kinh. Tuy nhiên, số lượng trẻ đáp ứng thuốc có tiền sử co giật do sốt chưa đảm bảo cỡ mẫu thống kê (cỡ mẫu = 18), vì vậy chúng tôi tiến hành khảo sát ngược lại trên nhóm không có tiền sử co giật do sốt và đánh giá mối tương quan đa hình các biến thể gen SCN1A, ABCB1 và GABRA1. Kết quả phân tích chỉ ra sự khác biệt có ý nghĩa trong phân bố kiểu gen dị hợp tử CT (OR = 0,276; p = 0,005) và allele C (OR = 1,762; p = 0,018) của biến thể SCN1A rs3812718 giữa hai nhóm và đáp ứng thuốc (Bảng 3.27).
3.3.3.3. Mối liên quan đặc điểm di truyền và tình trạng phát triển tâm thần - vận động đến khả năng kháng thuốc
Bảng 3.22. Mối liên quan các biến thể gen SCN1A, ABCB1 và GABRA1 và tình trạng kháng thuốc trong nhóm chậm phát triển tâm thần - vận động
Gen Biến thể
Nhóm đáp ứng thuốc
n (%)
Nhóm kháng thuốc n (%)
OR 95% CI p
SCN1A
rs2298771
AA 34 74 ref
AG 3 (7,89) 30 (28,57) 4,373 1,414-19,959 0,01
GG 1 1
GG+GA/AA 4 (10,53) 31 (29,52) 4,373 1,414-19,959 0,01 GA+AA/GG 37 104 2,813 0,070-111,499 0,459
A 71 (93,42) 178 (84,76) 0,246 0,055-0,721 0,011 G 5 (6,58) 32 (15,24) 4,056 1,385-17,942 0,011
rs3812718
CC 5 26 ref
CT 17 37 0,429 0,125-1,259 0,119
TT 15 42 0,55 0,159-1,634 0,276
CC+CT/TT 22 63 1,157 0,613-2,211 0,647 CT+TT/CC 32 79 0,864 0,452-1,630 0,647
C 27 89 1,276 0,741-2,230 0,375
T 47 121 0,783 0,448-1,348 0,375
rs10188577
AA 23 75 ref
AG 12 29 0,74 0,327-1,727 0,472
GG 2 1 0,166 0,005-2,141 0,087
AA+AG/GG 35 104 1,389 0,645-2,897 0,386
GG+AG/AA 14 30 0,719 0,345-1,549
A 58 179 1,595 0,796-3,103 0,172
G 16 31 0,626 0,322-1,255
GABRA1
rs2279020
GG 8 20 ref
GA 21 60 1,149 0,417-2,965 0,784
AA 8 25 1,244 0,385-4,037 0,701
Gen Biến thể
Nhóm đáp ứng thuốc
n (%)
Nhóm kháng thuốc n (%)
OR 95% CI p
GG+GA/AA 29 80 0,941 0,515-1,720 0,842 GA+AA/GG 29 85 1,062 0,581-1,941 0,842
G 37 100 0,909 0,533-1,549 0,724
A 37 110 1,099 0,645-1,874 0,724
ABCB1
rs1128503
TT 17 39 ref
TC 12 51 1,836 0,786-4,411 0,151
CC 8 15 0,815 0,290-2,392 0,7
TT+TC/CC 29 90 0,942 0,484-1,807 0,853 TC+CC/TT 20 66 1,061 0,553-2,065 0,853
T 46 129 0,97 0,557-1,671 0,911
C 28 81 1,029 0,598-1,795 0,911
rs1045642
TT 6 9 0,469 0,139-1,651 0,205
TC 17 51 0,935 0,407-2,121 0,867
CC 14 45 ref
TT+TC/CC 23 60 0,842 0,448-1,594 0,592 TC+CC/TT 31 96 1,187 0,627-2,228 0,592
T 29 69 0,759 0,439-1,324 0,324
C 45 141 1,317 0,754-2,277 0,324
Trong nhóm nghiên cứu, chúng tôi đánh giá mối liên quan đặc điểm di truyền các biến thể gen SCN1A, ABCB1 và GABRA1 trong nhóm trẻ có chậm phát triển tâm thần - vận động. Kết quả chỉ ra sự khác biệt có ý nghĩa thống kê giữa nhóm kháng thuốc và nhóm đáp ứng trong phân bố kiểu gen GA (OR = 4,373; p = 0,01) và cả 2 allele A (OR = 0,246; p = 0,011), G (OR = 4,056; p = 0,011) của biến thể SCN1A rs2298771 (Bảng 3.28). Thêm vào đó, mô hình di truyền lặn (GG+GA/AA) biến thể gen SCN1A rs2298771 ở nhóm kháng thuốc cao hơn có ý nghĩa thống kê so với nhóm đáp ứng thuốc (OR = 4,373; p = 0,01)
3.3.3.4. Mối liên quan đặc điểm di truyền và tiền sử trạng thái động kinh đến khả năng kháng thuốc
Bảng 3.29. Mối liên quan các biến thể gen SCN1A, ABCB1 và GABRA1 và tình trạng kháng thuốc trong nhóm không có tiền sử trạng thái động kinh
Gen Biến thể Đáp ứng n (%)
Kháng thuốc n (%)
OR 95% CI p
SCN1A
rs2298771
AA 82 59 ref
AG 16 23 1,984 0,967-4,160 0,058
GG 1 1
GG+GA/AA 17 24 1,984 0,967-4,160 0,058 GA+AA/GG 98 82 0,837 0,021-33,012 0,9
A 180 141 0,549 0,273-1,075 0,076
G 18 25 1,821 0,929-3,650 0,076
rs3812718
CC 11 18 ref
CT 53 (53,54) 28 (33,73) 0,327 0,131-0,784 0,009
TT 35 37 0,651 0,261-1,568 0,329
CC+CT/TT 64 46 0,973 0,590-1,600 0,914
CT+TT/CC 88 65 1,027 0,624-1,693
C 75 64 1,029 0,671-1,574 0,894
T 123 102 0,971 0,635-1,488
rs10188577
AA 70 57 ref
AG 25 25 1,226 0,633-2,377 0,538
GG 4 1 0,34 0,012-2,540 0,271
AA+AG/GG 95 82 1,038 0,562-1,911 0,902
GG+AG/AA 29 26 0,962 0,523-1,776
A 165 139 1,028 0,589-1,809 0,918
G 33 27 0,972 0,552-1,697
ABCB1
rs1128503
TT 43 31 ref
TC 41 42 1,416 0,752-2,683 0,274
CC 15 10 0,928 0,356-2,344 0,868
Gen Biến thể Đáp ứng n (%)
Kháng thuốc n (%)
OR 95% CI p
TT+TC/CC 84 73 0,936 0,571-1,532 0,791 TC+CC/TT 56 52 1,068 0,652-1,748 0,791
T 127 104 0,937 0,610-1,441 0,768
C 71 62 1,066 0,693-1,637 0,768
rs1045642
TT 15 7 0,392 0,133-1,057 0,058
TC 51 36 0,584 0,309-1,096 0,09
CC 33 40 ref
TT+TC/CC 66 43 0,721 0,438-1,181 0,191 TC+CC/TT 84 76 1,386 0,846-2,282 0,191 T 81 (40,91) 50 (30,12) 0,623 0,401-0,963 0,032 C 117 (59,09) 116 (69,88) 1,602 1,037-2,490 0,032
GABRA1
rs2279020
GG 22 19 ref
GA 54 46 0,985 0,473-2,065 0,97
AA 23 18 0,907 0,375-2,187 0,824
GG+GA/AA 76 65 1,028 0,642-1,647 0,904 GA+AA/GG 77 64 0,971 0,607-1,555 0,904
G 98 84 1,045 0,691-1,581 0,833
A 100 82 0,956 0,632-1,446 0,833
Trong nghiên cứu, chúng tôi khảo sát mối liên quan giữa đặc điểm di truyền và tiền sử trạng thái động kinh với tình trạng kháng thuốc. Tuy nhiên, số lượng trẻ đáp ứng thuốc có tiền sử trạng thái động kinh chưa đảm bảo cỡ mẫu thống kê (cỡ mẫu = 2), vì vậy chúng tôi tiến hành khảo sát ngược lại trên nhóm không có tiền sử trạng thái động kinh và đánh giá mối tương quan đa hình các biến thể gen SCN1A, ABCB1 và GABRA1. Kết quả phân tích chỉ ra sự khác biệt có ý nghĩa thống kê trong phân bố kiểu gen SCN1A rs3812718CT (OR = 1,984; p = 0,01) và phân bố của cả hai allele T (OR = 0,623; p = 0,032) và allele C (OR = 1,602; p = 0,032) biến thể ABCB1 rs1045642 (Bảng 3.29).
3.3.3.5. Đánh giá mối liên quan đặc điểm di truyền kết hợp cùng đa yếu tố lâm sàng liên quan đến khả năng kháng thuốc
Bảng 3.30. Mối liên quan giữa kiểu gen SCN1A rs2298771GA, SCN1A rs3812718CT và một vài yếu tố nguy cơ động kinh kháng thuốc
Yếu tố nguy cơ lâm sàng và biến thể gen SCN1A rs2298771GA, SCN1A
rs3812718CT
OR 95% CI p
Điểm chặn (Intercept) 0,05 0,02 – 0,11 <0,001 SCN1A rs2298771 [GA] 2,43 0,99 – 6,50 0,062
Khởi phát sớm 1,80 0,87 – 3,79 0,116
Tiền sử co giật do sốt 3,23 1,42 – 7,87 0,007 Tiền sử co giật sơ sinh 3,57 0,95 – 18,73 0,086 Chậm phát triển tâm thần - vận động 25,56 10,69 – 71,08 <0,001
Quan sát (Observations) 211
R2 Tjur 0,433
Điểm chặn (Intercept) 0,07 0,01 – 0,29 0,001
SCN1A rs3812718 [CT] 0,38 0,12 – 1,05 0,071
Khởi phát sớm 2,30 0,88 – 6,13 0,091
Tiền sử co giật do sốt 2,66 0,93 – 8,43 0,078 Tiền sử co giật sơ sinh 3,11 0,63 – 22,05 0,202 Chậm phát triển tâm thần - vận động 34,16 10,27 – 162,22 <0,001
Quan sát (Observations) 130
R2 Tjur 0,482
Thông qua một loạt phân tích mối tương quan giữa đặc điểm di truyền đến khả năng kháng thuốc động kinh ở trẻ một cách tổng quát hoặc gắn với các yếu tố lâm sàng đi kèm, chúng tôi lựa chọn hai kiểu gen SCN1A rs2298771GA và
rs3812718CT để phân tích sâu hơn. Áp dụng mô hình hồi quy logistic, đánh giá mối tương quan giữa hai biến thể này đến khả năng kháng thuốc khi tác động cùng các chỉ số lâm sàng đặc trưng khác, bao gồm: khởi phát sớm (≤ 12 tháng), tiền sử co giật do sốt, tiền sử co giật sơ sinh và chậm phát triển tâm thần - vận động. Phân tích chỉ ra không có mối quan hệ có ý nghĩa thống kê giữa hai SNP và tính kháng thuốc ở cả hai nhóm động kinh (p > 0,05). Những trẻ có chậm phát triển tâm thần – vận động và tiền sử co giật do sốt có nguy cơ kháng thuốc cao hơn (p < 0,05).